iNOS基因重组逆转录病毒的包装及高滴度病毒液的制备

目的利用逆转录病毒载体PLXSN介导iNOS基因转染,为逆转录病毒介导的iNOS转基因防治血管移植术后再狭窄的研究奠定实验基础。方法采用QIAGEN plasmid Maxi Kit纯化PLXSN-iNOS;通过脂质体介导的DNA转染法将PLXSN-iNOS导入包装细胞PA317中;经G418筛选获得抗性克隆,命名为PA317/iNOS;提取抗性克隆细胞基因组DNA,用PCR进行鉴定;用NIH3T3细胞测定病毒上清滴度。结果PA317/iNOS细胞能稳定合成和分泌重组逆转录病毒颗粒,并在约142 bp处扩增出特异的片段;PLXSN-iNOS病毒上清的最高滴度为1.6×106CFU/mL。结论逆转录病毒载体PLXSN能有效介导iNOS基因的转染。

逆转录病毒介导诱导型一氧化氮合酶基因转染抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

目的:研究逆转录病毒介导诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转染对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,探讨iNOS转基因治疗血管移植术后再狭窄的可行性。方法:将不同滴度的病毒上清转染体外培养的VSMC;采用RT-PCR、Western-blot检测VSMC内iNOSmRNA和iNOS蛋白的表达;用Griess法检测iNOS转基因细胞的培养液中一氧化氮(NO)的含量;用改良MTT法检测iNOS转基因对VSMC增殖的抑制作用。结果:不同滴度的PLXSNiNOS转染体外培养的VSMC 48 h后,在VSMC内可检测到外源性iNOSmRNA和iNOS蛋白,表达水平随病毒滴度的增加而增强,呈现剂量依赖性;而用最高滴度的PLXSN转染体外培养的VSMC 48 h后,在VSMC内未能检测到外源性iNOS mRNA和iNOS蛋白表达;iNOS转基因细胞的培养液中NO含量显著增高,同时VSMC增殖受到明显抑制,均呈现剂量依赖性。结论:逆转录病毒介导iNOS基因可高效转染体外培养的VSMC,并在细胞内表达活性的iNOS蛋白,而且产生大量的NO,明显抑制VSMC增殖。为iNOS转基因治疗血管移植术后再狭窄的临床应用提供有力的实验依据。

重度肺动脉瓣狭窄147例外科治疗

目的总结重度肺动脉瓣狭窄外科治疗的临床经验。方法对147例重度肺动脉瓣狭窄患者在平行体外循环下施行外科手术治疗,其中肺动脉瓣切开术32例,右室流出道跨瓣环心包补片115例。结果全组术后死亡4例,死亡原因为低心排综合症。其余手术顺利,术后恢复良好。结论充分解除右室流出道梗阻,合理加宽肺动脉是手术成功的关键。自体心包补片加宽右室流出道及肺动脉,能有效解决流出道梗阻及肺动脉狭窄,并可预防残余梗阻的发生。

改良植块贴壁法建立大鼠主动脉平滑肌细胞体外培养模型

目的:建立大鼠主动脉平滑肌细胞体外培养模型。方法:参照传统的主动脉平滑肌细胞培养方法,在动物体重、中膜的取材、植块贴壁过程、培养基选择、细胞传代等多个关键环节进行改进,成功建立了大鼠主动脉平滑肌细胞体外培养模型;用倒置相差显微镜对培养细胞进行形态学观察,用特异性α-SM-actin单克隆抗体免疫组织化学对培养细胞进行鉴定。结果:台盼蓝检查传代细胞的存活率大于96%;培养细胞排列呈梭形及“峰”“谷”状的结构特征;免疫组织化学染色鉴定培养细胞中的平滑肌细胞的纯度为97%。结论:此培养方法可作为研究血管平滑肌细胞生物学行为和移植血管再狭窄机制的有效模型。

基于遗传算法的工程项目投资方案优选模型

通过类似虚拟企业伙伴选择的机制,在考虑方案本身优劣的同时,寻求最匹配的组合来达到整体方案最优的目标.分析了子项目方案间的相互影响关系,在考虑投资额和工期两个因素的基础上,从项目整体最优的角度,建立了项目总体决策方案优选的成本最小化模型,并采用遗传算法给予求解,最后,通过一个算例证明了模型的实用性和算法的有效性.

高住低练对短道速滑运动员VO_2 max指标影响的研究

以15名短道速滑运动员为研究对象,随机分高住低练(Hilo)实验组8名和低住低练(Lolo)对照组7名。采用高住低练(Hilo)训练法,在高住低练实验前及实验后对运动员进行2次最大吸氧量测试。测试结果表明:2组实验前、后组内配对T检验均无显著性差异。实验组与对照组配对T检验也无显著性差异。但绝对最大吸氧量和相对最大吸氧量的最大值和平均值,实验组变化幅度提高大于对照组,表明Hilo训练法对速滑运动员的最大吸氧量有提高的趋势,有氧耐力能力有所增加。

模糊自适应控制理论在公交优先信号控制中的应用

针对城市交通信号控制及公交优先问题,提出了基于模糊自适应控制的公交优先信号控制算法,通过对车辆在交叉口延误时间的估算,对量化因子Ie进行自适应调整。仿真结果表明,自适应模糊控制能有效地减少公交车辆延误,具有较强的自适应能力,提供了一种解决城市交通堵塞问题的途径,可用于未来的信号控制系统中。

iNOS转基因在血管平滑肌细胞的表达

目的研究逆转录病毒介导诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因在体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)中的表达。方法通过脂质体介导的DNA转染法将PLXSNiNOS导入PA317细胞中;经G418筛选获得抗性克隆;用NIH3T3细胞测定病毒上清滴度;将病毒上清转染体外培养的VSMC;采用RT-PCR、Westernblot检测VSMC内iNOS mRNA和蛋白的表达。结果PLXSNiNOS转染体外培养的VSMC 48 h后,在VSMC内可检测到外源性iNOS mRNA和蛋白;而用PLXSN转染体外培养的VSMC 48 h后未能检测到外源性iNOSmRNA和蛋白表达。结论逆转录病毒介导iNOS基因可高效转染体外培养的VSMC,并在细胞内表达iNOS蛋白。

改良腋窝小切口在胸科手术中的应用

腋窝小切口开胸是目前微创胸科手术代表之一，它与其它胸科手术切口一样各具优缺点。我们将其改良为腋窝下5～6cm处做切口开胸可使其避短扬长。1994年至现在我们共做21例这种切口，本文将其做一总结，并与腋窝小切口进行了比较，指出改良腋窝小切口较腋窝小切口更具有暴露好，操作容易，可随时改变切口方向使其成为前外侧切口，临床可应用的范围更广等优点。

电视新闻提词器

本文介绍了新闻提词器的组成原理和提词器软件的使用及基本故障的处理方法。

水蛭及其有效成分治疗糖尿病肾脏病的研究进展

糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病常见的并发症,是目前引起终末期肾病(ESRD)的重要原因;在美国、欧洲、日本等发达国家,约40%ESRD患者来自于DKD,目前我国DKD导致ESRD的比重日益增加,糖尿病于10~19年后死于肾衰竭者占53%[1]。DKD主要表现为尿中白蛋白持续升高和(或)肾小球滤过率(GFR)进行性下降,其呈进行性发展,早期多无明显症状,表现为微量蛋白尿,而一旦出现显性蛋白尿则提示病情已进入中晚期,最终进展为终末期肾功能衰竭。

我国企业合并会计方法选择问题的探讨

本文从准则制定的角度,对我国企业合并准则制定中会计方法选择问题进行了探讨。在分析企业合并方式的基础上,介绍了与之相适应的合并会计方法,并进一步对合并会计方法的选择及其经济后果进行阐述。本文重点研究了我国企业合并会计方法的现状以及如何根据我国的现实会计环境选择企业合并会计方法,进而提出制定企业合并准则应选择的合并方法。

Tuft cell-ILC2环路在肠道2型黏膜免疫中作用的研究进展

肠道Tuft细胞因其特殊形态早在60年前就已经被确认为一个单独的细胞类型,但其生理功能还并不十分清楚。近几年来,Tuft cell-ILC2环路在肠道2型免疫中的作用逐渐被发现,即Tuft细胞可作为"感受器"被肠道内寄生虫激活而分泌IL-25,IL-25进一步促进2型固有免疫细胞(ILC2s)的增生和IL-13的分泌,IL-13作用于肠干细胞导致Tuft细胞和Goblet细胞增生,从而实现了从Tuft细胞到ILC2s到肠上皮的正反馈环路,这一环路的激活还引起小肠长度增加和伴随免疫现象。肠道内琥珀酸盐(Succinate)作用于Tuft细胞表面Sucnr1受体在激活这一环路中发挥了关键作用,且不依赖于适应性免疫。这些研究揭示了饮食、肠道共生物和Tuft cell-ILC2环路的关系,也极大增进了人们对于寄生虫免疫的理解。本文将对此进行综述。

黏膜相关恒定T细胞在肝纤维化中的作用研究进展

肝纤维化是各种致病因素(包括病毒感染、酗酒、非酒精性脂肪肝、寄生虫等)引起的慢性肝损伤所共有的病理改变,是发生肝硬化的必经关键环节。长期的肝脏慢性炎症在经历肝纤维化和肝硬化阶段后会最终导致肝癌的发生[1]。我国是乙肝大国,肝硬化的发病率高,延缓、阻断或逆转肝纤维化是防治肝硬化及肝癌的重要策略。去除病因在肝纤维化治疗中具有重要作用,然而病因治疗并不能完全代替抗纤维化治疗。目前在肝纤维化的治疗方面仍然缺乏突破性的药物。对肝纤维化发病机制的深入研究与探索将能更好地指导药物开发和临床决策。黏膜相关恒定T细胞(mucosal-associated invariant T cell,MAIT)作为非经典固有淋巴细胞近年来受到广泛关注;而肝脏是生理状态下MAIT丰度最高的器官,最新研究表明MAIT高度参与肝纤维化的病理过程。本文就MAIT在肝纤维化中的作用及研究进展进行综述如下。

内蒙古广播电视台2x120m2新闻直播演播室群系统设计和实现

本文介绍内蒙古广播电视台2x120m^2新闻直播演播室群视音频系统的设计思想和功能。与传统单个的演播室系统相比,强调新闻资讯演播室群功能性与实用性融于一体的设计理念。

互联网视音频技术现状与展望

互联网视频的相关概念早已诞生,但在相关技术以及网络力量还不够发达的时期,概念终究就只是概念而已。幸而有一辈又一辈的互联网技术人员不断对其进行攻克,到如今互联网视音频已经不再是遥不可及的梦想,相关的技术也已经相对完善。当前的互联网视音频技术主要包含流媒体协议,视音频的封装格式,视音频的压缩编码等内容。文中对当前正在使用中的几种相关技术标准等进行了对比,并对未来视音频技术的发展方向以及可能的发展前景进行了预测。