谈勇治疗卵巢功能低下相关性疾病经验探析

卵巢功能低下相关性疾病是一个动态的,逐渐进展的过程。从卵巢储备功能减退到早发性卵巢功能不全,最终发展至卵巢早衰的终末阶段。谈勇教授,江苏省名中医,岐黄学者,继承国医大师夏桂成教授学术思想,将中医与现代生殖技术相结合,在治疗卵巢功能低下性相关疾病方面有着丰富的临床经验。谈勇教授认为该类疾病主要病机在于肾中阴阳失调,治疗以滋阴补阳方序贯为基础,重在经后期滋阴填精,临证辨证施治,适时培补脾肾,交合心肾,促进心(脑)-肾-肝脾-子宫轴功能恢复。并配合激素补充、针刺、膏方等综合施治,见微知著,显著提高了卵巢功能低下患者的临床妊娠率,附验案一则加以佐证。

自体骨髓浓集液在骨科疾病治疗中的应用进展

自体骨髓浓集液主要通过将自体骨髓在体外进行离心浓缩而成,其中富含大量骨髓间充质干细胞和生长因子,能够促进骨与软组织修复。本文对骨髓浓集液的组成与作用机制进行了概述,并对其在骨折不愈合或延迟愈合、骨关节炎、半月板损伤、非创伤性股骨头坏死、肌腱损伤治疗中的应用进展进行了综述。

FXR调控下Bsep在高脂血症大鼠胆固醇代谢中的作用机制

目的探讨在法尼基衍生物X受体(FXR)调控下胆盐输出泵(Bsep)在高脂血症大鼠胆汁酸及胆固醇代谢中的作用,为高脂血症的预防和治疗提供新的理论基础和治疗靶点。方法使用Wistar大鼠60只,随机分为2组,每组30只,实验组饲养高脂饮食,对照组饲养普通饮食。喂食3个月,定期测定大鼠体质量情况,并取血用自动生化仪检测与脂类相关生化指标,待成功建立高脂血症大鼠模型后,取实验组和对照组肝脏组织,石蜡包埋切片后用免疫组化SP法检测2组大鼠肝脏组织的FXR及Bsep表达强度。结果实验组大鼠各脂类相关生化指标含量高于对照组(P<0.05);免疫组化SP法结果显示,实验组与对照组FXR表达阳性率、Bsep表达阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论以FXR及Bsep为靶点可为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗依据和方向。

肝硬化患者凝血功能监测及临床运用

目的:通过观察肝硬化时凝血四项关键指标,凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)的变化,了解其临床运用意义。方法:72例肝硬化患者和60例健康对照者进行了血浆凝血四项的检测且观察凝血功能与Chi1d-Pugh肝功能分级的关系,观察40例手术患者行相同方式手术且术后使用相同监护条件时术中出血量与术后3d血浆管引流量的变化。结果:肝硬化患者凝血四项指标变化不仅与正常人差异有显著性,而且随着肝功能损害程度的加重,凝血障碍越明显。按Child-Pugh肝功能分级,肝硬化患者随着分级加重PT、APTT、TT逐渐延长,FIB逐渐降低,降低幅度依次为A级<B级<C级,三级中的PT、APTT、TT、FIB差异均有显著性,提示PT、APTT、TT时间延长和FIB结果降低与Child-Pugh肝功能分级具有一致性。肝功能分级愈差,凝血障碍愈明显。手术患者随着肝功能分级的降低,术中出血量与术后3d血浆管引流量也在增加。结论:凝血四项指标的检测能从多方面及时、准确地反映肝硬化患者肝脏的损害程度和凝血功能情况,所以需动态地观察凝血四项指标以便对肝硬化患者的病情进行更好的监测和治疗。

肝癌患者凝血功能变化及临床意义

目的探讨肝癌时凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)的变化及临床意义。方法66例肝癌患者和58例健康者进行了血浆凝血四项的检测且观察凝血功能与Ch ild-Pugh肝功能分级的关系,观察30例手术患者行相同方式手术时术中出血量与术后3d血浆管引流量的变化。结果肝癌导致凝血机制的变化随着肝功能分级降低PT、APTT、TT逐渐延长,FIB逐渐降低,三级中的PT、APTT、TT、FIB差异均有统计学意义。手术患者随着肝功能分级的降低,术中出血量与术后3d血浆管引流量也在增加。结论凝血四项指标的检测能及时、准确地反映肝癌患者肝脏的损害程度和凝血功能情况。

胆囊结石颈部嵌顿者开腹与腹腔镜胆囊切除术比较

目的比较开腹与腹腔镜胆囊切除术处理胆囊结石颈部嵌顿者的利弊。方法对2006年7月～2010年7月收住我科的265例胆囊结石颈部嵌顿、急性胆囊炎患者两种手术方式进行回顾性分析。比较开腹手术与腹腔镜胆囊切除处理胆囊结石颈部嵌顿者的手术时间、术中出血量、术后3d血浆管引流量、术后住院天数和术后并发症的发生率,分析两种手术方式的可行性。结果 200例成功施行LC1,2例中转开腹5,3例行开腹手术2,例术后发生胆瘘,无死亡患者,全部患者均痊愈出院。结论随着腔镜技术的不断提高,对于胆囊结石颈部嵌顿者,LC可作为首选,术后恢复快、痛苦小、并发症少。

核受体FXR与胆汁酸代谢及相关疾病的关系

近年来一种称为代谢综合征的疾病群,包括高脂血症、胰岛素抵抗等逐渐成为危害人类健康的重大疾病。现其发病机制不明,因而对代谢综合征的治疗还缺乏有效的手段。最近的研究发现,某些核受体转录因子可通过对其相应靶基因的调控参与多种代谢通路的调节,

BSEP在高脂血症大鼠肝组织中表达的状况

目的:通过建立高脂血症大鼠模型,以胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)为研究对象,探讨BSEP在高脂血症大鼠肝脏中的表达状况,初步思考其与高脂血症形成的相关性,为治疗高脂血症找到新的方向.方法:取♂Wistar大鼠60只,体质量145 g±7.5 g,随机分为2组,每组30只:普通饮食对照组(简称对照组)予以普通饮食、高脂饮食实验组(简称实验组)予以高脂饮食.喂食90 d,建立高脂血症模型,定期取血用自动生化仪检测胆固醇及胆汁酸含量,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测两组模型肝脏组织的Bsep基因表达的强度,石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型肝脏组织的BSEP表达的强度.结果:实验组胆固醇及胆汁酸含量明显高于对照组;电泳结果显示:实验中肝脏组织扩增产物都出现了内参β-actin基因的425 bp扩增带和Bsep基因的289 bp扩增带,实验组Bsep基因扩增带亮度强于对照组;免疫组织化学SP法结果显示,实验组Bsep表达阳性率为76.7%,对照组Bsep表达阳性率为12.5%,他们之间的差异有统计学意义(χ2=10.773,P<0.05).结论:实验组大鼠的Bsep基因的表达较对照组明显增加,提示我们可发展作用于Bsep的药物,为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗方法.

FXR在高脂血症大鼠肝组织中的表达状况

目的:本研究通过建立高脂血症大鼠模型,以法尼基衍生物X受体(farnesyl X receptor,FXR)为研究对象,初步探讨FXR在高脂血症大鼠中的表达状况,为防治高脂血症提供新的依据和分子理论基础.方法:取♂Wistar大鼠70只,随机均分为2组,对照组予以普通饮食、实验组予以高脂饮食.喂食90 d,建立高脂血症模型后,取对照组和实验组肝脏组织:(1)应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测两组模型肝脏组织的F X R基因表达的强度;(2)石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型肝脏组织的FXR蛋白表达的强度.结果:实验组胆固醇及甘油三酯含量明显高于对照组.(1)电泳结果显示:实验中肝脏组织扩增产物都出现了内参β-actin基因的425bp扩增带和FXR基因的283 bp扩增带,实验组FXR基因扩增带亮度强于对照组;(2)免疫组织化学SP法结果显示,实验组FXR表达阳性率为79%,对照组FXR表达阳性率为14.3%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:实验组大鼠的FXR基因的表达较对照组明显增加,提示我们可发展作用于FXR的药物,为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗方法.

胆盐输出泵在胆管癌大鼠胆管组织中的表达状况

目的:本研究通过建立胆管癌大鼠模型,以胆盐输出泵(bile salt export pump,Bsep)为研究对象,初步探讨Bsep在胆管癌大鼠中的表达状况,以期为治疗胆管癌的找到新的手段和方法.方法:取♂Wistar大鼠(体质量160 g±8 g)60只,随机分为2组,每组30只:普通饮食对照组(简称对照组)予以普通饮食、3'-甲基-4,4'-二甲基氨偶氮苯(3'-Me-DAB)饮食实验组(简称实验组)予以含3'-Me-DAB饮食.经过20 wk,建立胆管癌大鼠模型,取对照组和实验组胆管组织:(1)石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型胆管组织的Bsep表达的强度;(2)Western blot法检测两组模型胆管组织的Bsep蛋白表达的强度.结果:免疫组织化学SP法及Western blot法结果均显示,对照组Bsep表达阳性率高于实验组(66.21%vs 18.75%,X2=10.11,P<0.05;0.886±0.017 vs 0.297±0.011,P<0.05).结论:实验组大鼠的Bsep基因的表达较对照组减少,提示我们在胆管癌的治疗中,Bsep有成为新的治疗靶点的可能.

牛磺胆酸钠转运蛋白在肝癌大鼠肝组织中的表达状况

目的:本研究通过建立肝癌大鼠模型,以牛磺胆酸钠转运蛋白(sodium/taurocholate cotransporting polypeptide,Ntcp)为研究对象,初步了解Ntcp在肝癌大鼠中的表达状况,以期能找到新的手段和方法进行肝癌的治疗.方法:取Wistar大鼠(♂、体质量160 g±8 g)60只,随机分为2组,每组30只:普通饮食对照组(简称对照组)予以普通饮食、二乙基亚硝胺饮食实验组(简称实验组)予以含二乙基亚硝胺饮水.经过20 wk,建立肝癌大鼠模型,取对照组和实验组肝脏组织:(1)石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型肝脏组织的Ntcp蛋白表达的强度;(2)Western blot法检测两组模型肝脏组织的Ntcp蛋白表达的强度.结果:免疫组织化学SP法及Western blot法结果均显示,实验组Ntcp表达阳性率高于对照组Ntcp表达阳性率(25.7%),他们之间的表达差异有统计学意义(?2=10.62,P<0.05).结论:实验组大鼠的Ntcp蛋白的表达较对照组增多,提示我们在肝癌的治疗中,Ntcp有可能成为新的治疗靶点和方向.

高脂血症大鼠肝脏中牛磺胆酸钠转运蛋白的表达状况

目的:本研究以牛磺胆酸钠转运蛋白(Na+/taurocholate cotransporting polypeptide,Ntcp)为研究对象,通过分析Ntcp在高脂血症大鼠模型肝脏中的表达状况,寻求新的高脂血症治疗措施.方法:取♂Wistar大鼠(体质量150 g±5 g)60只,随机均分为实验组及对照组.喂食90 d,建立高脂血症模型,喂食期间定期取血检测胆固醇及胆汁酸含量,建模成功后,分别取两组大鼠肝脏组织.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测肝脏组织的N t c p基因表达的状况.应用免疫组织化学SP(streptavidinperosidase)法检测肝脏组织的Ntcp蛋白表达的状况.结果:实验组胆固醇及胆汁酸含量提高明显.电泳结果显示:两组肝脏组织都出现了位于425 bp的内参β-actin基因的扩增带和位于325 bp的Ntcp基因扩增带,实验组Ntcp基因扩增带亮度减弱;免疫组织化学结果显示:实验组Ntcp表达阳性率为23.6%,对照组N t c p表达阳性率为75.2%,差异有统计学意义(χ2=9.858,P<0.05).结论:实验组大鼠的Ntcp基因的表达明显减弱,提示我们Ntcp基因可能会成为高脂血症及其相关疾病新的药物治疗靶点.

肝叶段切除治疗肝内胆管结石237例

目的探讨肝内胆管结石的术前诊断、肝叶段切除的部位和范围以及联合术式的应用与疗效。方法回顾性研究分析该院1995年1月～2006年12月237例肝内胆管结石肝叶段切除的病例,在237例中,根据肝内胆管结石的分布及胆管狭窄的部位,行左肝外叶切除+T管引流98例,左肝外叶切除+肝门胆管修复整形+T管引流19例,左肝外叶切除+肝门胆管整形+肝门胆管空肠Roux-en-y吻合术47例,左半肝切除+肝门胆管整形+肝门胆管空肠Roux-en-y吻合术14例,左肝外叶切除+左肝断面胆管空肠Longmire吻合3例,肝方叶切除+肝门胆管整形+肝门胆管空肠Roux-en-y吻合术17例,V、VI肝段切除+T管引流术11例,VI、VII肝段切除+T管引流术28例。结果术后随访时间8个月～11年(平均82个月),优良率达96.6%。1例于术后10d死于多器官功能衰竭,4例发生术后残石(1.7%),3例偶有胆管炎发作。结论重视术前诊断的准确性,根据肝内胆管结石的分布及胆管狭窄的部位,合理选择肝叶段切除的部位和范围及合理应用联合术式,可以获得良好的治疗效果。

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对急性胰腺炎肾功能损伤的早期诊断价值

目的:探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)检测对急性胰腺炎(AP)患者肾功能损害早期诊断的意义。方法:测定72例急性胰腺炎患者的24h肌酐清除率(Ccr),血清肌酐(SCr),以及血清CysC水平,并以CCr<80mL/(min·1.73m2)作为肾功能损害诊断标准,采用χ2检验,相关性分析和ROC曲线分析了解CysC的诊断价值。结果:72例患者中共有28例出现CCr下降,在这28例患者中,CysC水平上升的有23例,而SCr出现异常的仅有16例,χ2检验分析后提示CysC对CCr的评估效能优于SCr(P<0.05)。相关性分析提示AP患者中,CysC与SCr均和CCr有着显著的负相关性(CysC:r=-0.868,P<0.001;SCr:r=-0.604,P<0.001),而CysC的相关系数较高。ROC曲线分析显示CysC的曲线下面积(AUC)值明显高于SCr(0.884vs0.687)。结论:CysC较SCr能更为准确和早期发现AP患者急性肾功能损害,常规监测AP患者的CysC水平,对有效治疗AP和预防急性肾功能衰竭的发生具有积极意义。

伽马射线体外照射对细粒棘球蚴原头节的杀灭作用

目的探讨细粒棘球蚴原头节体外照射γ-射线后导致的死亡、细胞内caspase-3的表达和显微结构的变化。方法在体外培养的基础上,用不同剂量的γ-射线对细粒棘球蚴原头节进行照射。对照射后各组原头节细胞内的caspase-3蛋白酶活性进行测定,观察期原头节死亡率,并在倒置显微镜下动态观察原头节形态结构的变化。结果原头节经过γ-射线体外照射后会出现死亡率升高,caspase-3表达增强现象,同时原头节形态结构出现肿胀、塌陷、碎裂的阶段性变化。结论γ-射线体外照射可以直接杀灭原头节,且诱导原头节细胞发生凋亡。

肝硬化门静脉高压症患者血浆中ET-1、CGRP与腹水及肝功能的相关性

目的:探讨肝硬化门静脉高压症患者门静脉血及外周静脉血中内皮素-1(Endothelin,ET-1)及降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related pepfide,CGRP)与腹水及肝功能的相关性。方法:检测78例肝硬化门静脉高压症患者门静脉血及外周静脉血中ET-1及CGPR的浓度。78例肝硬化门静脉高压症患者中,有腹水42例,无腹水36例;child-pugh肝功能分级,A级35例,B级26例,C级17例。对照组20例。结果:门静脉高压症患者无腹水组门静脉血和外周静脉血中ET-1浓度与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),有腹水组门静脉血和外周静脉血中ET-1浓度与无腹水组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在有腹水组,门静脉血ET-1浓度与外周静脉血ET-1浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。有腹水组门静脉血及外周静脉血中CGRP浓度与无腹水组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。B级肝功能组门静脉血和外周静脉血中ET-1、CGRP浓度与A级肝功能组比较,差异有统计学意义(P<0.05),C级肝功能组门静脉血中ET-1浓度与外周静脉血中ET-1浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。C级肝功能门静脉血和外周静脉血中CGRP浓度与B级肝功能组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。肝功能状态与门静脉血及外周静脉血中ET-1浓度均呈显著负相关(rs=-0.783,P<0.05;rs=-0.695,P<0.05);与门静脉血及外周静脉血中CGRP浓度也呈显著负相关(rs=-0.642,P<0.01;rs=-0.671,P<0.05)。结论:肝硬化门静脉高压症患者,门静脉血及外周静脉血中ET-1和CGRP升高与腹水形成有关,肝功能状态与门静脉血及外周静脉血中ET-1和CGRP具有相关性,血浆中ET-1、CGRP浓度可以作为反映患者肝功能状态的指标。

COX-2在人肝细胞癌中的表达及其对耐药性的影响

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)在肝细胞癌发生、发展中的作用以及COX-2对P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法选择手术切除的52例肝癌标本为研究对象,应用RT-PCR、免疫组织化学分别检测COX-2 mRNA和COX-2蛋白在肝癌组织和正常肝组织中的表达。同时检测mdr 1mRNA和P-gp蛋白在肝癌组织中的表达情况,并分析COX-2与P-gp在肝癌组织中表达的相关性。结果正常肝组织中未见COX-2表达,中、低分化的肝癌组织表达阳性率高于高分化肝癌组织(P<0.01),在HBsAg阳性的肝癌组织中表达高于HBsAg阴性的肝癌组织(P<0.05),在合并肝硬化的肝癌组织中表达高于无肝硬化的肝癌组织(P<0.01)。mdr 1 mRNA在肝癌组织和正常肝组织中均有表达。同时表达COX-2和mdr1基因为42例,两者相关系数r=0.563(P<0.01)。结论 COX-2参与了以P-gp介导的肝癌的多药耐药机制。

腹腔镜胆囊切除术中胆囊床肝中静脉及其属支损伤的预防和处理

目的探讨腹腔镜胆囊切除术中胆囊床肝中静脉及属支损伤出血的预防及处理。方法回顾分析17例腹腔镜胆囊切除术中胆囊床肝中静脉及属支出血处理的临床资料。结果 17例肝中静脉及其属支术中出血,16例在腹腔镜下成功止血,1例中转开腹止血,术后无再出血。结论腹腔镜胆囊切除术中应重视肝中静脉及其属支的存在,避免其发生损伤。术中一旦发生肝中静脉及其属支损伤出血,应判断清楚出血血管的粗细和走行方向,决定钳夹止血或缝合止血。对合并肝硬化,出血量大的病例,最好中转开腹止血。

铁离子螯合剂对肝细胞冷缺血再灌注损伤的保护机制研究

目的研究铁螯合剂去铁胺(DFO)对模拟冷缺血再灌注后肝细胞内铁离子浓度及细胞凋亡的影响。方法培养肝细胞株HL-7702,随机分为对照组和DFO干预组。对照组未予DFO处理,DFO干预组按100、50和25μmol/L分为高、中、低3个浓度组,每组各8个样本,建立模拟冷缺血再灌注模型,分别检测各组细胞内Fe3+离子浓度,MDA含量,细胞凋亡水平,以及各组上清液乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果肝细胞经冷缺血8 h,DFO干预高、中、低浓度组Fe3+浓度分别为(1.36±0.14)、(1.92±0.24)和(2.09±0.28)mmol/L,均显著低于对照组(2.58±0.27)mmol/L,(P<0.05);DFO高、中、低浓度组肝细胞凋亡率分别为(6.37±1.28)%、(14.07±2.61)%和(16.07±1.71)%,均低于对照组(20.53±1.58)%,(均P<0.01)。DFO高、中、低浓度组肝细胞内MDA含量分别为(1.83±0.63)、(2.60±0.26)和(2.74±0.32)nmol/m L,均显著低于对照组(3.57±0.45)nmol/m L(P<0.01)。而再灌注8 h时,DFO高、中、低浓度组肝细胞内MDA含量分别为(2.48±0.36)、(3.07±0.35)和(3.56±0.25)nmol/m L,均显著低于对照组(4.16±0.24)nmol/m L(P<0.05);在LDH水平测定中,DFO高、中、低浓度组上清液LDH水平分别为(216.67±22.22)、(263.68±7.16)和(297.57±21.06)u/L,均低于对照组(354.51±31.02)u/L(P<0.05)。结论铁螯合剂去铁胺可以通过降低冷保存时Fe3+浓度,从而减少肝细胞凋亡发生以达到减轻肝细胞冷缺血损害的目的。