低渗诱导合浦珠母贝的三倍体

为了探究不同盐度对诱导合浦珠母贝三倍体的效果,本研究首次利用低渗方法诱导合浦珠母贝三倍体,通过控制变量法从不同盐度、诱导时机以及诱导时间中探究最适诱导条件。同时对合浦珠母贝卵裂率、孵化率以及存活率、壳长、三倍体率的变化进行了探究。结果显示,在盐度14、50%受精卵释放第一极体(PBⅠ)及诱导15 min时D形幼虫的三倍体率最高,分别为64.16%±6.92%、65.87%±6.51%以及65.14%±1.93%。三倍体幼虫并未表现出明显优势;低渗对胚胎造成的影响使幼虫存活率和三倍体率有所下降。通过对卵裂率、孵化率和15日龄存活率、壳长及三倍体率进行主成分分析,在三种诱导条件中均保留了前两个主成分,且保留的主成分的累积方差贡献率均超过了85%。盐度14、50%受精卵释放PBⅠ及诱导15 min分别在各自实验中的综合评价得分分别为第6、第1和第1。该研究表明,合浦珠母贝三倍体幼虫在生长方面的优势不明显,50%受精卵释放PBⅠ及诱导15 min两个诱导条件适合合浦珠母贝三倍体诱导。本研究可为合浦珠母贝三倍体育种提供一种新的思路,有助于提高生产效益。

中间球海胆人工育苗附着基改良及不同规格种苗养殖效果的比较

人工育苗是我国培育中间球海胆养殖业种苗的主要手段,然而传统的海胆附着基的人工育苗效果不尽如人意,尤其是在控制稚胆剥离损伤方面。目前,海上吊笼养殖是中间球海胆人工养殖最主要的养成方式之一,而随着室内工厂化养殖技术的更新和优化,海胆的室内工厂化养殖产业发展迅速并受到广泛关注。为探明以软质塑料膜作为中间球海胆附着基的育苗效果以及不同规格种苗养殖的效果,分别使用硬质波纹板和软质塑料膜作附着基进行中间球海胆人工育苗,并开展了大、小两种规格(壳径分别为0.5 cm和2.0 cm)的海胆种苗室内工厂化养殖和海区养殖研究,旨在明确软质塑料膜替代传统硬质波纹板作海胆育苗附着基的可行性以及中间球海胆室内工厂化养殖和海区养殖效果的优劣。实验结果表明:软质塑料膜在采苗效率方面与波纹板无异,但在促进稚胆生长和提高存活率方面优势显著(p<0.05);在不同规格中间球海胆种苗的工厂化养殖和海上养成研究中,相同养殖条件下,养殖12月龄的大规格种苗相较于小规格种苗在生长和存活方面优势显著(p<0.05),同时工厂化养殖能确保更高的养殖成活率和更优的生长性能(p<0.05),然而中间球海胆的工厂化养殖在能源成本、物料成本以及人力成本等方面要远高于海上养成。综上所述,建议在中间球海胆的人工育苗中使用软质塑料膜替代硬质波纹板附着基,在海胆人工养殖中应该尽可能选择2.0 cm以上甚至更大规格的中间球海胆种苗。此外,虽然可以通过深海井水进行温度调控,实现中间球海胆的室内工厂化养殖和安全度夏,但是由于各项投入较高,在生产实践中,需要根据预算和养殖预期进行选择。本研究旨在为中间球海胆人工繁育技术革新和室内工厂化养殖提供科学参考。

高温胁迫对合浦珠母贝不同群体存活及免疫酶活性的影响

为比较合浦珠母贝(Pinctada fucata)不同群体在高温胁迫下的存活及免疫酶活性变化情况,本实验以“海优1号”(YY)、“海选1号”(XX)、“南科1号”(KK)和广西潜在耐高温养殖群体(TT)为实验材料,通过渐变升温的方式测定4组合浦珠母贝在35℃水温胁迫下的生理指标,研究不同胁迫时长对合浦珠母贝存活及其鳃组织内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)和碱性磷酸酶(AKP)活性的影响。研究显示,实验第8天开始出现个体死亡,TT组在实验12 d后存活率显著高于其余3组(P<0.05);4个群体的SOD、CAT和T-AOC活性随胁迫时间的延长大致呈上升-下降的趋势,在1~24 h内免疫酶活性呈上升趋势,在120 h后下降至对照水平以下;在高温胁迫下各组的AKP活性增加,KK、TT与XX、YY分别在12和24 h达到峰值,在120 h显著下降。本研究初步探明了高温胁迫下合浦珠母贝的免疫应答机制。

菲律宾蛤仔獐子岛群体两种壳型表型性状比较

以大连獐子岛野生菲律宾蛤仔为材料,对"壳宽型"、"壳扁型"蛤仔两个壳型的壳长、壳宽、壳高、活体质量、软体质量、产卵量及其子代的生长和存活进行比较。试验结果表明,相同壳长的两种壳型蛤仔,"壳宽型"蛤仔的活体质量及软体质量均显著高于"壳扁型"蛤仔(P<0.05);两种壳型蛤仔的壳宽均是影响活体质量的主要因素,壳长均是影响软体质量的主要因素;两种壳型蛤仔初孵D形幼虫、3日龄、6日龄幼虫壳长生长差异不显著(P>0.05);15日龄"壳扁型"蛤仔幼虫壳长生长显著快于"壳宽型"蛤仔(P<0.05);稚贝期,除30日龄外,"壳宽型"蛤仔壳长生长显著快于"壳扁型"蛤仔(P<0.05);"壳宽型"蛤仔幼虫及稚贝期存活率均显著高于"壳扁型"品系(P<0.05)。

干露对日本海神蛤稚贝生长和存活的影响

为研究不同时间和温度下干露对日本海神蛤Panopea japonica稚贝生长和存活的影响,以两种规格(S组壳长为1.70 mm±0.31 mm,L组壳长为5.04 mm±0.63 mm)的日本海神蛤稚贝为材料,在0、10、20℃条件下,分别干露4、8、12 h,测量并统计干露后恢复3、6、9 d时稚贝的存活率和生长情况。结果表明:在相同干露条件下,L组稚贝的抗干露能力显著高于S组(P<0.05);在相同干露时间内,稚贝在不同温度下干露的存活率依次为10℃>20℃>0℃;0℃下S组稚贝干露后恢复6、9 d时的存活率急剧下降,分别为30.22%±6.48%、19.78%±7.70%,与其他各组有显著性差异(P<0.05)。研究表明,经干露处理后,S组日本海神蛤稚贝瞬时生长率显著高于其对照组(P<0.05),存在补偿生长现象。

不同介质对低渗诱导葡萄牙牡蛎三倍体的影响

以葡萄牙牡蛎(Crassostrea angulata)为研究对象,分别使用6种介质(NaCl、KCl、CaCl2、MgCl2、蔗糖、海水)配制的梯度低渗溶液,在40%~50%受精卵出现第一极体(PB1)时处理15 min,进行三倍体诱导。研究表明,对于同种介质,卵裂率和孵化率均随渗透压升高而增大,三倍体诱导率则先增后减,在渗透压为P8(盐度为8的海水渗透压)时达到最高。在同一渗透压P8条件下,除CaCl2组外,各组卵裂率、孵化率、诱导率与低渗海水组相比无显著差异(P>0.05),CaCl2组卵裂率、孵化率降低,而诱导率显著较高(P<0.05)。各低渗组卵裂率、孵化率均低于自然海水组。研究结果表明,低渗海水法诱导贝类三倍体时物理的低渗因素发挥主要作用,Ca2+可能起到辅助作用。

低盐处理对长牡蛎胚胎发育及氧化应激、能量供应和渗透调节相关酶的影响

为探究低盐诱导对长牡蛎(Crassostrea gigas)胚胎发育和发育初期的氧化应激、能量供应及渗透调节的影响。实验观察了低盐诱导组和对照组胚胎到达不同发育时期所用的时间以及发育初期部分酶活力的变化。研究显示,在40%~50%受精卵出现第一极体时,用盐度4~12的低盐海水处理长牡蛎受精卵15 min会导致其胚胎发育明显迟缓,且诱导盐度越低,发育速度越慢,最慢(盐度4)比对照组(盐度32)到达D形幼虫的时间滞后了4 h以上。同时,用盐度8处理15 min后,受精卵的丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)和Na^+-K+-ATP酶水平显著降低,总抗氧化能力(Total-antioxidant capacity,T-AOC)水平显著升高(P<0.05),谷草转氨酶(Glutamic oxalacetic transaminase,GOT)水平无显著变化(P>0.05);转入自然海水中恢复1.5 h后,四细胞期胚胎丙酮酸激酶、Na^+-K^+-ATP酶水平恢复到与对照组无显著差异,T-AOC水平回落至接近对照组水平,而谷草转氨酶水平无明显改变。说明低盐胁迫可能会导致长牡蛎受精卵糖代谢受阻,渗透调节紊乱,同时受到较严重的氧化胁迫,且这些改变在转入自然海水一定时间后即可恢复,不会对胚胎发育产生持续性影响,而GOT表达水平则始终无明显变化。研究结果表明,低盐诱导不仅会导致牡蛎受精卵胚胎发育迟缓,还可能会使其受到严重的氧化胁迫,同时阻碍其代谢功能和渗透调节。

不同群体合浦珠母贝表型性状的相关性与通径分析

以合浦珠母贝新品种“海优1号”、“海选1号”、“南科1号”和北海野生群体子一代为研究对象,对不同群体的壳长、壳高、壳宽、铰合部长和活体质量进行测量,通过通径分析和多元回归分析,探究各壳型性状对活体质量的影响。研究表明:各群体的表型性状中活体质量变异系数最大;各群体性状间相关系数均达到极显著水平(P<0.01);除北海野生群体子一代以外,另外3个新品种均表现为壳宽对活体质量的直接作用最大,壳宽是影响活体质量的主要因素;壳型性状对活体质量决定系数的分析结果与通径分析结果一致;决定系数表明影响不同群体合浦珠母贝活体质量的主要壳型性状并不相同,影响“海优1号”、“南科1号”和北海野生群体子一代活体质量的壳型性状已经找到(决定系数总和大于0.85);通过逐步回归的方法建立了不同群体合浦珠母贝壳长X_(1)、壳高X_(2)、壳宽X_(3)、铰合部长X_(4)与活体质量Y的最优多元回归方程:“海优1号”:Y=-14.54+0.2519 X_(1)+0.9178 X_(3),(X_(1)<0.01,X_(3)<0.01);“海选1号”:Y=-20.416+0.378 X_(2)+0.9664 X_(3),(X_(2)<0.01,X_(3)<0.01);“南科1号”:Y=-22.846+0.336 X_(2)+0.718 X_(3)+0.162 X_(4),(X_(2)<0.01,X_(3)<0.01,X_(4)<0.01);北海野生群体子一代:Y=-10.550+0.533 X_(1),(X_(1)<0.01)。

高温对长牡蛎与熊本牡蛎及其杂交子代的免疫酶活性及杂种优势的影响

夏季水温过高会使双壳贝类体内免疫调节系统发生改变,这是造成牡蛎大量死亡的重要原因之一。本文以长牡蛎(Crassostrea gigas)和熊本牡蛎(C.sikamea)及其杂交子代为实验材料,统计F代养成期存活率,测定其在受到高温胁迫下过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)4种免疫相关酶活性的变化情况,比较长牡蛎、熊本牡蛎及其杂交子代对高温突变的耐受能力。研究显示:1.随着水温的升高,杂交牡蛎外套膜中的CAT活性变化与MDA总体呈负相关趋势。杂交子的CAT活性在35℃以前杂种优势明显(H>0,hp>1);35℃与恢复组中,表现为明显杂交劣势(H<0,hp<-1)。2.杂交子的SOD活性总体呈先下降后上升趋势,在35℃时取得最小值,但差异不显著(P<0.05)。3.杂交子的T-AOC活性在30℃以前表现为杂种优势(H>0),30℃以后表现杂种劣势(H<0)。在30℃时,T-AOC活性显著下降。研究结果表明,高温对长牡蛎、熊本牡蛎及其杂交子代的免疫酶活性有显著影响,在外界温度发生变化时杂交子代机体做出响应的速度快于亲本。本文初步探明了高温胁迫下牡蛎的免疫应答机制,研究结果为牡蛎杂交育种提供参考。