依托开放实验项目医学生科研能力培养与实践

开放实验是西安交通大学医学部于2008年启动的教学改革项目,旨在培养医学本科生的基本科研能力。医学节肢动物研究团队作为践行者,经过十余年在病原生物学学科的探索与实践,建立了一套比较系统和规范的培养体系。经培训,学生不仅熟悉了科研基本流程和相关专业理论知识,掌握了医学节肢动物分子鉴定技术及数据分析方法,而且科研兴趣、专业英语水平、沟通能力与实验动手能力普遍得到提升。实践表明,开放实验是培养医学本科生基本科研素养的有效途径。

粉尘螨HSP16-1原核表达体系构建与温度应激响应功能鉴定

目的建立原核表达体系,在蛋白水平确认粉尘螨HSP16-1蛋白的温度应激响应功能。方法基于前期RNA-seq获得的粉尘螨HSP16-1基因序列,设计特异性引物,PCR扩增克隆测序;利用生物信息学软件,分析理化性质,预测亚细胞定位和三维结构;通过构建p ET32a/HSP16-1原核表达质粒,转化大肠杆菌感受态细胞BL21;采用1 mmol/L IPTG在16、28和37℃三个温度诱导HSP16-1重组蛋白表达,分别在2、4、6和8 h取样进行SDS-PAGE分析;绘制热胁迫和冷胁迫下重组菌与空载菌生长曲线。结果测序获得粉尘螨HSP16-1完整CDS为462 bp,编码153个氨基酸;BLAST比对显示粉尘螨与近缘物种屋尘螨核苷酸和氨基酸序列相似度分别为84.63%和87.58%;亚细胞定位在细胞核;保守区预测含有α晶体HSP23超家族保守区。菌落PCR及双酶切鉴定p ET32a/HSP16-1重组质粒构建成功。SDS-PAGE分析显示,HSP16-1蛋白被成功诱导表达,37℃诱导6 h是最佳诱导条件。细菌生长曲线显示,p ET32a/HSP16-1重组菌在热胁迫下的生长均优于p ET32a空载菌,而冷胁迫下则相反,空载菌生长要优于重组菌。结论粉尘螨HSP16-1蛋白仅在热胁迫下发挥应激响应功能,而在冷胁迫未表现出相似的功能。