大剂量胸腺肽对乙型病毒性肝炎的治疗作用

本研究选择慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）１１０例，分大剂量胸腺肽、干扰素和一般护肝治疗三组。结果表明，大剂量胸腺肽可以促使ＡＬＴ复常，降低血中ＨＢＶＤＮＡ水平，促使ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阴转，其疗效与干扰素相似，优于一般护肝组，且使用安全，大剂量胸腺肽疗法可作为阻断或抑制ＨＢＶ复制一种新方法。

酶联免疫斑点法检测慢性乙型肝炎患者HBcAg特异性分泌γ-干扰素细胞及其临床意义

目的观察免疫应答不同期的慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血中HBcAg特异性γ-干扰素（IFNγ）分泌细胞数，探讨其在评价患者体内非溶细胞机制清除乙型肝炎病毒（HBV）能力中的临床意义。方法采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测83例免疫耐受期、49例免疫清除期患者和18名健康人HBcAg特异性IFNγ分泌细胞。结果健康人HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数为11—19个／4×10^5个外周单个核细胞（PBMC），62．2％的免疫耐受期CHB患者低于正常值，44．9％的免疫清除期CHB患者高于正常值。HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数与HBV DNA水平未发现有相关性，而HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数与HBeAg S／N值在一定范围内有正相关趋势。13例免疫耐受期患者经乙型肝炎疫苗及草分枝杆菌制剂治疗3—6个月后，12例患者HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数有不同程度提高。结论采用ELISPOT测定HBcAg特异性IFNγ分泌细胞数可从一个侧面反映大多数CHB患者免疫应答能力，并可以作为治疗效果的评价指标。

国产胸腺肽对健康人PBMC膜白细胞介素2受体和HLA-DR抗原表达的影响

用生物素-链霉亲和素系统免疫细胞化学和流式细胞仪检测mIL-2R和HLA作为考核胸腺肽体外活性的指标,结果表明,25～100μg/ml胸腺肽在体外明显提高mIL-2R和HLA-DR表达率,提示胸腺肽具有激活淋巴细胞的功能,为胸腺肽治疗慢性肝炎的机理提供了理论基础。

胸腺肽对HBV转基因小鼠表达HBV DNA的影响

应用胸腺肽对ＨＢＶ转基因小鼠进行腹腔内注射（３ｍｇ／只），连续３个月，同时设促肝细胞生长素及生理盐水对照组，定期取血检测ＨＢＶＤＮＡ。结果，发现胸腺肽组ＨＢＶＤＮＡ阴转率为２２％～５５％，停药２２ｄ后阴转率为２２％，而对照组小鼠ＨＢＶＤＮＡ无阴转。结果提示胸腺肽对ＨＢＶ转基因小鼠表达ＨＢＶＤＮＡ有抑制作用。

HBsAg特异性CTL诱发HBV转基因小鼠肝损伤的实验研究

用ＨＢｓＡｇ特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）给ＨＢＶ转基因ＩＣＲ小鼠过继性输注，通过肝组织病理学和免疫组化观察，发现其能诱发类似急性肝炎病变，提示抗原特异性ＣＴＬ在ＨＢＶ抗原所引起的宿主细胞免疫应答而导致肝细胞损伤的过程中有作用。

慢性乙型肝炎抗病毒免疫辩证治疗的探索(一)

随着现代科学的发展,一些抗病毒药物的问世以及通过细胞工程和遗传工程技术开发的产品,使肝炎的治疗进入一个新领域,遗憾的是慢性乙型肝炎的治疗至今仍未有令人满意的疗法,特别在抗HBV复制方面,到目前为止,未见有真正能使全部HBV阴转的药物和疗法,因此人们梦寐以求的是寻找一种能够促使HBV标志物阴转的药物。但在临床实践中,其结果仍与人们的期望有距离。目前。

慢性乙型肝炎抗病毒免疫辩证治疗的探索(二)

2.抗病毒免疫辩证治疗的策略和实施方案 2.1 抗HBV免疫辩证治疗的必要性笔者创提的抗HBV免疫辩证治疗的含义是:在抗HBV治疗之前,对患者采用现代的免疫学检查分析以及对HBV的突变区进行测序,在了解免疫应答和病毒变异的基础上进行免疫辩证分型。

近交系高表达HBV转基因小鼠的建立及表达传代稳定性

将纯化的高表达 1.3copy HBV全基因 ,通过原核显微注射方法 ,建立了近交系 ( Balb/ c)高表达 HBV转基因小鼠模型 ,以血清 HBs Ag为检测指标 ,对该转基因鼠 HBV基因持续表达水平和数代遗传稳定性进行了研究。结果 ,获高表达 HBV( 1.3copy)转基因 Balb/ c小鼠 Founder 2只 ,用回交传代方法 ,本 HBV转基因小鼠已稳定传至第 8代 ,每代转基因鼠阳性率平均保持在 4 4 .6 7% ,性别对 HBV转基因小鼠总体阳性率有影响 ,雄性小鼠的阳性率 ( 4 4.15 % )明显高于雌性小鼠 ( 4 2 .2 6 % ) ( P<0 .0 5 ) ;血清表达 HBs Ag水平较稳定 ,平均为 ( 85 3.2 8± 2 35 .4 3)μg/ L ,雌雄小鼠之间表达水平没有明显差异。

心肌肽素对缺氧-再给氧损伤心肌细胞的保护作用

目的 :研究多肽类物质心肌肽素对缺氧 -再给氧损伤心肌细胞的保护作用。方法 :复制培养心肌细胞缺氧 -再给氧损伤模型 ,缺氧 6 0min ,再给氧 30min ,观察心肌肽素对细胞超微结构的影响。以ACAS 5 70进行细胞内游离Ca2 +的定性检测 ;以荧光染料Fura - 2 -AM定量测定细胞内游离Ca2 +浓度 ;以荧光偏振法测定细胞膜脂质流动性。结果 :心肌肽素能使心肌细胞线粒体超微结构的损伤减轻 ;可剂量依赖性地降低 [Ca2 +]i 和提高细胞膜脂质流动性 ;可明显减少Ca2 +伪彩色三维图色彩值。结论 :心肌肽素对缺氧 -再给氧损伤心肌细胞有明显保护作用 ,可能与其降低 [Ca2 +]i

免疫疗法联合干扰素治疗慢性乙型肝炎的初步研究

探讨免疫疗法联合干扰素治疗不同免疫应答期慢性HBV感染患者的疗效。 14 5例慢性乙型肝炎患者(免疫耐受期 6 6例 ,免疫清除期 6 4例 ,残余整合期 15例 )随机分为联合治疗组 (乙肝疫苗 +胸腺肽 +绿脓杆菌菌毛+干扰素 ,其中免疫耐受期 4 2例 ,免疫清除期 4 6例。共 88例 )和对照组 (单用干扰素治疗 ,其中免疫耐受期 2 4例 ,免疫清除期 18例。共 4 2例 ) ,观察ALT及病毒标志物变化。治疗后 ,免疫清除期联合治疗组的ALT复常率、HBeAg、HBVDNA阴转率和HBeAg/抗 -HBe血清转换率均显著高于对照组 (P <0 0 5 )。免疫耐受期 ,治疗组HBeAg、HBVDNA阴转率和HBeAg/抗 -HBe转换率均明显高于对照组 (P <0 0 5 )。免疫疗法联合干扰素治疗慢性乙型肝炎 ,疗效明显优于单用干扰素治疗。

慢性乙肝患者树突状细胞表型和抗原提呈能力的测定

目的 :探讨慢性HBV感染者DC的表现和功能及其与免疫耐受的关系。方法 :选择正常人和慢性HBV感染者 ,从外周血中分离单个核细胞 ,用细胞贴壁法富集DC ,流式细胞术测定DCHLAⅡ和共刺激分子的表达 ,同位素掺入法测定DC的抗原提呈能力 ,ELISA方法测定抗原提呈过程中Th1和Th2类细胞因子的水平。结果 :慢性HBV感染者HLAⅡ和共刺激分子表达水平、抗原提呈能力和Th1类细胞因子的水平均低于正常 (P <0 .0 5 ) ,而Th2类细胞因子的水平与正常相似 (P >0 .0 5 )。结论 :慢性HBV感染免疫耐受与DC的缺陷有关。

绿脓杆菌菌毛制剂(佰安)免疫效能的实验研究

目的 研究绿脓杆菌菌毛制剂 (佰安 )对机体的免疫刺激作用。方法 用流式细胞术检测佰安对慢性HBV感染者外周血树突状细胞 (DC)表面分子的影响以及佰安对T细胞的活化作用。结果 佰安在体外对CD11c+ 型DC的细胞数有促进作用 ,而与HBsAg联用后 ,其表达CD11c+ 、CD80 + 、CD86+ 型DC的细胞数增加更加显著。结论 佰安与HBsAg联用可增强DC的抗原提呈能力 ,活化T细胞 ,诱导细胞的免疫反应 。

大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的病理及免疫病理观察

探讨大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的组织病理及免疫病理的变化，为胸腺肽临床治疗提供实验依据。将８ 例治疗前后肝穿组织石蜡包埋连续切片进行ＨＥ染色，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ，Ｆａｓ 抗原及ＨＢＶＤＮＡ检测。结果：３ 例炎症活动度有较明显减轻，２ 例炎症活动度部分减轻，组织学改变与临床ＨＢｅＡｇ 阴转，ＨＢＶＤＮＡ阴转一致。提示大剂量胸腺肽治疗慢性乙型肝炎有确切疗效。

肝细胞提取物对肝癌细胞(BEL-7402)凋亡相关基因表达的影响

肝细胞提取物经HPLC、FPLC进一步分离纯化，得到单一色谱峰。激光飞行时间质谱仪测分子量为4．020KD。该单一组分（S4）对BEL－74O2肝癌细胞有增殖回落作用，半数抑制浓度（IC50）为7．58mg/L。对BEL-7402细胞的基因表达影响研究，S4对P53、Fas表达有增强作用，而抑制Bcl－2、c－myc的表达。Southemblot技术表明，S4可抑制Bcl－2的mENA转录。提示，S4诱导BEL－7402肝癌细胞凋亡是通过影响基因表达而发挥作用。

慢性HBV感染者外周血树突状细胞和T细胞体外应答功能的检测和分析

目的 探讨慢性HBV感染者外周血树突状细胞 (DC)和T细胞对激活剂体外应答的功能。方法 用三色荧光染色法 ,通过流式细胞仪检测静息期和经激活剂激活后CD11c+DC和CD3 +/CD4+/CD69+T细胞的百分率。结果 与接种过乙型肝炎疫苗、血中抗HBs阳性健康者相比 ,感染者组CD11c+型DC及其表达CD80和CD40共刺激分子的阳性细胞百分率 ,以及经CD2 /CD2R强激活剂刺激后CD69+T细胞百分率等三项指标均呈明显低下的状态。结论 慢性HBV感染者血中DC和T细胞对激活剂的体外刺激 ,均表现不同程度的应答功能低下或缺陷 ,本研究涉及的三项细胞免疫检测方法有利于深入了解机体对病原体应答的能力 ,其结果有助于阐明发病机理 。

心肌肽素对异丙肾上腺素致损伤大鼠心肌的保护作用

目的：观察心肌肽素对异丙肾上腺素致损伤大鼠心肌的保护作用。方法：在大剂量异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤模型上，观察心肌肽素对心肌形态及脂质过氧化的影响。结果：心肌肽素可明显减轻受损心肌的变性坏死反应和减少炎性细胞浸润，非常显著地降低心肌丙二醛含量、提高心肌超氧化物歧化酶活性。结论：心肌肽素对异丙肾上腺素损伤大鼠心肌有保护作用，这可能与其抗脂质过氧化作用有关。

大剂量HBsAg疫苗对HBV转基因小鼠细胞免疫调节的研究

目的 研究大剂量HBsAg疫苗对HBV转基因小鼠 (Tg鼠 )细胞免疫应答的影响。方法 Tg鼠 4 8只 ,每只注射 6 μg(相当于人产生抗体剂量的 180倍 )的HBsAg疫苗后 ,用流式细胞术、氚 胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR)掺入法和ELISA法 ,分别检测其树突状细胞(DC)、T淋巴细胞增殖及其诱生细胞因子IL 2、IFN γ的水平。结果 大剂量HBsAg疫苗组DC表面共刺激分子CD80、CD86和I Ek的阳性百分率 (% )均高于对照组 (P <0 0 5 ) ,特异T淋巴细胞增殖能力 8个月的cpm值 (10 0 77 2± 85 74 0 )显著高于 1周的 (5 32 9 1± 30 86 0 ) (P <0 0 5 ) ;其诱生细胞因子的水平 8个月时IL 2 (46 2 4± 12 2 5pg/ml)、IFN γ(976 1± 5 4 4 1pg/ml)显著高于 1周时IL 2 (15 6 1±78 7)、IFN γ(5 8 3± 4 9 5 ) (P <0 0 1)。结论 大剂量HBsAg疫苗能够增强Tg鼠细胞免疫应答能力 ,恢复对乙型肝炎抗原的应答。

大剂量胸腺肽对慢性乙型肝炎的疗效及与免疫调节的关系

目的 :探讨胸腺肽对慢性乙型肝炎的治疗作用及其机制。方法 :按诊断标准选择轻度慢性乙型肝炎77例 ,随机分为胸腺肽治疗组 (47例 )和对照组 (30例 ) ,观察胸腺肽对慢性乙型肝炎患者ALT和乙肝标记物的作用 ,及其免疫指标的变化和相互关系。结果 :胸腺肽治疗组ALT复常的时间较对照组明显缩短 ,促进HBeAg的阴转 ,抑制HBV的复制 (P <0 .0 5 ) ,提高细胞免疫应答能力 ,恢复机体的免疫平衡状态 (P <0 .0 5 )。结论 :胸腺肽能促进慢性乙型肝炎ALT的复常 ,抑制HBV的复制。

乙型肝炎病毒表面抗原对T淋巴细胞增殖的刺激作用

目的 探讨HBsAg对机体的免疫刺激作用。方法 用流式细胞术检测HBsAg对HBV转基因小鼠树突状细胞 (DC)免疫表型和ALT的影响 ,用3H TdR掺入法观察HBsAg对正常BALB/c小鼠特异性T淋巴细胞增殖的影响。结果 HBsAg可增强HBV转基因小鼠DC免疫表型的表达并伴有清除病毒所引起的肝损伤 (P <0 0 5 ) ,诱发正常BALB/c小鼠T淋巴细胞特异性增殖 (P <0 0 5 )。结论 HBsAg可增强DC的抗原提呈能力 ,诱导细胞免疫反应 。