葡萄胎的受精类型与恶变的关系

目的 :探讨葡萄胎不同受精形式和临床转归的关系。方法 :用 9个位点 (F1 3A0 1、FESFPS、VWA、CSF1P0、TPOX、TH0 1、D1 6S5 39、D7S82 0、D1 3S31 7)复合STR -PCR方法对 5 4例葡萄胎病例进行分析 ,区分受精类型 ;通过追踪病人刮宫后血绒毛膜促性腺激素 (humanchorionicgonadotropin ,hCG)变化判断葡萄胎是否恶变。 结果 :5 4例葡萄胎病例中 1 0例恶变 ,占 1 9% (1 0 / 5 4 )。 5 4例中 38例为DNA完全来自父方的“遗传学完全性葡萄胎” ,恶变均发生于这些病例中 ,占 2 6 % (1 0 / 38) :空卵单精子受精的“纯合性”葡萄胎 2 8例 ,恶变 8例 ,占 2 9%(8/ 2 8) ;空卵双精子受精的“杂合性”葡萄胎 1 0例 ,恶变 2例 ,占 2 0 % (2 / 1 0 )。DNA来自双亲的单倍体卵子双精子受精的“遗传学部分性葡萄胎”1 6例 ,无恶变发生。结论 :DNA完全来自父方的“遗传学完全性葡萄胎”比DNA来自双亲的“遗传学部分性葡萄胎”易于恶变 (P =0 .0 2 4 2 ) ,而前者的恶变发生与其“纯 /杂合性”无关 (P =0 .6 99)。

良性与恶性葡萄胎基因表达差异的研究

目的:通过基因表达的差异分析,筛选良性与恶性葡萄胎间的分子标志,以探讨侵袭性葡萄胎早期诊断的方法和可能性。方法:采用mRNA差异显示、斑点杂交和DNA重组、测序等技术对良性与恶性葡萄胎差异表达的基因片段进行筛选和序列测定,通过和基因库数据对比,明确所获基因片段是否为已知序列。结果:筛选出 28条侵袭性葡萄胎高表达的基因片段,其中 20个可再扩增,斑点杂交分析确认有 13个片段在侵袭性葡萄胎中高表达,克隆其中 3个片段,经序列测定和NCBI数据库的BLAST检索比对,发现 16号片段序列(IHM F16)未见记载,为新发现的表达基因片段,并已被NCBI数据库所收录(dbEST_Id: 10875704;GenBank_Accn:BM403211),其他两个片段为已知的序列。结论:良性与恶性葡萄胎间基因表达存在明显差异,差异基因的检测分析对侵袭性葡萄胎的早期诊断具有潜在意义。

复合微卫星序列多态性在葡萄胎受精类型鉴别中的应用研究

目的 探讨STR多态性分析用于葡萄胎受精类型鉴别的可行性。方法 用 9个位点 (F1 3A0 1、FESFPS、VWA、CSF1P0、TPOX、TH0 1、D1 6S5 39、D7S82 0、D1 3S31 7)复合STR -PCR方法对 4 7例葡萄胎病例进行分析 ,对比葡萄胎遗传带纹和男女双方的关系 ,鉴别葡萄胎的受精类型。结果 DNA完全来自父方的葡萄胎(遗传学完全性葡萄胎 ) 33例 ,其中单精子受精的 (纯合性葡萄胎 )为 2 5例 ,双精子受精的 (杂合性葡萄胎 ) 8例 ;DNA来自双亲的葡萄胎 (遗传学部分性葡萄胎 ) 1 4例 ,均为双精子受精。结论 STR多态性分析可以运用于葡萄胎的受精类型鉴别 ,而且具有简便快捷等优势 。

BALB/C小鼠的白内障突变与大片段小卫星DNA多态性的变化

为了探讨ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠白内障突变品系与ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠保种品系二者间小卫星ＤＮＡ多态性的变化，为进一步研究变异小卫星位点与白内障突变基因的关系最终找到导致这种白内障形成的基因奠定基础，采用α３２ＰｄＣＴＰ标记的人类小卫星ＤＮＡ探针Ｍｙｏ，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交比较了正常ＢＡＬＢ／Ｃ和ＢＡＬＢ／Ｃ白内障突变体小卫星ＤＮＡ多态性的变化。结果：ＢＡＬＢ／Ｃ白内障小鼠种内ＤＮＡ多态性带纹分布高度一致，雌雄间无差别，表明白内障小鼠已纯种化；与正常ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠对比，白内障小鼠ＤＮＡ在２０ｋｂ和９ｋｂ有２个位点出现大片段的小卫星ＤＮＡ插入。该动物模型的形成和突变ＤＮＡ片段的发现将对遗传性白内障基因水平的病因学研究和产前诊断方法的建立具有重要意义。

小鼠DNA的限制性片段长度多态性分析

用人类肌红蛋白基因内含子中３３ｂｐ的小卫星ＤＮＡ重复序列为探针，经ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲＩ正向测序引物和α３２ＰｄＣＴＰ在ＴａｑＤＮＡ聚合酶作用下做合成标记，与６种小鼠的ＤＮＡ限制性片段杂交。结果显示，每个品系平均出现可分辨带纹在１３条以上，不同品系小鼠间的杂交带纹表现出高度的多态性。多态性带纹主要分布在６～２３ｋｂ区段；同一近交系的不同个体间的带纹特点及分布完全一致；Ｃ５７与ＡＫＲ及二者与其他鼠间的亲缘关系更远；随机两种品系鼠间的平均相关机率为４１×１０－８。因此，认为此方法可用于不同品系近交系小鼠的亲缘关系鉴别和遗传监测。

葡萄胎Y染色体的出现率及其遗传学意义

探讨Ｙ染色体在葡萄胎中的出现率及其遗传学意义。方法；采用３对引物对大体病理完全性和部分性葡萄胎共４１例标本扩增Ｙ染色体长臂，短臂有和着丝粒区特异ＤＮＡ序列，结果：２８例完全性葡萄胎中Ｙ阳性者６例，１３例部分性葡萄胎中Ｙ染色体阳性者４例，统计学检验两类葡萄胎间Ｙ染色体出现率差异无显著性。

DNA指纹在近交系动物遗传污染检测中的应用

在用ＤＮＡ指纹为建立葡萄胎动物模型选择动物的过程中，发现“三种”不同来源的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠（分别称为Ｂ、Ｂ１和Ｂ２，Ｂ为保种培养的无污染ＢＡＬＢ／Ｃ）的ＤＮＡ指纹出现了明显差别。与标准的保种品系Ｂ相比，Ｂ１和Ｂ２在１２ｋｂ各缺失了一条ＤＮＡ片段，Ｂ１还缺失了６６ｋｂ的片段，而在６ｋｂ处Ｂ１和Ｂ２都增加了一条ＤＮＡ片段。根据Ｊｅｆｒｅｙｓ的统计，每个小卫星ＤＮＡ位点发生ＤＮＡ指纹可观测性突变的概率为１０－３，而本文结果为５个片段发生变化，如视为突变，其概率为（１０－３）５，即１０－１５，可能性近乎０，所以，可以完全排除这些带纹的差异是由突变造成的，而将这样的差异确定为遗传污染更有道理，而且是亲缘关系较近的品系间的污染。

葡萄胎恶变与Y染色体的关系

目的 探讨Y染色体与葡萄胎恶变的关系。方法 应用PCR技术扩增Y染色体特异DNA序列法 ,检测 82例葡萄胎标本 (其中新鲜葡萄胎标本 5 0例 ,石蜡标本 32例 )。结果 82例葡萄胎标本中恶变者 14例(17.1% )。Y阳性者 19例 (2 3.2 % ) ,其中恶变 3例 (15 .8% ) ;Y阴性者 6 3例 (76 .8% ) ,其中恶变 11例 (17.5 % )。经 χ2 检验 ,Y染色体阳性与否与葡萄胎恶变无关 (P >0 .0 5 )。

葡萄胎的遗传学分类与病理分类的关系

目的 探讨葡萄胎的复合微卫星 DNA序列多态性的遗传学分类与病理学分类的关系。 方法 采用 9个位点 (F13 A0 1、 FESFPS、 VWA、 CSF1P0、 TPOX、 TH0 1、 D16S53 9、 D7S82 0、D13 S3 17)复合微卫星序列 -PCR方法对 47例葡萄胎病例标本进行分析 ,与病理学分类结果进行比较和统计分析。 结果 47例葡萄胎病例中 ,3 3例为遗传学完全性葡萄胎 ,14例为遗传学部分性葡萄胎 ,40例为病理学完全性葡萄胎 ,7例为病理学部分性葡萄胎 ,采用 Kappa一致性检验 ,结果 Kappa= 0 .3 4 6± 0 .14 8(P<0 .0 1)。 结论 复合 STR多态性分析可用于葡萄胎的遗传学分类 ;

Silver STR Ⅲ系统基因座中等位基因在葡萄胎基因组中的分布及其意义

目的研究S ilver STR(Ⅲ系统3个基因座中各等位基因在葡萄胎基因组中的分布及潜在意义。方法对应用多重PCR和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术鉴别出的39例遗传物质完全来自父方的完全性葡萄胎进行分析,统计S ilverSTR(Ⅲ系统3个基因座中各等位基因的出现率。结果在39例葡萄胎中,S ilver STR(Ⅲ系统的D16S539座位出现6个等位基因,D7S820座位出现5个等位基因,D13S317座位出现7个等位基因;D16S539座位中等位基因14出现率显著高于人群(P<0.05),D7S820座位中等位基因9出现率显著低于人群(P<0.01),其余各等位基因出现率与人群基因频率无显著差异;D16S539、D7S820和D13S317基因座位杂合度分别为0.1795,0.1282和0.1538;其中可追踪的23例良性葡萄胎中,D16S539出现6个等位基因,D7S820出现4个等位基因,D13S317出现7个等位基因;可追踪的7例侵袭性葡萄胎中,D7S820出现5个等位基因,D16S539与D13S317均出现4个等位基因,其中D16S539和D13S317座位的等位基因9出现率高于良性葡萄胎(P<0.01和P<0.05)。结论葡萄胎D16S539、D7S820和D13S317基因座位等位基因杂合度远低于人群杂合度;葡萄胎具有侵袭性与D16S539和D13S317座位的等位基因9出现率具有相关性。

外科治疗在胆道术后肝胆管治疗中的临床效果

目的探讨外科治疗在胆道术后肝胆管治疗中的临床效果。方法将2008年4月～2012年4月德阳市人民医院普外科100例胆道术后肝内胆管结石患者随机分为对照组与观察组,每组各50例。对照组行常规胆囊切除以及胆道探查术,观察组行外科手术治疗。比较两组临床疗效、术中出血量、手术时间、住院天数及术后情况。结果对照组临床治疗优良率为76%,显著低于观察组（94%）,两组比较差异有高度统计学意义（P〈0.01）;观察组术中出血量、手术时间及住院天数分别为（86.72±6.93）mL、（149.62±21.55）min及（11.27±2.56）d,均显著小于对照组[（105.22±12.77）mL、（182.27±31.79）min、（15.73±3.82）d],差异均有统计学意义（P〈0.05）;对照组术后并发症发生率为12%,显著高于观察组（32%）,两组比较差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论外科治疗在胆道术后肝胆管治疗中的临床疗效显著,术后并发症发生率低,值得在临床上加以推广并应用。

人肌红蛋白基因内含子中重复DNA序列在小鼠基因组中同源分布及多态性

目的：建立区别动物亲缘关系的分子生物学方法以选择建立葡萄胎动物模型所需的近交系小鼠。方法：用人肌红蛋白基因内含子中重复序列的多聚体为探针，经α３２ＰｄＣＴＰ标记，与近交系小鼠ＢＡＬＢ／Ｃ和昆明小鼠的ＤＮＡ限制性片段作Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，探讨该序列在鼠基因组中是否同源分布及其多态性。结果：所用的两种鼠在２～２３ｋｂ间都出现了多条杂交带，两者的带纹分布有明显差别，表现出高度的多态性。结论：人类的这一ＤＮＡ序列在小鼠中有广泛的分布，并且存在着不同的拷贝数，表现出了鼠间ＤＮＡ多态性的不同。

利用数字外科技术辅助矫正偏颌畸形

背景:偏颌畸形涉及到的解剖部位较多,修复较复杂,同时由于此类疾病的治疗方法没有标准化的手术模式,患者的畸形类型也有很大差别,所以此类手术的设计和实施主要依靠医生的经验,会有许多不尽人意之处。目的:探讨利用数字外科技术制作仿真头颅模型,用来辅助手术设计和矫正偏颌畸形的方法。方法:针对1例上、下颌骨外伤性偏颌畸形患者,采用CT扫描和三维重建,应用快速成型技术,制作患者颅面部骨组织三维模型,在此模型上设计手术方案。为保持目前咬合关系,将上颌骨下份和下颌骨整体逆时针旋转5°,左侧下颌支去除部分骨质,将颏部左移至中线。模拟手术过程:在三维头颅模型上进行截骨、移位等操作,观察矫治效果。在三维头颅模型上制作必要的辅助工具,用来指导手术并提高矫治的精确性。结果与结论:患者矫治后对面部外形效果满意,咬合关系、咀嚼功能均未受到影响。提示数字外科技术能真实再现畸形颌骨的形态,为准确诊断、设计矫治方案、模拟矫治过程、指导手术进行提供理想的外科模型,对偏颌畸形的矫正有很好的辅助作用。

多囊卵巢综合征相关基因的差异表达研究

目的：研究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)患者相关基因的差异表达。方法：应用人类全基因组基因芯片 U133A，以体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization embryo transfer，IVF-ET)的多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)患者和对照者取卵后所剩的卵泡颗粒细胞为研究对象，检测5例 PCOS 患者和5例对照者颗粒细胞中相关差异表达的基因。结果：与对照组比较，共筛查出与 PCOS 明显相关的差异表达基因46个，其中25个基因表达增加(上调)，21个表达减少(下调)。这些差异表达基因具有多种生物学功能，如脂类代谢调节、细胞间的信号传导和免疫炎症反应，反映了 PCOS 患者临床症状的多样性。结论：应用基因芯片技术，可筛查出新的 PCOS 遗传相关候选基因。

北京地区宫颈癌HPV16上游调控序列、E6、E7癌基因序列初步分析

为检测HPV16上游调控序列(Upstream regulatory region,URR)、E6、E7癌基因变异在北京地区宫颈癌患者癌组织中的分布特征,探讨该地区宫颈癌发生同HPV16变异株间的相关性,文章以提取的31例HPV16检测阳性宫颈癌组织DNA为模板,设计针对性引物扩增URR、E6、E73个目的片段,PCR产物直接测序并通过GenBank对比分析变异和分支鉴定情况。在所分析的宫颈癌组织中,URR是突变频率最高的片段,其次为E7,最保守的序列为E6。共发现热突变位点8个,分别为URR序列上G7521A(100%)、C7435G(96.77%)、C24T(45.16%)、A7729C(45.16%)、G7839A(45.16%);E6序列上T178G(41.94%);E7序列上A647G(45.16%)、T846C(45.16%)。HPV16分支分布频率最广的是As型(54.84%),其次为E型(45.16%)。研究结果提示,HPV16URR序列上G7521A、A7729C、G7839A,E6序列上T178G、T350G,E7序列上A647G、G658A等位点的变异可能与病毒致癌潜能及宫颈癌的发生相关。北京地区宫颈癌患者中As和E型可能是两种最主要的HPV16分支,这有可能会为HPV疫苗的研制和感染治疗提供有价值的信息。As型和E型病毒在不同年龄组和不同肿瘤分期组的患者中分布频率有差异,这可能会为揭示宫颈癌年轻化趋势提供新的线索。

不典型鳞状细胞和低度鳞状上皮内病变中高危型人乳头瘤状病毒检测的作用

目的：探讨高危型人乳头瘤状病毒（human papillomavirus，HPV）检测对宫颈液基细胞学诊断为不能明确意义的不典型鳞状细胞（atypical squamous cells undetermined significance，ASC—US）和低度鳞状上皮内病变（low squamous intraepithelial lesion，LSIL）的分流管理作用。方法：对940例宫颈液基细胞学检查结果为ASC—US或LSIL的患者采用二代杂交捕获（hybird captureⅡ，HC-Ⅱ）方法检测高危型HPV DNA，并在阴道镜指导下进行宫颈活检。结果：940例中，ASC—US497例，LSIL443例。行宫颈活检病理诊断，慢性宫颈炎417例，宫颈湿疣315例，宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial lesions，CIN）1级124例，CIN2级65例，CIN3级或宫颈浸润癌19例。在宫颈细胞学异常的ASC—US和LSIL组中，高危型HPV阳性率分别是59．6％和84．9％。在ASC—US和LSIL组HPV阴性时CIN2级及其以上病变（CIN2级，CIN3级或宫颈浸润癌）检出率为0．5％和6．0％，HPV阳性时检出率是8．8％和14．1％，HPV阳性时CIN2级及其以上病变检出率高于HPV阴性患者，差异具有统计学意义。在ASC—US组中，高危型HPV检测对CIN2级及其以上病变的阴性预测值达99．5％；当高危型HPV DNA检测结果在1～9．99时，CIN2级及其以上病变仅占1．6％；在10以上时，CIN2级及其以上病变占10．7％。结论：宫颈细胞学为ASC—US的患者如果高危型HPV阳性，检出CIN2级及其以上病变的概率增加，并且高危型HPV检测的阴性预测值高，在ASC—US患者中，随着HPV载量增高，检出CIN2级及其以上病变的概率随之增高。高危型HPV检测和病毒载量有助于ASC—US的分流管理，而对LSIL无分流管理作用。

10种外科学综合类期刊零被引论文的特征分析

目的分析10种外科学综合类期刊零被引论文的特征。方法选择《2016年版中国科技期刊引证报告(核心板)》10种外科学综合类期刊,在中国知网CNKI中检索2011年发表的零被引论文,分析10种期刊零被引论文的作者数量、第一作者所属机构、基金资助情况、论文篇幅和类型。结果零被引论文共435篇,零被引率为7.0%~20.0%,其中《中国实用外科杂志》居首位,影响因子排第2位,最低的是《中国微创外科杂志》。署名2~5位作者的零被引论文比例最高,占75.9%(330/435),1位作者零被引论文比例最低,占8.5%(37/435)。零被引论文第一作者所属机构中,省部级医院/医科大学附属医院所占比例最高(49.0%),其次为市级医院/医学院附属医院(42.3%)。零被引论文无基金所占比例最高,达87.1%(379/435),国家级基金所占比例最低,为3.9%(17/435)。435篇零被引论文的平均篇幅是2.3页。零被引论文类型临床研究所占比例最高,占57.9%(252/435),其次为病例报告,占22.8%(99/435)。结论 10种外科学综合类期刊2011年零被引率与影响因子关系不大。零被引论文中,署名2~5位作者占大多数,第一作者所属机构以省市级医院为主。零被引论文无基金资助占大多数,论文类型以临床研究和病例报告为主。

两种冷冻保护剂玻璃化冷冻小鼠卵巢的比较研究

目的:探讨两种玻璃化冷冻保护剂对小鼠卵巢组织学和功能的影响。方法:将23只4周龄ICR雌鼠随机分为新鲜卵巢移植组(6只)、去势组(5只)、EG40组(6只)和ED20组(6只)。EG40组和ED20组分别应用乙二醇(EG)和联合应用EG与二甲基亚砜(DMSO)玻璃化冷冻小鼠卵巢组织,一周后解冻,将一部分复苏卵巢组织自体移植入小鼠肾被膜下,另一部分组织行组织学观察。移植术后5d开始观察所有小鼠的动情周期,一个月后处死小鼠,对存活的卵巢组织行组织学观察。结果:EG40组、ED20组和新鲜卵巢移植组小鼠动情周期出现率均为100%,出现动情周期的天数分别为10.2±1.2d、8.0±0.9d和6.8±1.0d,EG40组动情周期出现天数明显多于新鲜卵巢移植组(P<0.01);ED20组与新鲜卵巢移植组差异无显著性(P>0.05)。移植存活的卵巢组织内可见不同发育阶段的卵泡,形态正常,但冻融卵巢组织内卵泡数量比新鲜组织少。结论:联合应用玻璃化冷冻保护剂EG和DMSO对小鼠卵巢组织学和功能的影响较小。

多囊卵巢综合征患者血清单核细胞趋化蛋白-1水平与血脂代谢的相关性

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的变化与血脂代谢的关系。方法:应用ELISA方法检测65例PCOS患者及20例体重指数(BMI)<25kg/m2的正常对照组血清中MCP-1水平,用化学发光法检测血清中泌乳素(PRL)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)和睾酮(T)水平,用放射免疫法检测血清中雄烯二酮(A)水平;同时检测血脂:甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A(ApoA)、载脂蛋白B(ApoB)、脂蛋白(a)LP(a)。根据BMI将PCOS患者分为:肥胖组27例(BMI≥25kg/m2),非肥胖组38例(BMI<25kg/m2)。结果:PCOS组MCP-1(P=0.001)及ApoB(P=0.018)水平明显高于正常对照组,而ApoA/ApoB的比值明显低于正常对照组(P=0.015)。肥胖PCOS患者血清MCP-1水平明显高于非肥胖PCOS患者(P=0.012),非肥胖PCOS患者MCP-1水平明显高于正常对照组(P=0.03)。单因素相关分析显示,MCP-1与BMI(r=0.366,P=0.001),LH(r=0.262,P=0.016),TG(r=0.480,P=0.000)及ApoB(r=0.289,P=0.008)呈正相关,与ApoA/ApoB的比值呈负相关(r=-0.282,P=0.009);控制BMI的偏相关分析显示,MCP-1与LH(r=0.2577,P=0.020)及TG(r=0.4611,P=0.000)呈正相关。多元回归分析显示TG和BMI是影响MCP-1的主要因素,而且TG的影响更大。结论:肥胖与非肥胖PCOS患者血清MCP-1水平均明显升高;MCP-1的升高与BMI,LH,TG,ApoB及ApoA/ApoB的比值有关;TG和BMI是影响PCOS患者血清MCP-1改变的主要因素,而且TG的影响更大;MCP-1可能参与了PCOS的病理生理过程以及PCOS患者远期并发症的发生。