糖尿病肾病大鼠TGF-β1调控SREBP1活化的作用

目的 探讨糖尿病肾病(DKD)大鼠转化生子因子(TGF)-β1调控胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1活化的作用。方法 TGF-β1 (2 ng/ml)和(或)SCAP抑制剂(Fatostatin)、S1P抑制剂(AEBSF)、PI3K抑制剂(LY294002,Wortmainin)、Akt抑制剂(Akt inhibitorⅧ)、mTOR抑制剂(rapamycin)、TβR1抑制剂(SB431542)处理培养的大鼠肾小球系膜细胞(MC),免疫荧光和Western印迹检测SREBP1的核移位和蛋白表达水平;Western印迹检测FN和CTGF蛋白表达;p3TP-Lux荧光素酶报告质粒和pCMV-β-gal或SREBP1 siRNA转染至MC或Smad3 WT/KO MC,TGF-β1处理24 h后检测p3TP-Lux荧光素酶活性。结果 与AdLacZ组大鼠肾组织中SREBP1蛋白水平相比,AdTGF-β1组明显增加(P<0.05)。与Con组MC中SREBP1蛋白的核表达荧光强度相比,TGF-β1组明显增加(P<0.05),与TGF-β1组MC中SREBP1蛋白的核表达荧光强度相比,T+fato组明显降低(P<0.05)。与Con组mSREBP1蛋白表达相比,TGF-β1组明显升高(P<0.05)。与TGF-β1组mSREBP1蛋白表达相比,T+fato组和T+AEBSF组均明显降低(P<0.01)。与Con组GFP荧光强度相比,TGF-β1组明显增加(P<0.05)。与TGF-β1组GFP荧光强度相比,T+fato组明显降低(P<0.05)。与TGF-β1组mSREBP1表达相比,T+LY组、T+Wort组、T+Akti组和T+rapa组均明显降低(均P<0.05)。与TGF-β1组相比,T+RIinh组明显抑制了mSREBP1蛋白的表达(P<0.01)。与ConB组mSREBP1表达相比,TGF-β1B组明显升高。ConB组Smad3 KO MC的p3TPLux荧光素酶活性与TGF-β1B组有显著差异(P<0.05)。TGF-β1A组和TGF-β1B组mSREBP1蛋白表达无明显差异(P>0.05)。与ConB组p3TP-Lux荧光素酶活性相比,TGF-β1D组明显增加(P<0.01);与TGF-β1D组p3TP-Lux荧光素酶活性相比,T+fatoA组明显抑制(P<0.01)。TGF-β1 E组p3TP-Lux荧光素酶活性明显高于TGF-β1 F组(P<0.05)。与ConD组SREBP1下游促纤维化蛋白CTGF和FN蛋白相比,TGF-β1D组均明显升高(P<0.05);与TGF-β1D组SREBP1下游促纤维化蛋白CTGF和FN蛋白相比,T+fatoA组则明显降低(P<0.05)。结论 TGF-β1诱导SREBP1活化引起MC的脂质沉积是DKD发生的重要原因。然而TGF-β1活化SREBP1的作用机制则与SCAP/S1P、PI3K/Akt和TβR1密切相关。然而,TGF-β1的促纤维化作用又依赖SREBP1的活化诱导脂质沉积。因此SREBP1是防治DKD的新靶点。

UC-MSCs腹腔移植对db^-/db^-小鼠血糖和体重的影响

目的明确脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对2型糖尿病(T2DM)db^-/db^-小鼠的临床疗效及安全有效的移植途径,旨在为临床应用提供实验与理论数据。方法db/m和db^-/db^-小鼠各10只,每种小鼠各分为2组,db/m对照组,db/m+UC-MSCs组,db^-/db^-模型组,db^-/db^-+UC-MSCs组,5只/组。对照组和模型组给予1mL生理盐水腹腔注射;db/m+UC-MSCs和db^-/db^-+UC-MSCs组腹腔注射UC-MSCs为1×10^7个细胞/只鼠,总液体量为1mL。每周固定时间记录餐后血糖与体重,计算各组小鼠生存率。结果与db-/db-模型组小鼠相比,腹腔途径移植UC-MSCs后,db^-/db^-小鼠的血糖水平明显下降,与非移植db^-/db^-小鼠比较差异有显著性,对db/m小鼠无影响;移植与非移植小鼠体重无明显变化。db^-/db^-+UC-MSCs组小鼠出现部分死亡,生存率为75%,其它组小鼠生存率均为100%。结论UC-MSCs腹腔移植途径可有效控制T2DM小鼠血糖变化,对体重变化无明显影响。可为临床治疗提供参考。