氯化钴对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性的影响

目的:观察氯化钴(CoCl_2)作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响,并阐述其可能机制。方法:体外培养SKOV3细胞株,随机分为对照组、CoCl_2组、顺铂(DDP)组和CoCl_2联用DDP (联合)组,CoCl_2组细胞以200μmol·L^(-1) CoCl_2作用4h后换普通细胞培养基培养20h,DDP组细胞以含10 mg·L^(-1) DDP的细胞培养基培养24h,联合组细胞以200μmol·L^(-1) CoCl_2作用4h后更换含10mg·L^(-1) DDP的细胞培养基继续培养20h。MTT法检测各组细胞存活率,免疫荧光法检测各组细胞中低氧诱导因子1α(HIF-1α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性表达强度,Rhod 2-AM荧光探针检测各组细胞线粒体钙离子(Ca^(2+))水平,免疫蛋白印迹(Western blotting)法观察凋亡相关蛋白细胞色素C (cyto C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase 3)和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (cleaved caspase 3)蛋白表达水平,Muse~凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡率。结果:与对照组比较,CoCl_2组细胞存活率无明显变化(P>0.05),其余2组细胞存活率明显下降(P<0.05);且联合组高于DDP组(P<0.05)。与对照组比较,CoCl_2组和联合组细胞中HIF-1α阳性表达强度明显增强(P<0.05);DDP组和联合组细胞中iNOS阳性表达强度明显增强(P<0.05)。与对照组比较,DDP组和联合组细胞Ca^(2+)水平升高(P<0.05);且DDP组高于联合组(P<0.05)。与对照组比较,CoCl_2组细胞中cyto C、caspase 3和cleaved caspase 3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),DDP组细胞中cyto C、caspase 3和cleaved caspase 3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);且联合组低于DDP组(P<0.05)。与对照组比较,DDP组细胞凋亡率明显升高(P<0.05);联合组细胞凋亡率较DDP组降低(P<0.05)。结论:CoCl_2可以通过抑制DDP诱导的人卵巢癌SKOV3细胞株iNOS表达增强来减少线粒体途径凋亡的发生,降低其顺铂敏感性。

顺铂诱导肿瘤细胞死亡中钙离子作用研究进展

顺铂诱导肿瘤细胞死亡存在多种分子机制,钙离子作为细胞内重要的第二信使,参与多种细胞功能调控。本文对钙离子在顺铂诱导肿瘤细胞氧化应激、自噬、凋亡过程中发挥的信号作用及相关机制的研究进行综述,总结钙离子对顺铂诱导肿瘤细胞死亡的影响,为提高顺铂化疗疗效、逆转顺铂耐药性提供参考。

P53对自噬调节的研究进展

P53是细胞自噬重要的调节因子,根据P53不同的亚细胞定位,可以对自噬发挥双重调节作用。细胞核中的P53可通过转录依赖性途径上调细胞自噬水平;而在细胞质中的P53对细胞自噬具有负性调节作用。

氯化钴诱导人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性下降及机制研究

目的将氯化钴作用于人卵巢癌SKOV3细胞,观察其顺铂(DDP)敏感性变化,并阐述可能机制。方法体外培养SKOV3细胞,随机分为对照组、氯化钴组、DDP组和联合给药组,氯化钴组以200μmol/L氯化钴作用4 h后更换普通细胞培养液继续培养20 h,DDP组以含10 mg/L DDP的培养基作用24 h,联合给药组以200μmol/L氯化钴作用4 h后更换含10 mg/L DDP的细胞培养液继续培养20 h。MTT法检测各组细胞存活率;Muse^■凋亡检测试剂盒检测各组细胞凋亡率;Hoechst33342染色观察各组细胞核形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)观察细胞色素C(cyto C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、缺氧诱导因子(HIF-1α)、p-糖蛋白(p-GP)、磷酸化的信号转导子和转录激活子3(p-STAT3)表达水平。结果与对照组比较,DDP组细胞存活率明显下降;与DDP组比较,联合给药组细胞存活率明显升高。与对照组比较,DDP组细胞凋亡率升高;与DDP组比较,联合用药组细胞凋亡率明显降低,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,DDP组细胞核异常比例明显升高;与DDP组比较,联合用药组细胞核异常比例降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,DDP组细胞中cyto C和Caspase-9表达水平明显升高,氯化钴组和联合用药组HIF-1α、p-STAT3和p-GP表达水平明显升高;与DDP组比较,联合用药组cyto C和Caspase-9表达水平降低,氯化钴组和联合用药组HIF-1α、p-STAT3和p-GP表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯化钴诱导缺氧可导致HIF-1α表达水平升高,同时伴随p-STAT3和p-GP表达水平的升高,人卵巢癌SKOV3细胞DDP敏感性下降。

BMH-21诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡的研究

目的探讨核仁应激对人肝癌BEL-7402细胞的凋亡诱导作用。方法以人肝癌BEL-7402细胞为研究对象,依据给药剂量实验分为4组:对照组(0μmol/L),1、2和4μmol/L组。MTT检测BEL-7402细胞生存率,共聚焦显微镜观察核仁应激标志蛋白变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白印迹检测凋亡相关蛋白表达。结果 MTT结果表明BMH-21对BEL-7402细胞生长抑制作用呈剂量依赖性,共聚焦显微镜观察发现BMH-21诱导BEL-7402细胞核仁应激标志蛋白发生变化,流式细胞仪检测结果表明BMH-21以剂量依赖性的方式诱导细胞凋亡,蛋白印迹结果显示凋亡相关蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论 BMH-21诱导人肝癌BEL-7402细胞核仁应激,导致细胞凋亡的发生。