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猪流行性腹泻病毒串联表位亚单位疫苗的免疫原性
被引量:
3
1
作者
杨灿灿
吴诗璟
+2 位作者
张峒
张
元兴
刘琴
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期624-630,共7页
将纤突蛋白S的COE区域(E1)、S1D区域(E2)、C末端区域(E3)以及膜蛋白M的M3区域(E4)设计成串联表位亚单位(EC),以报道的COE和S1亚单位作为对照,构建了不同亚单位疫苗的杆状病毒载体表达系统。杆状病毒载体表达系统生产的目标蛋白采用镍柱...
将纤突蛋白S的COE区域(E1)、S1D区域(E2)、C末端区域(E3)以及膜蛋白M的M3区域(E4)设计成串联表位亚单位(EC),以报道的COE和S1亚单位作为对照,构建了不同亚单位疫苗的杆状病毒载体表达系统。杆状病毒载体表达系统生产的目标蛋白采用镍柱亲和层析进行纯化。在BALB/c小鼠上,不同亚单位疫苗的免疫原性初步评价结果表明,EC、COE和S1序列分别成功插入杆状病毒基因组,EC、COE和S1蛋白均能在Sf9细胞中分泌表达,但是纯化条件依蛋白不同而有差异。与COE和S1亚单位疫苗相比,EC亚单位疫苗能激发小鼠产生更多的特异性免疫球蛋白IgG、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α。结果表明,各个亚单位疫苗均能激发小鼠的体液免疫与细胞免疫,与COE和S1亚单位疫苗相比,EC亚单位疫苗能更好地激发小鼠的体液免疫与细胞免疫。
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关键词
猪流行性腹泻病毒
串联表位
亚单位疫苗
杆状病毒载体表达系统
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职称材料
利用多基因缺失型杆状病毒在昆虫细胞中生产腺相关病毒
2
作者
张峒
蒋卓含
+4 位作者
吴奕凡
李倩茹
刘晨静
张
元兴
刘琴
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期473-484,共12页
腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是基因治疗领域最常使用的病毒载体之一,产量低、成本高是该产业面临的关键瓶颈问题。本研究旨在基于多基因缺失型杆状病毒,建立双病毒感染昆虫细胞以生产AAV的技术体系。首先,进行AAV生产用多...
腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是基因治疗领域最常使用的病毒载体之一,产量低、成本高是该产业面临的关键瓶颈问题。本研究旨在基于多基因缺失型杆状病毒,建立双病毒感染昆虫细胞以生产AAV的技术体系。首先,进行AAV生产用多基因缺失型重组杆状病毒的构建和扩增,并检测杆状病毒滴度及其感染细胞的效果;然后,使用双杆状病毒共感染昆虫细胞,并优化感染条件;最后,基于优化条件进行AAV生产,并检测评估产量、质量等相关指标。结果表明,AAV生产用多基因缺失型杆状病毒滴度较野生型无差异,感染后细胞存活率下降明显减缓。使用双病毒路线进行AAV优化生产,Bac4.0-1的基因组滴度为1.63×10~(11)VG/mL,Bac5.0-2的基因组滴度为1.02×10~(11) VG/mL,较野生型产量分别提升了240%和110%。电镜下,3组均具有正常的AAV病毒形态,且转导活性相近。本研究建立了基于多基因缺失型杆状病毒感染昆虫细胞的AAV生产体系,显著提高了AAV产量,具有一定的应用价值。
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关键词
杆状病毒
多基因缺失
昆虫细胞
腺相关病毒
生产工艺
原文传递
题名
猪流行性腹泻病毒串联表位亚单位疫苗的免疫原性
被引量:
3
1
作者
杨灿灿
吴诗璟
张峒
张
元兴
刘琴
机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
上海海洋动物疫苗工程技术研究中心
出处
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期624-630,共7页
基金
中央高校基本科研业务费专项(222201211729)。
文摘
将纤突蛋白S的COE区域(E1)、S1D区域(E2)、C末端区域(E3)以及膜蛋白M的M3区域(E4)设计成串联表位亚单位(EC),以报道的COE和S1亚单位作为对照,构建了不同亚单位疫苗的杆状病毒载体表达系统。杆状病毒载体表达系统生产的目标蛋白采用镍柱亲和层析进行纯化。在BALB/c小鼠上,不同亚单位疫苗的免疫原性初步评价结果表明,EC、COE和S1序列分别成功插入杆状病毒基因组,EC、COE和S1蛋白均能在Sf9细胞中分泌表达,但是纯化条件依蛋白不同而有差异。与COE和S1亚单位疫苗相比,EC亚单位疫苗能激发小鼠产生更多的特异性免疫球蛋白IgG、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α。结果表明,各个亚单位疫苗均能激发小鼠的体液免疫与细胞免疫,与COE和S1亚单位疫苗相比,EC亚单位疫苗能更好地激发小鼠的体液免疫与细胞免疫。
关键词
猪流行性腹泻病毒
串联表位
亚单位疫苗
杆状病毒载体表达系统
Keywords
porcine epidemic diarrhea virus
tandem epitope
subunit vaccine
baculovirus vector expression system
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
下载PDF
职称材料
题名
利用多基因缺失型杆状病毒在昆虫细胞中生产腺相关病毒
2
作者
张峒
蒋卓含
吴奕凡
李倩茹
刘晨静
张
元兴
刘琴
机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
上海海洋动物疫苗工程技术研究中心
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第2期473-484,共12页
基金
上海市细胞代谢光遗传学技术前沿科学研究基地项目(2021 Sci&Tech 03-28)。
文摘
腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是基因治疗领域最常使用的病毒载体之一,产量低、成本高是该产业面临的关键瓶颈问题。本研究旨在基于多基因缺失型杆状病毒,建立双病毒感染昆虫细胞以生产AAV的技术体系。首先,进行AAV生产用多基因缺失型重组杆状病毒的构建和扩增,并检测杆状病毒滴度及其感染细胞的效果;然后,使用双杆状病毒共感染昆虫细胞,并优化感染条件;最后,基于优化条件进行AAV生产,并检测评估产量、质量等相关指标。结果表明,AAV生产用多基因缺失型杆状病毒滴度较野生型无差异,感染后细胞存活率下降明显减缓。使用双病毒路线进行AAV优化生产,Bac4.0-1的基因组滴度为1.63×10~(11)VG/mL,Bac5.0-2的基因组滴度为1.02×10~(11) VG/mL,较野生型产量分别提升了240%和110%。电镜下,3组均具有正常的AAV病毒形态,且转导活性相近。本研究建立了基于多基因缺失型杆状病毒感染昆虫细胞的AAV生产体系,显著提高了AAV产量,具有一定的应用价值。
关键词
杆状病毒
多基因缺失
昆虫细胞
腺相关病毒
生产工艺
Keywords
baculovirus
multiple gene deletion
insect cell
adeno-associated virus
manufacturing process
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪流行性腹泻病毒串联表位亚单位疫苗的免疫原性
杨灿灿
吴诗璟
张峒
张
元兴
刘琴
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
下载PDF
职称材料
2
利用多基因缺失型杆状病毒在昆虫细胞中生产腺相关病毒
张峒
蒋卓含
吴奕凡
李倩茹
刘晨静
张
元兴
刘琴
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
原文传递
已选择
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