帕金森病患者的语音声学特征分析

目的 分析帕金森病(PD)患者的语音声学特征,初步探索声学指标与PD的相关性。方法 共纳入2021年1月至2022年1月于东莞市松山湖中心医院确诊的PD患者83例作为PD组,健康体检者87例作为正常对照组。对帕金森病患者根据统一帕金森病综合评分量表(unified Parkinson’s disease rating scale,UPDRS)进行评估。采集所有研究对象的声音样本,利用语音处理软件提取声学特征指标。按照性别分组比较研究对象的声学特征指标,并分析PD患者声学特征指标与UPDRS评分的相关性。结果 共收集受试者语音样本3 720个,其中PD组1 895个,对照组1 825个。PD组的最大基频、基频范围及基频周期变化率低于正常对照组,振幅扰动高于正常对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。女性PD患者基频周期变化率与UPDRS-Ⅲ评分呈负相关(r=-0.617,P<0.05)。结论 PD患者语音声学变化主要表现为最大基频、基频范围及基频周期变化率降低,振幅扰动增高;基频周期变化率可能用于协助评估女性PD患者病情变化。

缺血性脑卒中患者血尿酸的表达及危险因素分析

目的 分析缺血性脑卒中患者血尿酸（UA）表达及危险因素.方法 145例缺血性脑卒中患者为病例组,同期健康体检者123例为对照组,比较病例组与对照组血UA水平及其他危险因素的差别,Logistic回归分析这些因素与缺血性脑卒中发病的关系.病例组按照不同发病年龄段及发病时期分别分为3组,比较各组间血UA水平的差异.结果 病例组中糖尿病、高血脂患者例数及血UA水平高于对照组.多因素Logistic回归分析显示,糖尿病、高血脂及血UA水平与缺血性脑卒中发生密切相关（P＜0.05）.＞60岁年龄组与＜45岁及45 ～60岁组比较,血UA水平较高[（345.73 ±40.09） μmol/L],组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.发病时期＜1 d组与1～＜4 d及4～7 d组比较,血UA水平较高[（351.08±52.41） μmol/L],组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 血UA水平升高可能是缺血性脑卒中患者发病的危险因素,并且随着发病年龄的增长,血UA水平增高；随着缺血性脑卒中病情进展,血UA水平降低.

血尿酸与缺血性脑卒中的相关性分析

目的:探讨血清尿酸水平与缺血性脑卒中的关系。方法:采用病例对照研究,纳入144例缺血性脑卒中患者为观察组,同期健康体检者105例为对照组,测定空腹静脉血清尿酸值及其他生物化学指标,Logistic回归分析血尿酸水平与缺血性脑卒中的关系。结果:观察组中吸烟者、糖尿病患者及血尿酸水平高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇水平低于对照组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,糖尿病(OR=2.329,P=0.005)、血尿酸(OR=1.007,P=0.028)、高密度脂蛋白胆固醇(OR=0.092,P=0.003)与缺血性脑卒中发生密切相关。结论:血尿酸水平升高可能是缺血性脑卒中患者发病的危险因素。

构建人类neuritin真核表达系统

目的:构建人类neuritin基因真核表达载体,并观察其转染的PC12细胞中neuritin的表达。方法:用基因重组技术,将人类NeuritincDNA的开放阅读框克隆到真核表达载体pcDNA4.0中,经酶切鉴定及测序分析、并以脂质体介导转染PC12细胞,了解其在细胞内的表达。结果:酶切鉴定及测序分析,表明重组pcDNA4.0-neuritin表达质粒克隆成功,neuritin基因在PC12细胞中获得表达。结论:以脂质体介导pcDNA4.0-neuritin质粒转染真核细胞,为基因治疗神经系统退行性病变奠定实验基础。

OCSP分型在急性缺血性卒中的临床应用

目的:分析急性缺血性卒中患者OCSP分型的构成,结合不同亚型的NIHSS评分,探讨不同亚型与神经功能缺损程度的关系。方法:对173例急性缺血性卒中患者进行美国国立卫生研究所卒中量表(NIHSS)评分,并按照OCSP的分型标准分为4大亚型,分析不同亚型与NIHSS评分的关系。结果:本组患者OCSP各亚型的构成为:腔隙性梗死36.42%,部分前循环梗死31.21%,后循环梗死17.92%,完全前循环梗死14.45%。4个亚型中,完全前循环梗死NIHSS评分最高、神经功能缺损程度最高,其次为后循环梗死和部分前循环梗死,腔隙性梗死NIHSS评分最低。4种类型的NIHSS评分差异有统计学意义(P<0.05)。结论:OCSP分型方法可用于对急性缺血性卒中患者进行临床分析,神经功能缺损程度随OCSP不同亚型而变化,OCSP分型可用于评价急性缺血性卒中患者的神经功能缺损程度。

青年缺血性脑卒中的病因学分型及危险因素分析

目的探讨青年缺血性脑卒中病因学分型及危险因素。方法应用TOAST标准对127例青年缺血性脑卒中患者进行病因学分型,分析常见的危险因素。结果本组大动脉粥样硬化型为29.1%,心源性脑栓塞型为9.4%,小动脉闭塞型为17.3%,其他病因型为11.8%,病因不明型为32.3%;危险因素由高到低分别为血脂异常57.6%、高血压病43.1%、饮酒40.1%、吸烟35.4%、糖尿病17.2%、脑血管病家族史14.8%。结论青年缺血性脑卒中以不明原因型和大动脉粥样硬化型比例高;血脂异常、高血压病、吸烟及饮酒是常见的危险因素。

神经突起因子酵母双杂交诱饵质粒构建和转化

目的构建和转化神经突起因子(Neuritin)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究Neuritin的功能及作用机制奠定基础。方法用PCR扩增neuritin全长cDNA中编码开放读框的基因片段;将该基因片段与pLex-A载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;将核苷酸序列正确的重组质粒转化入EGY48[p8op-LacZ]酵母菌株。结果成功构建pLexA-neuritin重组质粒。转化有重组质粒和pLexA空载体的2种EGY48[p8op-LacZ]酵母都能在SD/Gal/Raf/-His/-Ura培养基中长成白色菌落,同时,转化pLexA-pos阳性对照质粒的酵母菌在相同条件下长成蓝色菌落,但都不能在SD/-His/-Leu/-Ura培养基中生长,在SD/-His/-Ura液中培养16 h后,A600均值均为0.9。表明重组质粒表达的融合蛋白没有激活LEU2和lacZ酵母报告基因表达的活性,也没有酵母毒性作用。结论构建的诱饵重组质粒可以用于下一阶段的人胎脑cDNA文库筛选。

帕金森病异动症发病的相关因素分析

目的探讨帕金森病异动症(LID)发生的相关因素。方法应用统一帕金森病(PD)评分量表(UPDRS)第2、3部分和第4-A部分,Hoehn-Yahr分期评分共随访410例PD患者,将UPDRS量表第IV-A部分32项≥1分的患者纳入LID组,并与非LID组的年龄、性别、发病年龄、主要临床亚型、病程、使用多巴制剂的疗程及当前的治疗情况等因素进行统计分析。结果 410例帕金森病患者中的396例患者坚持规律服药2个月以上,并且其中的105例患者出现异动症,LID组与非LID组在性别、年龄、发病年龄、病程、使用左旋多巴疗程、剂量、Hoehn-Yahr分期及统一帕金森病评分量表第3部分评分之间差异有统计学意义。异动症相关的多因素Logistic回归分析显示,性别、年龄、发病年龄、病程及使用左旋多巴的日剂量是LID发生的独立危险因素。结论女性患者,年龄及发病年龄较轻,病程较长以及使用左旋多巴日剂量较大的帕金森病患者易发生异动症。

NT3的酵母双杂交诱饵载体的构建和初步鉴定

构建和转化神经营养素3(neurotrophin 3,NT3)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究NT3的功能及作用机制奠定基础。用PCR扩增NT3基因cDNA中编码完整开放读框的基因片段;将该基因片段与pLexA载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;将核苷酸序列正确的重组质粒转化入EGY48[p8op LacZ]酵母菌株。结果成功构建pLexA NT3重组质粒。转化有重组质粒和pLexA空载体的二种EGY48[p8op LacZ]酵母都能在SD Gal Raf His Ura培养基中长成白色菌落(同时,转化pLexA pos阳性对照质粒的酵母菌在相同条件下长成蓝色菌落),但都不能在SD His Leu Ura培养基中生长,在SD His Ura液中培养16h后,OD600均值均为0.8±0.1。这表明,重组质粒表达的融合蛋白没有激活LEU2和lacZ酵母报告基因表达的活性,也没有酵母毒性作用。因此,构建的诱饵重组质粒可以用于下一阶段的人胎脑cDNA文库筛选。

BDNF的酵母双杂交诱饵载体的构建和初步鉴定

目的：构建和转化脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究BDNF的功能及作用机制奠定基础。方法：用PCR扩增BDNF基因cDNA中编码完整开放阅读框的基因片段；将该基因片段与plexA载体定向重组；用酶切和测序鉴定重组质粒；将核苷酸序列正确的重组质粒转化人EGY48(p8op-LacZ)酵母菌株。结果：成功构建pLexA-BDNF重组质粒。转化有重组质粒和pLexA空载体的两种EGY48(p8Op—LacZ)酵母都能在SD／Gal／Raf／-His／-Ura培养基中长成白色菌落(同时,转化pLexA-pos阳性对照质粒的酵母菌在相同条件下长成蓝色菌落),但都不能在SD／-His／-Leu／-Ura培养基中生长,在SD／-His／-Ura液中培养16h后,OD_(600)均值均为0.9±0.1。这表明重组质粒表达的融合蛋白没有激活LEU2和lacZ酵母报告基因表达的活性,电没有酵母毒性作用。结论：构建的诱饵重组质粒可以用于下一阶段的人胎脑cDNA文库筛选。

实习时期对神经内科实习生及带教老师满意度的调查分析

目的了解神经内科实习生基本情况及实习生、带教老师满意度情况,为下一步更好调整资源、改善带教方式、提高实习生效率提供参考。方法选择2021年1月—2022年1月在东莞市松山湖中心医院神经内科实习的46名五年制医学本科生和6名临床实习带教老师作为研究对象,采用问卷星问卷调查实习生基本情况及实习生、带教老师满意度情况,并对结果进行统计学分析。结果实习生在神经内科实习时,实习开始期(实习3个月内)占39.53%(17/43);实习前期(实习6个月内)占25.58%(11/43);实习中期(实习9个月内)占23.26%(10/43);实习结束期(实习12个月内)占11.63%(5/43)。带教老师对实习生的整体评价,非常满意占16.28%(7/43);满意占69.77%(30/43);一般占6.98%(3/43);不满意占6.98%(3/43)。实习时期与带教老师满意度评价差异有统计学意义(χ^(2)=15.0,P=0.002),实习时期与带教老师满意存在相关性(rs=0.453,P=0.002)。结论在实习开始期及实习早期安排优先安排来神经内科实习,将有助于提高带教老师对神经内科实习满意度。

氟桂利嗪致药源性帕金森综合征1例报告

目的:关注氟桂利嗪引起的锥体外系反应,提高药源性帕金森综合征的认识,提高老年人用药安全。方法:通过报道1例老年男性因头晕不适长期服用氟桂利嗪后出现震颤、运动迟缓等锥体外系反应,经完善相关检查检验,最终诊断为药源性帕金森综合征,经停药处理,好转出院。结果:该患者及时明确诊断,及时停药,症状好转顺利出院,随访至今年2月一直未出现锥体外系反应。结论:老年人使用氟桂利嗪容易出现锥体外系反应,临床上需警惕氟桂利嗪致药源性帕金森综合征的出现,及时发现,及时停药等处理,预后总体良好。

还原型谷胱甘肽对多巴胺能神经细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨1-甲基-4-苯基-吡啶盐(MPP^+)作用下,还原型谷胱甘肽(GSH)对MES 23.5多巴胺神经元细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法:CCK8法检测MES 23.5细胞存活率,细胞分为5组:对照组、MPP^+组、MPP^++L-Dopa组、MPP^++GSH组、MPP^++L-Dopa+GSH组。流式细胞术检测凋亡率及线粒体膜电位;通过DCFH-DA探针检测ROS含量;用比色法,检测MDA水平、CAT活性。结果:GSH可以抑制MPP^+所致的MES 23.5细胞存活率、△ψm及CAT活性水平降低,凋亡率、ROS含量及MDA水平升高(P<0.05);GSH与L-Dopa合用,这种抑制作用更明显(P<0.05)。结论:GSH与L-Dopa合用对MPP^+诱导的MES 23.5细胞氧化损伤有明显保护作用,机制可能与抑制细胞线粒体损伤及脂质过氧化,发挥抗氧化作用有关。

帕金森病患者冻结步态与执行功能障碍的研究

目的对帕金森病(PD)患者冻结步态(FOG)与执行功能障碍的关系做初步研究。方法收集2018年1月至2019年6月在东莞市松山湖中心医院神经内科就诊的原发性PD患者105例,男性51例,女性54例,年龄范围为51~78岁。记录患者临床信息和量表资料,采用冻结步态问卷(NFOG)、帕金森病评分量表第三部分(UPDRSⅢ)评分、39项PD调查表(PDQ39)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)对患者进行评估,分为PD伴FOG(FOG组)和不伴FOG(NFOG组),对两组患者的临床资料进行对比分析。结果入组的PD患者FOG发病率为41.9%(44/105)。FOG组44例,男性24例,女性20例,年龄65(61,71)岁,病程(6.0±2.7)年,UPDRSⅢ评分35(30,41)分,H-Y分期3(2.5±3.5),PDQ39评分为(29.39±10.12)分,MoCA为(17.11±4.48)分;NFOG组61例,男性27例,女性34例,年龄60(57,62)岁,病程(4.1±1.8)年,UPDRSⅢ评分24(21,30)分,H-Y分期2(1.5,2.5),PDQ39评分为(17.51±7.38)分,MoCA为(19.03±4.67)分;FOG组、NFOG组性别比较,差异无统计学意义(P>0.05);FOG组年龄较大,病程较长、H-Y分期较重、UPDRSⅢ、PDQ39评分较高,MoCA较低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。FOG组在执行功能方面评分较NFOG组低[(2.55±0.82)分比(2.95±0.94)分],差异有统计学意义(P<0.05)。结论年龄较大、病程较长、UPDRSⅢ与PDQ39评分较高及MoCA较低的PD患者易出现FOG;在认知功能改变方面,出现FOG的PD患者执行功能受累较重。

miR-223靶向RhoB抑制Aβ_(1-42)诱导的海马神经元凋亡

目的:探讨miR-223抑制β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导海马神经元凋亡的分子机制。方法:体外培养新生SD大鼠的海马神经元,随机分为空白组(不作任何转染处理)、阴性组(转染miR-NC)、miR-223-m组(转染miR-223 mimics)、miR-223-m+LV组(转染miR-223 mimics+慢病毒骨架)、miR-223-m+LV-RhoB组(转染miR-223 mimics+RhoB过表达载体)。qRT-PCR和Western blotting检测Aβ_(1-42)诱导的海马神经元中miR-223和RhoB的表达水平;MTT法检测不同浓度Aβ_(1-42)诱导海马神经元的存活率;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;双荧光素酶报告基因检测细胞的荧光活性。结果:Aβ_(1-42)可显著抑制海马神经元的存活率,且具有一定的剂量依赖性;同时其可导致海马神经元miR-223相对表达量下降,同时RhoB表达水平升高。选择30μmol·L^(-1) Aβ_(1-42)寡聚肽片段作用48 h用于后续分组实验。经流式细胞术检测,经Aβ_(1-42)30.0μmol·L^(-1)孵育48 h后,与空白组及阴性组相比,miR-223-m组细胞凋亡率降低;而与miR-223-m组及miR-223-m+LV组相比,miR-223-m+LV-RhoB组细胞凋亡率升高(P<0.05)。经Western blotting法检测,与空白组及阴性组相比,miR-223-m组细胞RhoB、Bax和caspase-3蛋白表达降低,同时Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);而与miR-223-m组及miR-223-m+LV组相比,miR-223-m+LV-RhoB组细胞RhoB、Bax和caspase-3蛋白表达升高,同时Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因分析结果显示,miR-223 mimics和野生型RhoB 3′UTR共转染后可抑制荧光素酶活性(P<0.05)。结论:miR-223可通过靶向RhoB抑制Aβ_(1-42)诱导的海马神经元细胞凋亡。

应用生物信息学方法筛选结直肠癌关键基因

目的 采用4个芯片数据集来挖掘结直肠癌差异基因,通过基因注释和蛋白相互作用网络构建找到关键基因。方法 下载GEO芯片数据GSE4398、GSE21815、GSE32323、GSE44076,筛选结直肠癌和正常组织间差异表达的基因,采用R3.4.4软件进行数据处理和分析,通过取交集获得候选的差异基因,通过Funrich软件进行基因功能分析,通过String和Cytoscape软件进行基因编码蛋白的相互作用分析。结果 通过差异基因分析并取4个GEO数据集的交集,一共获得430个差异表达基因,其中表达上调的基因277个,表达下调的基因153个。基因富集分析发现,表达上调的基因主要位于细胞核、细胞浆、微管、中心体和细胞外;主要参与纺锤体组装;主要参与调节趋化因子活性,在细胞周期、有丝分裂G1-G1/S期、M-M/G1期、G2/M期、DNA破坏关键节点及DNA复制等信号通路中富集。153个表达下调的基因主要富集在细胞外、参与代谢过程,发挥的分子功能主要是催化活性和配体依赖性核受体活性,下调基因没有富集在某条信号通路上。通过蛋白互作网络初步鉴定了CDK1、CCNB1、TOP2A、MAD2L1、TTK、BUB1B、AURKA、RRM2、UBE2C、ASPM等结直肠癌相关的关键基因。结论 通过基因芯片结合生物信息学方法,发现了结直肠癌相关的关键基因,有助于明确结直肠癌发病的分子机制,这些关键基因也可作为结直肠癌的治疗靶点。

励-协夫曼言语治疗对帕金森病构音障碍患者电声门图参数和言语功能的影响研究

目的研究励-协夫曼言语治疗(LSVT)应用于帕金森病(PD)构音障碍患者的语言康复效果。方法选择该院2019年2月至2022年2月收治的PD构音障碍患者84例作为研究对象,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组各42例,对照组接受常规言语康复训练,观察组接受LSVT,疗程均为4周。比较两组干预前后西方失语症成套测验(WAB)和失语商(AQ)评分,并比较两组基频微扰(jitter)、基频(F0)、振幅微扰(shimmer)、标准化噪声能量(NNE)、谐噪比(HNR)等电声门图参数差异。结果干预前,两组WAB各项(听语理解、复述、自发言语、命名)、AQ评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);干预后,两组上述评分均明显提高,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预前,两组元音“a”“i”“u”电声门参数jitter、F0、shimmer、NNE、HNR比较,差异均无统计学意义(P>0.05);干预后,两组上述电声门参数均较干预前明显改善,观察组元音“a”“i”“u”的jitter、NNE均低于对照组,HNR高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LSVT可改善PD构音障碍患者电声门图参数和言语功能,应用于PD构音障碍的语言康复效果明显。