利用CRISPR/Cas9技术构建Nedd4基因敲除BMDM巨噬细胞系

目的利用CRISPR/Cas9技术构建Nedd4基因敲除骨髓衍生巨噬细胞系(BMDM),为研究Nedd4在巨噬细胞中的作用和机制奠定基础。方法利用在线软件筛选了评分较高的3个针对Nedd4基因的单向导RNA(sgRNA),然后将合成的sgRNA序列插入到PX330质粒中;将重组质粒转入BMDM细胞,通过有限稀释法获取单克隆,采用Western印迹检测单克隆细胞中NEDD4蛋白水平;通过序列测定确认单克隆细胞的DNA序列。结果通过Western印迹检测获取1株NEDD4蛋白缺失的BMDM细胞;测序结果表明该细胞系中Nedd4基因发生了16bp的缺失突变。结论利用CRISPR/Cas9技术构建的Nedd4敲除BMDM细胞系将成为研究Nedd4在巨噬细胞中的功能和机制的有力工具。

小鼠脓毒症进程中IL-6的动态变化及其前期主要脏器损伤

目的探讨小鼠脓毒症进程中白细胞介素-6(IL-6)的动态变化及其前期主要脏器损伤。方法取7~8周C57雄性小鼠30只,按照数字表法随机分为对照组和脓毒症0、4、8、12、16 h组,每组5只。脓毒症各组小鼠首先用脂多糖(LPS)按照400μg/kg进行预处理8 h,然后继续使用LPS 10 mg/kg的剂量刺激小鼠,建立脓毒症小鼠模型。对照组仅给予1ml/kg的生理盐水尾静脉注射,不作其他处理。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定小鼠血清IL-6含量,并观察其浓度变化;同时取脓毒症模型小鼠肝、肾、心、肺、脾等脏器进行病理学组织切片,探究其发展进程中的病理学变化。结果0、4、8、12、16 h组脓毒症小鼠血清IL-6水平分别为[(239.7±21.5)、(1268.5±48.7)、(1836.8±67.4)、(2393.9±68.3)、(2989.5±84.7)]pg/ml,与对照组[(56.5±1.8)pg/ml]相比差异均有统计学意义(P<0.01);病理检查结果显示,在脓毒症早期,最先受损的脏器为肝脏、心脏,而肾脏、肺、脾脏影响较小。结论模型小鼠脓毒症病情越重,血清IL-6水平越高,且脏器中心脏、肝脏最先出现损伤。

2019冠状病毒病研究进展

2019年12月,湖北省武汉市暴发一场不明原因的肺炎疫情。面对此次疫情,我国迅速作出响应,鉴定病原为一种新型冠状病毒,并及时向世界卫生组织(WHO)通报。WHO将该新发传染病命名为2019冠状病毒病(COVID-19)。我国公共卫生、临床和科学界的快速反应促进了对这种疾病的初步了解。该文综述了COVID-19病原学、流行病学特征和相关临床表现的研究进展,探讨其流行趋势与防控对策。