林业种植技术及其应用探究

在林业建设中,各环节联系较为紧密,为实现林业健康发展,林木种植人员需要注重科学应用林业种植技术,及时找出其中存在的问题,同时对各类影响因素进行分析,科学地进行林业规划与种植。文章以总结林业种植主要技术要点为切入点,分析了林业种植技术及其应用中存在的问题,提出了应对策略,以期为相关人员提供参考。

蜜紫菀饮片标准汤剂制备及质量评价方法研究

目的:建立蜜紫菀饮片标准汤剂质量评价标准,为以蜜紫菀为原料的相关制剂质量标准制定提供参考。方法:收集14批蜜紫菀饮片,制备标准汤剂,测定蜜紫菀标准汤剂出膏率和pH值,并建立HPLC指纹图谱分析方法。结果:14批蜜紫菀标准汤剂出膏率范围为45.8%～61.4%;pH值范围为4.50～4.81;采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)"进行指纹图谱分析,相似度均大于0.899,确定12个共有峰,指认其中3个并对其进行简易定量分析,探讨适合标准汤剂定量的指标成分。结论:蜜紫菀标准汤剂研究可为以蜜紫菀为原料的相关制剂质量控制提供参考,因标准汤剂中紫菀酮转移率极低,可选择槲皮素等作为其定量指标成分。

软枣猕猴桃GDP-L-半乳糖磷酸酶电子克隆与生物信息学分析

目的:通过电子克隆技术对软枣猕猴桃GDP-L-半乳糖磷酸酶(GGP)基因进行预测。方法:以猕猴桃GGP序列为探针,基于NCBI中软枣猕猴桃的EST数据库和CAP3在线软件进行序列拼接,利用生物信息学数据库及相关软件对其结构和功能进行预测分析。结果:软枣猕猴桃GGP基因全长1866 bp,包含1353 bp的开放阅读框,编码450个氨基酸。结论:本研究为进一步解释基因的分子功能奠定理论及实验基础。

黄芪次生代谢研究进展

目的:黄芪为豆科植物,它的生物活性成分种类很多,且都有不同的药理作用。黄芪内生真菌的报道很少,所以对它的研究才刚刚开始。植物次生代谢网络复杂,利用诱导子提高植物特定代谢途径的次生代谢产物的产量,对生物合成途径进行调控。诱导子分为生物诱导子和非生物诱导子,而关于诱导子的作用机理,只有一个初步的假说,没有作用机理的指导,筛选也较盲目。为了消除试验的背景噪音,无土栽培方式在植物内生真菌及根际微生物研究中,消除了土壤菌群的影响。随着新学科的产生和新技术的发展,组学技术、新一代测序技术应运而生,并在各个领域得到广泛应用。

含挥发油饮片标准汤剂探讨研究--以紫苏叶为例

目的建立紫苏叶标准汤剂质量评价方法,为紫苏叶标准汤剂质量标准的制定提供参考数据。方法按照含挥发油类饮片标准汤剂制备要求,制备17批紫苏叶饮片标准汤剂,考察紫苏叶标准汤剂挥发油转移率、出膏率及pH值,并建立紫苏叶标准汤剂HPLC指纹图谱分析方法。结果紫苏叶标准汤剂的出膏率范围为14.50%-24.80%,挥发油转移率范围为62.50%-100.00%;pH值范围为4.70-5.25。17批紫苏叶标准汤剂指纹图谱相似度均大于0.8,其中共有峰7个,指认3个并对这3个峰进行初步定量分析,探讨适合紫苏叶标准汤剂的定量指标成分。结论建立的紫苏叶标准汤剂质量评价方法可为紫苏叶标准汤剂质量标准的制定提供参考数据。在紫苏叶标准汤剂中,除了计算挥发油的转移率,亦可同时将迷迭香酸等作为其定量指标成分。

黄芪中药种衣剂对黄芪部分生理指标的影响

黄芪为豆科植物膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge)或蒙古黄芪(A.membranaceus(Fisch.)Bunge var.mongholicus(Bunge)Hsiao)的干燥根。针对药用植物黄芪的农艺性状和栽培中遇到的主要问题,开发制备了黄芪专用型种衣剂,对黄芪种子进行包衣,通过田间试验,定期采样,对黄芪的根系活力、叶绿素质量分数、硝态氮、蛋白质、可溶性糖的质量分数进行测定,检验种衣剂对黄芪的这5种生理指标的影响。

454测序方法对人参种子内生真菌种类的研究

目的:研究人参内生真菌的生物多样性。方法:采用454测序技术对人参种子内生真菌进行分析。结果:测试的样品中,样品4与其他样品内生真菌区系差异较大,而其他四份样品之间存在的差异较小。子囊菌门真菌在人参种子内生真菌中占有绝对优势,平均百分比为32.7%;针对归类到属而言,共鉴定到属的种类为46个属,其中镰刀菌属序列数所占比列最大,为优势菌属。结论:人参种子中的内生真菌具有多样性,内生菌的分布在种子个体中也存在差异性。

基于网络药理学对黄芪六一汤治疗2型糖尿病机制预测研究

目的通过网络药理学方法,探究黄芪六一汤对2型糖尿病的作用机制。方法本实验以黄芪六一汤治疗糖尿病为指导,运用网络药理学方法对黄芪六一汤治疗糖尿病的主要有效分子进行预测。预测过程中收集化学结构数据、基因组学数据、蛋白组学数据、药理学数据。结果根据网络药理学预测发现,即黄芪六一汤对2型糖尿病治疗的主要有效分子共20个;黄芪六一汤可能直接或间接作用于线粒体以及细胞器膜,并通过与各种离子和物质相结合的方式影响跨膜和转运作用。可能参与了2型糖尿病的氧化磷酸化、脂类代谢、甾体激素合成代谢途径,也参与2型糖尿病引发的心肌收缩和由于神经系统变形或退化引起的帕金森病、阿尔茨海默病、亨廷顿舞蹈症等并发症。结论黄芪六一汤通过细胞间的物质转运,参与能量代谢而达到治疗2型糖尿病的目的。

黄芪多糖、皂苷、黄酮含量之间的相关性分析

目的:研究分析植物黄芪各部位有效成分间的相关性。方法:对膜荚黄芪植株根茎叶的折干率及主要药效活性成分多糖、黄酮、皂苷的含量进行了相关性和回归分析。结果:黄芪的黄酮、皂苷、多糖含量和黄芪植物的折干率有低度相关性;黄芪多糖含量在根茎叶之间,黄芪皂苷含量在茎和叶之间,黄芪黄酮含量在茎和根之间,黄芪的皂苷和黄酮含量在茎中,黄芪黄酮、皂苷和多糖含量在根中都具有统计学意义上的显著相关性和极显著的线性回归关系;在叶中,黄芪的黄酮、皂苷、多糖含量没有显著相关性。结论:黄芪初生代谢产物黄芪多糖和次生代谢产物黄芪黄酮、皂苷的累积具有相关性,各物质的含量在根茎叶间的分布也有一定的相关性,这符合植物代谢物质累积的规律。

黄芪转录组基因模型预测

目的:黄芪作为传统补气中药具有悠久历史,从黄芪中已经提取出多种有效成分。目前黄芪的基因组还未进行测序,因此基于转录组数据预测基因模型,将有助于黄芪在医药领域的广泛应用。方法:本文基于黄芪转录组数据以及已有的亲缘关系相近物种全基因组序列,对黄芪转录组的unigene在基因组中的情况进行预测分析。结果:预测结果表明,黄芪和大豆Glycine max、蒺藜苜蓿Medicago truncatula、百脉根Lotus japonicus 3种植物有较近的亲缘关系,和蒺藜苜蓿比对上的基因数目是2 039条,碱基相似度是90.14%;和大豆比对上的基因数是1 948条,碱基相似度是90.40%;和百脉根比对上的基因数是1 003条,碱基相似度是89.77%。结论:黄芪与3种植物比对上的基因在3种植物的各染色体上,以及染色体外基因组上均有分布。

高效液相色谱法测定不同种植方法及采摘日期的桔梗防风龙胆黄芩和北苍术的含量

目的测定不同种植方法及采摘日期的桔梗、防风、龙胆、黄芩和北苍术的含量。方法采用高效液相色谱法(HPLC)法,色谱柱为Ufavour(250 mm×4.6 mm,5μm)。检测桔梗的流动相为甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液(3∶25∶72),波长为204 nm;检测防风的流动相为甲醇-水(40∶60),波长为254 nm;检测龙胆的流动相为甲醇-水(25∶75);波长为270 nm;检测黄芩的流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2),波长为280 mn;检测北苍术的流动相为甲醇-水(79∶21),波长为340 mn。结果采摘于2015年8月27日的人工种植桔梗含量最高,其中桔梗皂苷D为0.22%;采摘于2015年10月7日的人工2年生防风1号含量最高,其中升麻素苷为0.43%,5-O-甲基维斯阿米醇苷为0.92%;人工种植的龙胆含量最高,其中龙胆苦苷为4.96%;采摘于2015年8月27日的2年生黄芩地下部分含量最高,其中黄芩苷为14.99%;苍术中苍术素含量为0.23%,低于《中国药典》标准。结论本研究采用的方法操作简便,测定结果准确可靠,为5种中药材的规范化种植及采摘奠定了基础。

不同生长环境对黄芪叶绿体超微结构的影响

选用蒙古黄芪(Astragalus membranaeus(Fisch)Bge.Var.Mongh-oicus(Bge)Hisao)和膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.)种子在不同的环境中进行种植,观察内生真菌、盐碱胁迫以及遮光处理对黄芪叶绿体超微结构的影响。结果表明:内生真菌处理组叶绿体和类囊体形态结构完整;盐碱胁迫处理组,蒙古黄芪叶绿体类囊体受损,基粒片层溶解,淀粉粒数量增多、直径增大。遮光处理组膜荚黄芪类囊体、基粒片层溶解,淀粉粒大量出现。蒙古黄芪栽培在透光率较低处,膜荚黄芪生长于盐碱处对其生长影响较小。黄芪栽培过程中,适当加以内生真菌菌液,有利于黄芪的生长。

外源影响因素对黄芪植株折干率的影响

目的:探究外源影响因素对黄芪植株折干率的影响。方法:利用正交试验设计,测定黄芪植株折干率,进行方差分析和外源影响因素因素影响的多重比较。结果:对根折干率影响的最佳处理组合是用土豆培养基溶液处理黄芪植株的地上部位或者地下部位12 d,对茎折干率影响的最佳处理组合是用硝酸银溶液处理黄芪植株地上部分或者地下部分12 d,对叶折干率影响的最佳处理组合是用硝酸银溶液处理黄芪植株地上部分或者地下部分9 d。结论:采用该试验和分析方法研究外源影响因素对黄芪植株折干率的影响具有可行性。

黄芪中药种衣剂的研制和理化性状测定

种衣剂相对药剂拌种具有低毒、环保、低成本的特性,研制黄芪专用种衣剂,可以更有效更绿色地预防黄芪在生产中的实际问题。本文根据种衣剂的组成,依次对润湿剂、分散剂、增稠剂、成膜剂、防冻剂进行了筛选,按照一定的配比,制成种衣剂,同时对其悬浮率、粘度、p H值、成膜时间、包衣均匀度等理化性状,逐一进行了测定,结果显示,黄芪中药种衣剂制备工艺简便,理化性状符合国家标准,具有绿色环保的优势。

膜荚黄芪多糖外源因素诱导组合的筛选

利用正交试验设计，以膜荚黄芪（ Astragalus membranaceus （ Fisch．））生物活性物质———黄芪多糖质量分数为衡量指标，筛选出最佳外界诱导因素组合。结果表明：影响叶、茎多糖质量分数的最佳处理时间是9d和6 d；影响根多糖质量分数的最佳处理时间是6 d。影响叶多糖质量分数的最佳处理组合是培养基处理地下部位9 d，影响茎多糖质量分数的最佳处理组合是硝酸银处理地下部位9 d，影响根多糖质量分数的最佳处理组合是培养基处理地上部位6d。黄芪多糖代谢途径的最佳外源诱导因素是硝酸银溶液，最佳处理部位是地下部分，最佳处理时间是6～9 d，最佳多糖质量分数变化检测部位是黄芪根部。

筛选调控黄芪次生代谢产物黄酮含量诱导子的研究

目的:使黄芪次生代谢途径能从正常的代谢背景中突出,并被捕捉到进行研究。方法:利用正交试验设计,以黄芪黄酮含量为衡量指标,对调控相应代谢途径的诱导子进行了筛选。结果与结论:正交试验结果表明,黄芪黄酮次生代谢途径最佳的诱导子是硝酸银溶液,最佳处理部位是地下部分,最佳处理时间是9天,最佳黄酮含量变化检测部位是叶片。

基于UPLC特征图谱的南、北葶苈子及其混伪品的鉴别研究

目的:研究并建立南葶苈子药材超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱,并对北葶苈子及混伪品进行对比研究。方法:采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);以乙腈-0.3%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254 nm;流速为0.30 mL·min^(–1);柱温为35℃。结果:建立了南葶苈子药材UPLC特征图谱共有模式,标定了12个共有峰,指认了其中7个,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰3)可区分南葶苈子和北葶苈子;芥子碱(峰2)可区分南葶苈子和菥蓂子;异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰6)可区分南葶苈子和荠菜子。结论:建立的UPLC特征图谱能有效区分南葶苈子、北葶苈子及其混伪品荠菜子、菥蓂子,为控制葶苈子药材质量提供了参考。

摆动叶片式发动机的研究探讨

针对目前主流形式的发动机存在的问题,提出一种新型摆动叶片式发动机的概念设计。通过摆动叶片将发动机分割为四个气缸,燃料在缸内燃烧,推动摆动叶片往复旋转,实现对外作功,为新型发动机的研究进行有益的探索。

基于聚合酶链式反应⁃限制性内切酶长度多态性方法鉴别鹿角(马鹿)药材及其配方颗粒

鹿角为鹿科马鹿Cervus elaphus或梅花鹿C.nippon已骨化的角或锯茸后翌年春季脱落的角基。目前市场上鹿角基原混杂,为快速准确地鉴别鹿角多基原及混伪品,研究通过比较马鹿、梅花鹿及其混伪品线粒体条形码Cytb基因序列差异,筛选获得鹿角的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计鹿角特异性鉴别引物dishmy⁃F及dishmy⁃R,分别采集鹿角及其混伪品,建立鹿角配方颗粒特异性PCR鉴别方法并优化PCR反应体系,对影响该方法重复性的Taq酶种类、PCR仪型号进行耐受性和适用性考察,再使用限制性内切酶MseⅠ对梅花鹿与马鹿的扩增产物进行酶切。结果显示,当退火温度为56℃,循环次数为35时,鹿角药材、标准汤剂及其配方颗粒经PCR反应及凝胶电泳后,马鹿可在近100 bp处观察到单一明亮的特异性鉴别条带,且马鹿的条带较梅花鹿短约60 bp,而其他混伪品如驼鹿、驯鹿、白尾鹿、黑尾鹿、狍子、白唇鹿等及阴性对照均无条带。该研究建立的PCR⁃RFLP方法可快速准确的鉴别出鹿角药材、标准汤剂和配方颗粒中的马鹿成分,并可区分梅花鹿和其他混伪品,同时为其他中药配方颗粒质量标准研究提供了理论依据。

黄芪六一汤对2型糖尿病治疗效果的转录组学研究

该实验采用Illumina测序平台对大鼠胰腺进行转录组测序,对靶点进行表达量统计,分析空白组、模型组、黄芪六一汤组三者之间的表达差异关系,探究黄芪六一汤对2型糖尿病的治疗效果,并探讨其作用机制。结果表明,通过eggNOG对基因进行分类分析,其中有24.25%的基因属未知功能类,为最大分类单元,其余依次为能量转换类、氨基酸转运和代谢类、核苷酸转运和代谢类、碳水化合物转运和代谢类、辅酶转运和代谢类、脂质转运和代谢类等;根据KEGG富集分析,黄芪六一汤可能在环境信息处理、细胞过程、生物系统、人类疾病这4类代谢通路上对2型糖尿病起到治疗作用。研究表明,黄芪六一汤能显著改善2型糖尿病大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白。