金银花源miR2911靶向PEDV基因区域分析

金银花源miR2911是一种丰度较高、性质稳定的抗病毒分子,在抗流感病毒感染和SARS-CoV-2感染中发挥着关键作用。然而,有关miR2911靶向PEDV基因区域的研究却鲜有报道。因此,本研究旨在分析miR2911靶向PEDV的基因区域,进一步分析miR2911靶点在不同流行毒株中的保守性。利用miRanda软件成功预测miR2911在PEDV基因组中存在多个靶点,靶向PEDV基因区域保守性很高。为后续深入研究miR2911在抗猪源病毒感染的机理提供了数据支撑。

兽医外科手术学课程思政改革与研究

兽医外科手术学是动物医学专业必修课,也是一门实践性和应用性较强的专业课程。古语曰,‘德为才之帅,才为德之资也’,课程思政是给当代大学生一味良药,课程思政的实施也将促进教师的思想水平不断提高。在新时期不但要注重知识和操作技能的掌握,更要通过挖掘课程中的思政元素,将思政元素与课程知识有机结合,提高学生思想认识水平和道德水平。也就是说,在培养兽医专业人才技能的同时,培养学生要重视医风医德、动物福利和伦理学及兽医法规等,通过对兽医专业思想升华,培养当代大学生懂得当今幸福生活来之不易,要抓住黄金时间刻苦学习,报效祖国,热爱祖国。本文初步挖掘了课程思政元素,为建设课程思政示范课做了重要贮备。

兽医外科手术学综合实验课程改革与研究

兽医外科手术学综合实验是动物医学专业必修课,也是一门实践性和应用性较强的专业课程。过程性考核具有考核内容全面、考核方式灵活、学习效果反馈及时等特点,已经逐步得到越来越多的认可和采用。在兽医外科手术学综合实验教学过程中采用过程性考核,对学生的综合能力的评价更全面、更科学,可以使学生对知识的掌握更全面和扎实,学习效果更佳。

动脉瘤性蛛网膜下腔出血潜在生物标记物的研究进展

动脉瘤性蛛网膜下腔出血是一种常见的神经系统急症,有着极高的致死率和致残率,目前对于动脉瘤性蛛网膜下腔出血的检查及预后评估主要通过影像手段如CT、CTA、MRA、DSA来实现,但是这些检查手段有着严格的适应症、禁忌症、潜在造影剂和辐射威胁,此外术后患者需进行长期随访,观察脑动脉瘤的生长及预后情况,部分患者受到医疗、经济等条件限制。因此,寻找快捷、实用、有效和经济的评估方法来检测动脉瘤性蛛网膜下腔出血的治疗效果和预后是非常有必要的。

金银花源miR2911基因靶向猪伪狂犬病毒基因区域分析与验证

金银花源miR2911是一种丰度较高、性质稳定的抗病毒分子,在抗流感病毒感染和SARS-CoV-2感染中发挥关键作用。然而,有关miR2911靶向猪伪狂犬病毒基因区域的研究鲜有报道。因此,本研究旨在分析miR2911靶向PRV的基因区域,进一步分析miR2911靶点在不同流行毒株中的保守性,以验证miR2911对靶向区域的结合作用。利用miRanda软件成功预测miR2911在猪伪狂犬病毒基因组中存在多个靶点,靶向猪伪狂犬病毒UL34基因区域保守性很高,利用报告基因系统证实miR2911可通过结合UL34靶向区域发挥抑制作用。这为后续深入研究miR2911在抗猪伪狂犬病的机理方面提供了重要支撑资料。

绵羊MSR1克隆及其序列分析

为了解绵羊巨噬细胞清道夫受体1(Macrophage Scavenger Receptor 1,MSR1)基因的生物学信息特征,本研究对绵羊MSR1进行了克隆鉴定,与其他物种的MSR1氨基酸序列进行比对、构建进化树,并进行生物信息分析,预测了MSR1的理化性质。结果显示:绵羊MSR1基因ORF区全长1362 bp,编码453个氨基酸,分子量约为50 kDa,构建了MSR1真核表达载体;绵羊MSR1与山羊、羚羊、马鹿、水牛、白鲸、猪、人、家兔、小鼠的同源性分别为98.90%、96.03%、93.16%、93.16%、81.28%、78.81%、74.17%、73.51%、63.77%,同属于牛科动物的序列同源性在90%以上,进化树上在同一分支;该蛋白分子式为C_(2188)H_(3473)N_(629)O_(680)S_(19),理论等电点为6.00,蛋白质性质为弱酸性,51~73号氨基酸为跨膜结构,有7个潜在的糖基化位点和多个磷酸化位点,存在2个棕榈酰化位点和5个乙酰化位点,169~180位氨基酸序列区域为优势抗原决定簇。研究结果为以后研究绵羊MSR1的功能奠定了基础。

猪TRIM32分子的克隆、表达及其功能分析

TRIM32作为TRIM家族中的一员,在宿主先天性免疫防御中起着重要的作用。然而,现今对猪TRIM32分子的研究鲜有报道。首先,利用RT-PCR从猪肺中扩增获得了猪TRIM32分子,并将其克隆入真核表达载体p3xFlag-CMV-14,构建重组真核表达载体pFlag-porTRIM32。随后,在Marc145细胞上利用过表达猪TRIM32,鉴定其在PRRSV感染中的作用。此外,为了进一步验证其在PRRSV感染中的作用,在沉默Marc145细胞中内源性TRIM32表达的情况下,检测了PRRSV的感染情况。结果显示:成功构建了pFlag-porTRIM32真核表达载体;Western blot的结果显示,Flag抗体能识别瞬时表达的融合蛋白Flag-porTRIM32;在Marc145细胞上过表达猪TRIM32分子,可显著地抑制PRRSV的复制;相反,在Marc145细胞上干扰TRIM32的表达,可明显增加PRRSV的复制。因此,我们的研究结果初步揭示了猪TRIM32分子具有抗PRRSV感染的作用,为进一步探究猪TRIM32抗HP-PRRSV感染的机制奠定基础。

绵羊肺炎支原体不同分离株的致病性比较

为研究不同绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)的致病性差异,筛选出致病性强的Mo菌株。通过间接免疫荧光技术检测不同Mo分离株(XJ15、XJ13、XJ22、1412、XJN)、标准株(Y98)对山羊气管上皮细胞(goat tracheal epithelial cells,GTEC)的黏附力强弱,将不同Mo菌株以109 CCU/mL浓度,0.2 mL/只,接种到7日龄SPF鸡胚的卵黄囊中,设阴性对照组和空白对照组,检测并观察Mo感染鸡胚致死率以及死亡鸡胚病理变化,记录鸡胚死亡时间,取死亡鸡胚的尿囊液进行PCR鉴定,同时对各个感染组的卵黄囊液进行PCR检测。结果显示,6株Mo均能黏附GTEC细胞,其中XJ15黏附力最强,XJN黏附力最弱。在鸡胚感染试验中,6株Mo均能引起鸡胚死亡,且不同Mo感染组鸡胚死亡数差异显著(P<0.05)。其中,XJ15感染组致死率为90%,1412和XJN感染组致死率为20%。感染组死亡鸡胚表面有出血,充血症状,尿囊液PCR检测均为阳性。表明,筛选出XJ15为致病性较强的Mo分离株,为后期Mo人工感染模型的建立奠定基础。

白花蛇舌草总黄酮对TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞EMT的逆转作用及其机制

目的探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对TGF-β1诱导肝癌细胞MHCC97-H上皮细胞间质转化(EMT)的逆转作用及其相关机制。方法用TGF-β1诱导MHCC97-H细胞建立EMT模型,再将其分为5组:正常对照组、TGF-β1组、TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组及TGF-β1+FOD+5-FU组,分别干预48h,Transwell侵袭小室法检测细胞体外侵袭能力,Western blot法检测各组细胞中E-cadherin、vimentin蛋白的表达。结果与正常细胞形态相比,TGF-β1诱导后细胞呈现明显的长梭形,且侵袭能力增强(P=0.02);给予药物处理后,TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组细胞的穿透能力较TGF-β1组减弱(P=0.03、P=0.02),且联合用药组减弱程度更加明显(P=0.01);Western blot结果显示,TGF-β1组细胞中E-cadherin蛋白表达显著降低(P=0.01),vimentin蛋白的表达显著增加(P=0.01),TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组E-cadherin蛋白表达有所上调(P=0.03、P=0.02),vimentin蛋白的表达有所下调(P=0.04、P=0.03),且联合组变化更为显著(P=0.01)。结论 FOD能够逆转TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞的上皮间质转化,其机制可能与其抑制TGF-β1诱导的E-cadherin蛋白下调及上皮细胞间质转化相关。

miR-135b促进肝癌细胞侵袭和转移

目的探讨miR-135b对肝癌细胞浸润转移的影响及其分子机制。方法分别在肝癌细胞系中过表达和下调miR-135b,通过Transwell^(TM)实验检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力,利用肝癌移植瘤模型检测肝癌细胞的体内增殖能力和成瘤能力;采用Western blot法结合双荧光素酶基因报告系统预测miR-135b的下游靶基因。结果 miR-135b在高侵袭性的MHCC97肝癌细胞系中高表达;过表达miR-135b能够增强HepG2和Bel-7402肝癌细胞的体外侵袭和转移能力,促进肝癌细胞的体内转移能力;通过靶向miR-135b的干扰载体pcDNA-miR-135b-Sponge下调miR-135b的表达,MHCC97肝癌细胞的体外侵袭转移能力及移植瘤的转移能力明显受到抑制;双荧光素酶基因报告系统和Western blot实验结果显示miR-135b能够靶向Hippo信号通路中的关键分子,包括大型肿瘤抑制因子同源蛋白2(LATS2)、含β转导素重复序列蛋白(β-TrCP)、N-myc下游调节基因2(NDR2)和亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZTS1)等。结论 miR-135b可能通过靶向Hippo信号通路相关基因促进肝癌细胞的侵袭和转移。

白花蛇舌草总黄酮对肝癌MHCC97-H细胞增殖的抑制作用

目的:观察白花蛇舌草总黄酮(FOD)对肝癌MHCC97-H细胞增殖和凋亡的影响。方法:将生长良好的细胞分为空白组、FOD组、5-FU组及联合组四组,分别干预48小时,观察细胞的形态,MTT法检测其对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测FOD对MHCC97-H肝癌细胞凋亡的影响。结果:FOD对肝癌MHCC97-H细胞有显著的抑制作用,并且具有剂量和时间依赖性,不但能使细胞密度减少,细胞变小,核固缩,而且能显著抑制人肝癌MHCC97-H细胞的增殖并诱导该细胞的凋亡(P<0.05)。结论:白花蛇舌草总黄酮能够通过抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡,明显抑制肝癌MHCC97-H细胞的增殖。

呼吸道综合征的猪肺中支气管败血波氏杆菌的分离、鉴定及特性分析

临床上猪呼吸道综合征(porcine respiratory disease complex,PRDC)大多为多种病原微生物共感染所致,支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)为PRDC的常见病原,但其在PRDC发生中的作用还不十分清楚。为了研究Bb在PRDC中的作用,本研究聚焦于PRDC的猪肺中Bb的分离、鉴定及特性分析。首先,利用16S rRNA基因序列对分离的细菌进行鉴定,结果从15头已鉴定为PRDC的猪肺中共获得5株Bb分离菌株。随后,对Bb相关毒力因子包括皮肤坏死毒素(dermonecrotic toxin,DNT)、百日咳杆菌粘附素(bordetellaad hesin,PRN)以及鞭毛蛋白(flagellin,fla B)进行PCR鉴定,结果发现所有分离株上述毒力因子都为阳性。最后,对Bb分离株进行18种抗生素的药敏实验,发现所有分离株对阿莫西林、头孢噻呋、链霉素、氨苄西林等8种药物高度耐药,而对卡那霉素、美罗培南以及庆大霉素高度敏感;此外,部分菌株对红霉素、氟苯尼考、强力霉素以及阿米卡星耐药。总之,本研究从PRDC的猪肺中分离到5株支气管败血波氏杆菌,这些分离株显示出不同的耐药特性,同时,分离株含有的与毒力相关的毒力因子,暗示了其致病特性。

金银花源miR2911靶向非洲猪瘟病毒基因区域分析

金银花源miR2911是一种高丰度、性质稳定的抗病毒分子,在抗流感病毒感染、SARS-CoV-2感染中具有一定效果。然而,对于miR2911靶向ASFV基因区域的研究却鲜有报道。由此,本研究旨在分析miR2911靶向ASFV的基因区域,从而进一步分析miR2911靶点在不同流行毒株中的保守性。利用miRanda软件成功预测了miR2911在ASFV基因组中存在的多个靶点,且靶向ASFV基因区域保守性很高。为后续深入研究miR2911在抗猪源病毒感染机理方面提供理论依据。

1-Wire总线驱动电路设计

针对1-Wire总线与主控制器直接连接时主控制器I/O端口驱动能力不足,限制传感器数量和传输距离的问题,设计了一种由线驱动器及与门电路组成的驱动电路。通过简单的程序设计,即可实现1-Wire总线数据的双向传输和驱动。该驱动电路在不增加单片机资源占用的情况下,可由一路1-Wire总线分离为多路独立的总线,并完全兼容于其协议标准,使1-Wire总线可驱动的传感器数量和传输距离有了极大的提高。本电路具有结构简单、易于扩展的特点,不仅可应用于由DS18B20组成的温度测量系统中,也适用于对其它1-Wire器件的驱动,对1-Wire总线系统的设计应用具有帮助和促进作用。

那屈肝素钙治疗急性脑梗死的前瞻性对照研究

对那屈肝素钙治疗急性脑梗死的临床疗效和安全性进行评价。方法 以2022年1月至2022年12月为时间节点,将此期间我院收治的30例急性脑梗死患者作为本次研究对象,按照治疗方式的不同将其分为对照组和观察组,每组15例。对照组仅使用阿司匹林肠溶片及银杏内酯治疗,观察组在对照组基础上加入那屈肝素钙进行治疗,对比两组治疗有效率。结果 观察组治疗有效率高于对照组(P<0.05)。结论 那屈肝素钙治疗急性脑梗死安全有效,值得推广应用。

双馈风机孤岛模式下恒压恒频运行控制策略

根据双馈发电机的数学模型,在强迫定向的定子磁场控制策略的基础上,改造DFIG励磁变频器控制策略,实现孤岛下双馈风机恒压恒频运行。技术思路:通过调节转子磁场旋转频率控制定子电压频率,调节转子磁通幅值控制电机内电势。控制转换开关,使得双馈风机孤岛下借助蓄电池进行起励,之后投入直流电容并退除蓄电池,实现双馈风机孤岛恒压恒频运行。并利用Matlab/Simulink对所提出的方案进行了仿真,结果表明该方案的可行性。

半导体温度传感器的应用研究

结构温度场的监测是结构健康监测的重要内容,然而对于混凝土结构内部的温度场监测,目前国内尚无理想的温度传感器。结合项目研究,开发了一种内埋式式半导体温度传感器。文中介绍了半导体温度传感器的测温工作原理,以及由ICL7136构成的温度测试仪的测试电路,并对具体型号的晶体管进行了温度灵敏度离散性测试,给出了克服晶体管温度灵敏度离散性的测试方法。实体测试表明,该温度传感器具有优异的性能,可以用于混凝土结构内部温度场的测试。

白花蛇舌草总黄酮对肝细胞癌干细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对Huh7来源的肝细胞癌干细胞增殖及凋亡的影响。方法培养Huh7细胞系,通过流式分选技术筛选出Huh7细胞系中CD133阳性的干细胞(CD133^(+)-Huh7);流式分析术检测分选后CD133阳性细胞比例;Western blotting实验检测分选纯化前后细胞干性指标Nanog、Oct4、Sox2的表达。分别用0、50、100、400μg/mL FOD分别作用CD133^(+)-Huh7肝细胞癌干细胞24、48、72、96 h,应用CCK8(Cell Counting Kit-8)法检测其对细胞增殖的影响;平板克隆实验检测各组细胞增殖能力变化;Annexin V-PE/7-AAD法检测各组细胞凋亡比例,并用Western blotting法检测p53、FAS-FADD、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax及凋亡指标Cleaved-Caspae3等凋亡通路蛋白的表达。结果纯化后的Huh7细胞的干性标志物Nanog、Oct4、Sox2表达更高。100μg/mL FOD刺激CD133^(+)-Huh7干细胞72 h,CCK8实验结果显示其细胞增殖较阴性对照组(0μg/mL处理组)降低(P<0.05),平板克隆实验亦显示其细胞增殖变弱;细胞凋亡比例较阴性对照组显著升高(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低而促凋亡蛋白Bax以及凋亡指标Cleaved-Caspae3的蛋白表达升高,p53、FAS、FADD通路显著上调。结论FOD可显著抑制CD133^(+)-Huh7肝细胞癌干细胞增殖,并显著促进细胞凋亡。

绵羊TNF-α基因启动子克隆、活性分析及转录因子预测

绵羊肺炎支原体感染诱导绵羊TNF-α上调表达的机制不明;据报道,TNF-α上调表达与其启动子激活密切相关。然而,绵羊TNF-α启动子尚未克隆,以及其启动子活性水平也不清楚。因此,通过对绵羊TNF-α启动子预测分析,以绵羊肺组织DNA为模板克隆TNF-α启动子,构建荧光素酶报告载体;进一步,利用双荧光素酶报告系统检测TNF-α启动子活性;最后,利用AliBaba 2.1软件预测TNF-α启动子上潜在的转录因子结合区域。结果显示,克隆的绵羊TNF-α启动子区域含有TATA-box元件,启动子具有很强的活性;绵羊TNF-α启动子中预测到9个潜在的转录因子结合区域,分别是6个Sp1、2个C/EBPalp和1个c-Jun。通过克隆绵羊TNF-α启动子、预测潜在的转录因子结合区域等,为进一步研究病原菌诱导绵羊TNF-α高水平表达的机理奠定了基础。

几种常用应变测试技术的比较分析

重点介绍了电阻应变片、差动式应变传感器及光纤(F-P)应变传感器的工作原理,并结合工程实例对电阻应变测试技术及光纤应变测试技术进行了分析研究。