肝豆状核变性患者离体皮肤成纤维细胞系的建立和生物学鉴定

肝豆状核变性(WD)的离体培养皮肤成纤维细胞模型可用于WD铜代谢的进一步研究,并有可能提供WD患者早期诊断的有效方法。作者建立了WD患者和对照组各5例的离体培养皮肤成纤维细胞系,并进行了各细胞系在不同代数培养时胞浆内铜含量的测定,为进一步研究该模型打下基础。

共济失调毛细血管扩张症的细胞遗传学研究

目的探讨共济失调毛细血管扩张症的细胞遗传学异常特点。方法收集来自３个家系本病患者６例，进行外周血淋巴细胞Ｇ显带分析。结果６例患者中４例有染色体异常，在该４例患者所分析的１２９个细胞中，４３个细胞有核型异常，累及１、７、１４、２、４、６、１１、１７号染色体的分别有１８、１８、１５、３、２、１、１、１个细胞；４３个异常核型细胞中，缺失、易位、染色体断裂、双着丝粒、倒位各有１９、１６、４、１、１个细胞。结论１号染色体与７号、１４号染色体一样，均是本病最不稳定的染色体。

肝豆状核变性的系列研究

肝豆状核变性（ＷＤ）是一种较为常见的常染色体隐性遗传、铜代谢障碍性疾病。作者从８０年代初开展ＷＤ的研究，至今已对ＷＤ的临床表现、发病机理、病理改变、遗传学、诊断、治疗等各方面进行了系统研究，研究手段从临床总结开始，接着开展生化、病理、影像学研究，进而采用细胞培养、分子生物学等新技术，紧紧围绕患者早期诊断和杂合子检测这个中心，层层深入，取得了很大进展，尤其是在ＷＤ离体培养皮肤成纤维细胞模型和分子生物学研究方面已达到国际先进水平。

铜孵育对肝豆状核变性离体培养皮肤成纤维细胞超微结构的影响

本实验研究不同浓度铜孵育、对肝豆状核变性(HLD)患者、杂合子离体培养皮肤成纤维细胞以观察其对超微结构的影响,初步探讨利用该模型研究HLD溶酶体缺陷的可能性,本实验结果提示HLD的溶酶体可能有摄铜的障碍或在HLD细胞的胞浆内可能存在与铜亲和力更高的化合物。

不同浓度铜孵育对肝豆状核变性离体培养细胞内铜含量的影响

本实验研究了不同浓度铜孵育对肝豆状核变性患者、杂合子及对照组离体培养皮肤成纤维细胞内铜含量的影响,发现经20μg/ml铜孵育12或24小时后,患者细胞浆内的铜/蛋白比值显著高于后两组(P<0.01),且与后两组完全无重叠,提示该方法可用于早期、临床表现不典型患者的诊断,并有可能成为症状前患者及产前诊断的有效方法。

锌孵育对肝豆状核变性离体培养细胞内铜、锌和金属硫蛋白代谢的影响

本实验研究了锌孵育后肝豆状核变性患者和杂合子离体培养皮肤成纤维细胞内铜、锌和金属硫蛋白（ＭＴ）代谢的改变，以及经４５．８８μｍｏｌ／Ｌ锌孵育后，患者胞浆内钢含量增高，同时ＭＴ上的钢结合量也增高，但ＭＴ含量无明显变化，根据上述结果，对锌剂治疗本病的作用机理进行了初步讨论。

肝豆状核变性皮肤成纤维细胞模型的研究

通过比较不同浓度铜孵育肝豆状核变性患者皮肤成纤维细胞内铜、金属硫蛋白代谢的改变，发现经高浓度铜孵育后，患者成纤维细胞胞浆内铜含量、金属硫蛋白含量及其铜结合量均明显增高，表明高铜孵育能促进本病遗传缺陷在皮肤成纤维细胞内进一步表达。认为，肝豆状核变性的离体培养皮肤成纤维细胞模型是一种较为理想的研究模型。

肝豆状核变性离体培养细胞内锌代谢的综合研究

目前国内外对肝豆状核变性（HLD）患者体内是否存在锌代谢异常有不同报道．本文系统地研究了HLD患者和杂合子离体培养皮肤成纤维细胞胞浆内的锌／蛋白比值、胞浆内锌在胞浆内不同分子量蛋白上的分布，以及不同浓度铜孵育对胞浆内锌在不同分子量蛋白上分布的影响，结果发现患者胞浆内锌／蛋白比值虽无显著性变化，但锌在胞浆中不同分子量蛋白上的分布有改变，主要表现在胞浆内金属硫蛋白的锌结合量增高，但在铜孵育早期即从原来的较高水平迅速下降，故推测HLD中的锌分布异常可能是铜代谢异常的继发改变。

肝豆状核变性培养细胞内铜、锌、金属硫蛋白代谢的综合研究

肝豆状核变性(HLD)是对我国青少年危害较大的神经系统遗传病.发病率国内远高于国外.本项目系统地研究了HLD患者、杂合子和对照组离体培养皮肤成纤维细胞内铜、锌、金属硫蛋白(MT)的代谢情况,在国内外首次取得了下述几个主要结果: 1.对各细胞系进行了生物学鉴定,

P型ATP酶阻滞剂和激动剂对肝豆状核变性成纤维细胞胞浆铜的影响

探讨P型ATP酶阻滞剂、激动剂对肝豆状核变性患儿离体培养皮肤成纤维细胞胞浆铜含量的影响。方法采用高浓度铜及P型AFP酶阻滞剂（矾酸钠）、激动剂（长春新碱）孵育细胞，分析孵育6、12、24小时后，肝豆状核变性患儿、杂合子及正常儿童成纤维细胞胞浆中铜含量的变化。结果铜及长春新碱孵育后，患儿成纤维细胞胞浆钢水平在各时点均高于杂合子及正常儿童。铜及矾酸钠孵育后，患儿、杂合子及正常儿童胞浆铜含量在各时点均明显少于其他条件孵育后。结论患儿钢转运P型ATP酶对P型ATP酶阻滞剂的敏感性与杂合子及正常儿童相同，对激动剂的敏感性异常。P型ATP酶能减少患儿成纤维细胞对铜的摄取，在肝豆状核变性的治疗方面有一定的提示意义。

肝豆状核变性患者及杂合子离体培养皮肤成纤维细胞内锌代谢的研究

本文采用原子吸收分光光度法对12例HLD患者、10例杂合子、16例对照者的离体培养皮肤成纤维细胞内锌的含量进行了测定。结果显示,三者之间细胞内锌的含量无显著差异(P均>0.5)。这一结果提示,HLD患者体内锌代谢的改变可能是一种继发性的改变,而不是本病原发性的代谢障碍。这对研究锌在HLD发病机制中的作用以及指导锌剂在治疗本病上的应用均有重要意义。

先天愚型红细胞膜酶活性的研究

测定３２例先天愚型（ＤＳ）红细胞膜（Ｎａ、Ｋ）－ＡＴＰ酶、（Ｃａ、Ｍｇ）－ＡＴＰ酶活性及７例ＤＳ患者三磷酸甘油醛脱氢酶（Ｇ３ＰＤ）活性，结果发现：ＤＳ红细胞膜（Ｎａ、Ｋ）－ＡＴＰ酶、（Ｃａ、Ｍｇ）－ＡＴＰ酶活性与正常对照组无显著性差异，Ｇ３ＰＤ活性明显高于对照组，差别具有显著性，提示先天愚型红细胞膜存在能量代谢的异常。

肝豆状核变性患者及杂合子离体培养皮肤成纤维细胞内铜含量测定

本文对12例肝豆状核变性患者、10例杂合子和16例对照者的离体培养皮肤成纤维细胞内铜含量进行了测定。结果,HLD患者培养细胞内钢含量的平均值为对照者的2.7倍,且二者之间无重叠,故可作为HLD早期诊断的依据。杂合子培养细胞内铜含量介于患者与对照者之间,其测定值与患者有部分重叠,与对照者无重叠。提示,可作为筛选杂合子的手段,但难以鉴别症状前患者与杂合子。

先天愚型红细胞膜乙酰胆碱酯酶活性和唾液酸含量的研究

研究32例先天愚型红细胞膜乙酰胆碱酯酶活性和唾液酸含量,结果显示病人此两种物质的活性和含量明显下降,且乙酰胆碱酯酶活性与唾液酸含量的下降呈明显正相关,认为这种紊乱对先天愚型智力低下和神经肌肉系统异常有一定的影响。

肝豆状核变性离体培养细胞内金属硫蛋白代射的研究

测定了一般培养条件下以及经各种浓度铜孵育后肝豆状核变性（ＨＬＤ）患者，杂合子的离体培养皮肤成纤维细胞内金属硫蛋白（ＭＴ）含量的变化。发现，一般培养条件下，三组间ＭＴ含量无显著性差异，但经高浓度铜孵育后，患者ＭＴ的含量明显比另二组高。讨论了ＭＴ异常在ＨＬＤ发病机理中的重要作用。

多巴反应性肌张力障碍七例报告

目的加强对多巴反应性肌张力障碍的认识和重视。方法描述我院收治的来自５个家庭７例患者的临床表现、辅助检查及治疗情况。结果男１例，女６例，其中４例为２对姐妹。发病年龄３个月至８岁，平均３１岁，治疗前平均病程１２３年，均表现为缓慢起病的四肢僵硬、活动困难，部分患者伴有肢体震颤、构音不清、吞咽困难，症状均呈晨轻暮重。体检：均有四肢肌张力铅管样或齿轮样增高，多以左侧明显，双下肢腱反射活跃至亢进，部分患者病理征阳性，病程长者可有脊柱和足部畸形。辅助检查除部分患者血清酶增高外，头颅ＣＴ、ＭＲＩ、单光子发射断层扫描、神经电生理检查均正常。小剂量多巴制剂对７例患者均有明显疗效，左旋多巴平均剂量为８４８ｍｇ／ｄ（美多巴或帕金宁控释片），使用最长者已达１５年，无需增大剂量。结论本病是一种较为罕见的遗传性运动障碍疾病，临床诊断不难，小剂量多巴制剂有显著、持续疗效，早期治疗效果好。

高铜孵育后皮肤成纤维细胞内铜含量的测定诊断肝豆状核变性

高铜孵育后皮肤成纤维细胞内铜含量的测定诊断肝豆状核变性梁秀龄，陈嵘，刘焯霖，陈彪，张影如肝豆状核变性（ＨＬＤ）是一种较为常见的常染色体隐性遗传性铜代谢障碍疾病。本实验研究高浓度铜孵育后ＨＬＤ患者皮肤成纤维细胞内铜含量的变化，以寻找能有效进行ＨＬＤ患者...

肝豆状核变性培养细胞内铜分布的研究

通过确定肝豆状核变性培养细胞内铜在各亚细胞组分以及胞浆内不同分子量蛋白上的分布，以探讨本病的发病机理。方法测定肝豆状核变性患者、杂合子及对照组离体培养皮肤成纤维细胞的细胞浆、线粒体、溶酶体、微粒体和细胞浆的铜分布比例，并分析胞浆经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶层析后铜在不同分子量蛋白上的分布特点。结果２例患者分别有胞浆铜和溶酶体铜比例增高；患者胞浆内金属硫蛋白的含铜量明显高于对照组和杂合子。结论肝豆状核变性培养细胞内的铜异常沉积与金属硫蛋白密切相关，后者可能致本病的基本病理生理异常。

肝豆状核变性皮肤成纤维细胞模型的研究

通过比较不同浓度铜孵育后肝豆状核变性(HLD)患者皮肤成纤维细胞内铜、金属硫蛋白(MT)代谢的改变,发现经高浓度铜孵育后,患者胞浆内铜含量、MT含量及其铜结合量均明显增高,表明高铜孵育能促进本病遗传缺陷在皮肤成纤维细胞内进一步表达。我们认为,HLD的离体培养皮肤成纤维细胞模型是一种较为理想的研究模型。