重组鼠过氧化物还原酶-5体内抗胰腺癌作用研究

目的:探讨鼠源重组过氧化物还原酶-5(mPRDX5)在小鼠体内是否具有抗肿瘤活性,从而进一步确证PRDX5的抗肿瘤活性和作用机制。方法:通过体外异源表达和纯化获得高纯度的mPRDX5。小鼠左侧腋背部皮下接种胰腺癌Pan02细胞建立荷瘤小鼠模型。小鼠随机分为PBS(溶剂对照)组、GEM(吉西他滨)50.0 mg/kg组和mPRDX510.0 mg/kg组,每组10只,检测小鼠肿瘤相关指标。结果:与PBS组比较,GEM组荷瘤小鼠体质量降低明显,mPRDX5组小鼠体质量有一定程度的增加。PBS组肿瘤生长良好,根据肿瘤体积计算,与PBS组相比,GEM组、mPRDX510.0 mg/kg组在D7肿瘤生长抑制率分别为87.07%和52.82%;按瘤重计算,与PBS组相比,GEM组、mPRDX510.0 mg/kg组在D7肿瘤生长抑制率分别为95.39%和48.33%。对PBS组和mPRDX5组小鼠肿瘤组织中的巨噬细胞极化状态进行分析,发现相较于PBS组,mPRDX5组小鼠肿瘤组织中表达CD86的M1型巨噬细胞显著增加,而表达CD206的M2型巨噬细胞显著减少。结论:mPRDX5在小鼠体内具有显著的抗胰腺癌活性,且活性的发挥是通过促进肿瘤微环境中的巨噬细胞向M1型极化实现。

TREM2在肝细胞癌中的表达与预后、免疫浸润及药物敏感性的分析

目的 基于生物信息学的方法分析肝细胞癌患者中髓系细胞触发受体2(TREM2)基因表达水平与预后、免疫微环境及化疗药物敏感性的关联。方法 基于癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达综合数据库(GEO)和国际癌症基因组联合体(ICGC)数据库分析TREM2在肝细胞癌组织中的表达差异;分析TREM2高、低表达组与肝细胞癌生存预后及免疫浸润的相关性;然后对TREM2进行GO和KEGG、突变和药物敏感性分析。结果 TREM2在肿瘤组织中的表达水平明显高于正常组织(P <0.001);TREM2高表达组患者的总生存率(OS)显著低于低表达组(P <0.05)。突变分析发现TP53基因在TREM2高表达组具有更高的突变频率。免疫分析结果表明TREM2的表达与肝细胞癌基质评分(r=0.36,P <0.001)、免疫评分(r=0.55,P <0.001)和ESTIMATE评分(r=0.50,P <0.001)成正相关;与调节性T细胞(Tregs)、M2型巨噬细胞的免疫浸润水平成正相关(P <0.001)。KEGG和GO富集分析显示,TREM2基因在细胞吞噬、肝癌细胞转移、免疫逃逸、炎症反应等生物学过程通路上高度富集。药物敏感性分析发现,TREM2高表达组有较高敏感性的药物有索拉非尼、帕博利珠单抗、西罗莫司、硼替佐米和拉帕替尼(P <0.05)。结论 TREM2高表达的患者预后较差,且与免疫细胞浸润、肿瘤微环境有关,并有望成为肝细胞癌治疗的新靶点。

河北道地药材酸枣仁HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的建立河北道地药材酸枣仁的HPLC-ELSD指纹图谱,为科学评价及有效控制酸枣仁药材质量提供新方法。方法收集不同产地酸枣仁药材21批,采用HPLC-ELSD法测定其指纹图谱。色谱条件:C18柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,ELSD检测器,体积流量1.0mL/min,柱温35℃。结果建立了道地酸枣仁药材HPLC-ELSD指纹图谱共有模式,并对不同产地酸枣仁药材进行了相似度比较。结论方法简便、可靠,可用于不同产地酸枣仁药材的指纹图谱测定和质量评价,为有效控制酸枣仁药材的内在质量提供依据。

河北道地药材知母HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的:建立河北道地药材知母的 HPLC-ELSD 指纹图谱分析方法,并与不同产地知母药材指纹特征相比较,为科学评价与有效控制知母药材质量提供新方法。方法:采用 HPLC-ELSD 法测定了道地知母等19个不同来源的知母样品。色谱条件:Diamonsil^(TM) C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱:0～20 min,23%A;25 min,31%A;35 min,33%A;55 min,48%A;60 min,48%A;65 min,23%A。ELSD 检测器,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃。结果:建立了知母 HPLC-ELSD 指纹图谱共有模式,并对不同产地知母药材进行了相似度比较。结论:方法简便、可靠,为全面有效控制知母药材的内在质量提供了依据。

河北道地药材酸枣仁HPLC-UV指纹图谱研究

目的:HPLC-UV指纹图谱,为科学评价与有效控制酸枣仁药材质量提供新方法。方法:收集14个产地酸枣仁药材21批,采用HPLC-UV法测定其指纹图谱。色谱条件:C18柱,乙腈-0.1磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长203nm,流速1.0mL/min,柱温35°C。结果:建立了河北道地酸枣仁药材HPLC-UV指纹图谱共有模式,并对不同产地酸枣仁药材进行了相似度比较。结论:本法简便准确、结论可靠,可用于不同产地酸枣仁药材的指纹图谱测定和质量评价,为有效控制酸枣仁药材的内在质量提供了实验依据。

河北道地药材酸枣仁脂肪油GC-MS指纹图谱研究

目的建立河北道地药材酸枣仁的气象质谱色谱连用（gaschromatograph mass spectrometer，GC-MS）指纹图谱，为科学评价及有效控制酸枣仁药材质量提供新方法。方法收集不同产地酸枣仁药材21批，采用GC-MS法测定其指纹图谱。色谱柱，HP-5柱（50m×250／Lm×0．25μm）；柱温50℃，以10℃／min升至160℃，保持5min；再以6℃／min升至250℃。流速0．70mL／min，分流比为30：1，进样口温度250℃，进样量1μL。质谱条件，电离方式为电子电离，离子源温度230℃，电子能量70eV；采集方式，全谱扫描，扫描质量范围0～800mAU；载气为He。结果建立了道地药材酸枣仁GC-MS指纹图谱共有模式，并对不同产地酸枣仁药材进行了相似度比较。分析鉴定了8种脂肪油成分，分别计算了相对百分含量。结论方法简便、可靠，可用于不同产地酸枣仁药材的指纹图谱测定和质量评价，为有效控制酸枣仁药材的内在质量提供依据。

枸杞子多肽的分离纯化及其组分1对HT29细胞的作用

目的分离纯化枸杞子多肽(PFL),探讨其组分1(PFL-1)对HT29细胞的作用。方法应用SpherisorC18色谱柱和乙腈溶液组成的HPLC色谱系统,检测波长214nm,对枸杞子多肽(PFL)进行分离,并对此多肽的各组分进行分峰收集;对所收集的各组分进行纯度分析。用MTT比色法测定了不同剂量的PFL-1对HT29细胞的抑制率。结果由PFL可分得三种组分,分别命名为PFL-1、PFL-2、PFL-3;PFL-1可使HT29细胞增值减弱,并与浓度呈正相关。结论PFL由三种成分组成,PFL-1对HT29细胞有抑制作用。

应用HPCE对蒙古黄芪多肽的定性分析

目的:应用HPCE对由蒙古黄芪中获得的多肽进行分析。方法:用传统的多肽提取方法从蒙古黄芪中提取多肽;经毛细管等电聚焦电泳(CIEF)的方法测定其组成及各组分的等电点;结果:应用传统的提取多肽的方法,可由蒙古黄芪中获得淡黄色多肽液体:毛细管等电聚焦电泳测得其由两种成分组成,其等点分别为8.23、4.26。结论:由蒙古黄芪中获得的多肽是由等电点不同的两种成分组成。

不同产地柴胡药材GC-MS指纹图谱研究

目的对不同产地柴胡药材的挥发油成分进行GC—MS指纹图谱比较研究。方法利用GC色谱指纹图谱的方法，以道地产区河北省主产的7批北柴胡药材为基准，对比不同产地柴胡药材的色谱指纹图谱。色谱条件：HP-1非极性柱，进样口温度250℃，检测器（FID）温度270℃，程序升温50-270℃，体积流量为0．9mL／min，分流比为10：1。质谱条件：电离方式为EI，离子源温度300℃，电子能量70eV。结果从7批道地产区柴胡药材挥发油GC指纹图谱中提取19个共有峰，用质谱分析鉴定出其成分，并对不同产地药材进行相似度的比较。结论柴胡挥发油气相色谱指纹图谱中各成分均得到了较好的分离，可作为柴胡药材质量评价的专属性的指纹图谱，并以此评价不同产地柴胡的品质。

河北道地药材北柴胡HPLC-UV指纹图谱研究

目的:建立河北道地药材北柴胡的HPLC-UV指纹图谱分析方法,并与不同产地柴胡药材指纹特征相比较,为科学评价与有效控制柴胡质量提供新方法。方法:采用HPLC-UV法测定了道地北柴胡等21个不同来源的柴胡样品。色谱条件:C18柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长203 nm,流速1.0 m l/m in,柱温30℃。结果:建立了北柴胡HPLC-UV指纹图谱共有模式,并对不同产地柴胡药材进行了相似度比较。结论:色谱指纹图谱分析法能简便、快速鉴别和区分不同来源的柴胡药材,为全面控制柴胡药材的质量提供了依据。

河北道地药材北柴胡HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的:建立河北道地药材北柴胡的 HPLC-ELSD 指纹图谱分析方法,以提高柴胡药材质量标准。方法:采用 HPLC-ELSD 法测定了道地北柴胡等21个不同来源的柴胡样品。色谱条件:C_(18)柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,ELSD 检测器,流速1.0mL·min^(-1),柱温30℃。结果:建立了北柴胡 HPLC-ELSD 指纹图谱共有模式,并对不同产地柴胡药材进行了相似度比较。结论:色谱指纹图谱分析法能简便、快速地鉴别和区分不同来源的柴胡药材,为全面控制柴胡药材的质量提供了依据。

河北道地药材黄芩指纹图谱的研究

目的:建立河北道地药材热河黄芩的 HPLC 指纹图谱,得到对照图谱,并与不同产地黄芩药材指纹特征相比较,为科学评价与有效控制黄芩质量提供新方法。方法:采用 HPLC 法测定了热河黄芩等26个不同产地黄芩样品。色谱条件:C^(18)柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.25%磷酸溶液-四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱,检测波长274nm,流速1mL·min^(-1),柱温30℃。结果:建立了 HPLC 指纹图谱共有模式,并对不同产地药材进行了相似度比较。结论:色谱指纹图谱分析法能简便、快速地鉴别和区分不同来源的黄芩药材,为全面控制黄芩药材的质量提供了依据。

诺卡菌属菌株04-5195发酵液中活性成分04-5195A的分离、纯化与结构鉴定

目的分离、纯化与鉴定诺卡菌属菌株04-5195发酵液中的活性成分。方法采用多种层析方法进行活性成分分离,并通过FAB-MS、1H-NMR和13C-NMR测定对其结构进行鉴定。结果分离到一个主要组分04-5195A,其结构鉴定为3,4-二氢-8-羟基异香豆素衍生物。结论主要组分04-5195A与文献的报道的amicoumacin B相同。

山羊脾脏多肽的分离纯化

目的:分离纯化由山羊脾脏中获得的多肽。方法:用传统方法从山羊脾脏中提取多肽,应用 Sphefisor C_(18)色谱柱和乙腈溶液组成的 HPLC 色谱系统,检测波长214 nm,对山羊脾多肽进行分离,并对此多肽的各组分进行分离峰收集;对所收集的各组分进行纯度分析。结果:由上述色谱系统可分得3种组分,分别命名为 PGS-1、PGS-2、PGS-3。结论:由山羊脾脏中获得的多肽是由疏水性不同的3种成分组成的物质。

山羊脾脏来源多肽MALDI-TOF-MS定性分析

多肽类化合物广泛存在于自然界中,可作为药物、疫苗、导向药物、诊断试剂、酶抑制剂及药物先导化合物等[1～2].脾脏是哺乳动物最大的外周淋巴器官,产生多种生物活性物质,这些生物活性物质具有分子量小、结构相对简单、免疫原性小等特点.本实验应用MALDI-TOF-MS对经前期诱导后山羊脾脏中获得的多肽进行分析,为此种多肽的开发提供依据.

大鼠血浆中五味子乙素浓度的HPLC测定法

①目的建立测定大鼠血浆中五味子乙素浓度的HPLC方法。②方法采用乙腈沉淀血浆蛋白。HPLC的条件为：反相C18（4.6mm×150mm,5μm）色谱柱分离样品,以乙腈-水（78：22）为流动相,流速1.0mL/min,检测波长224nm,柱温23℃。③结果所建立方法在（0.50~50.0）μg/mL范围内线性关系良好（r=0.9975）;平均回收率介于92.60%~103.90%,日内、日间相对标准偏差介于8.17%~12.50%。④结论所用方法简便,准确可靠,适用于五味子乙素大鼠血药浓度测定。

Amicoumacin B对MG63细胞bmp-2转录及蛋白表达作用的研究

目的研究amicoumacin B(04-5195A)对骨形态形成蛋白因子Ⅱ(BMP-2)的作用。方法采用RT-PCR技术,考察amicoumacin B对人骨肉瘤MG63细胞bmp-2基因转录的影响;应用流式细胞分析技术研究amicoumacin B对MG63细胞BMP-2蛋白表达水平的影响。结果与未给药组相比,amicoumacin B给药组MG63细胞的bmp-2基因mRNA水平和BMP-2蛋白水平均呈现明显升高。结论首次证明amicoumacin B有上调bmp-2基因表达的作用。