2型糖尿病老年患者血清尿酸水平与糖尿病视网膜病变发生及进展的关系

目的:探究老年2型糖尿病(T2DM)患者血清尿酸(SUA)水平与糖尿病视网膜病变(DR)发生及进展的关系。方法:回顾性分析300例T2DM患者的临床资料,将其中100例T2DM伴DR且SUA>420μmol/L(高尿酸血症)的患者设为HUDR组;将100例T2DM伴DR且SUA≤420μmol/L(无高尿酸血症)的患者设为DR组;将100例T2DM不伴DR患者设为T2DM组,比较各组SUA、血管内皮生长因子(VEGF)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平;比较HUDR组和DR组DR分期构成。Logistic回归分析不同SUA水平对DR发生的影响。结果:各组SUA、VEGF及hs-CRP水平比较:HUDR组>DR组>T2DM组(P<0.05)。DR组与HUDR组DR分期差异有统计学意义(P<0.05)。将患者SUA水平按四分位数分组,纳入Logistic回归方程,结果显示,SUA≤221μmol/L不是DR发生的危险因素,SUA>221μmol/L时开始对DR的发生有影响,且SUA水平越高,影响程度越大[221μmol/L≤SUA<350μmol/L(OR=2.069,95%CI:1.492~3.559)、350μmol/L≤SUA<438μmol/L(OR=3.270,95%CI:1.908~5.173)、SUA≥438μmol/L(OR=3.802,95%CI:2.163~7.091)]。结论:T2DM伴DR患者SUA水平高于T2DM不伴DR患者,SUA水平升高是DR发生的独立危险因素,也是导致DR进展的重要原因。

文本挖掘非酒精性脂肪性肝病中医证候及用药规律

目的:应用课题组成熟的文本挖掘方法,从中国生物医学文献数据库(SinoMed)中挖掘非酒精脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的中医证候特点及用药规律。方法:应用课题组自行研发的文本提取工具,依照文本数据采集、数据格式转化及建库、数据挖掘及分析、数据可视化呈现4个步骤对非酒精性脂肪性肝病相关文本信息进行分析处理。结果:非酒精性脂肪性肝病的核心证型为肝气郁结、痰瘀互结、湿热内蕴、肝郁脾虚和肝肾阴虚。干预非酒精性脂肪性肝病的核心药物有丹参、山楂、泽泻、柴胡、白术、何首乌和郁金,核心方剂包括膈下逐瘀汤、四逆散、柴胡疏肝散和二陈汤。结论:该研究从生物信息学角度初步阐明了非酒精脂肪性肝病的中医证候特点和中药使用规律,为该病的临床诊治及新药研发提供了可操作的技术平台。

p27-CyclinD1/CDK4-Rb蛋白在不同类型甲状腺肿瘤组织中的表达及临床意义

目的:探讨细胞周期调控基因蛋白p27、CyclinD1、CDK4、Rb在不同类型甲状腺肿瘤组织中的变化,为甲状腺肿瘤的发生学以及临床诊断提供参考。方法:应用流式细胞术和免疫荧光技术对甲状腺乳头状癌(40例)、甲状腺腺瘤(16例)、结节性甲状腺肿(21例)、正常甲状腺组织(10例)的CyclinD1、CDK4、p27、Rb基因蛋白的表达进行定量检测。结果:CyclinD1和CDK4基因蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达量显著高于其它三组(P<0.01),而后三组间差异无显著性(P>0.05);p27基因蛋白在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和甲状腺乳头状癌表达量依次减少,均低于正常甲状腺组织(P<0.05);Rb基因蛋白的表达量在正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、甲状腺乳头状癌中依次减少,但各组间无显著性差异(P>0.05)。结论:CyclinD1/CDK4高表达、p27低表达在甲状腺乳头状癌的发生中起着重要的作用,而Rb基因在甲状腺乳头状癌的发生中可能不起主要作用。

小檗碱对胆碱-蛋氨酸缺乏饮食诱导非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝组织巨噬细胞表型转化的调节作用

目的观察小檗碱对胆碱-蛋氨酸缺乏(MCD)饮食诱导非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型小鼠肝组织巨噬细胞M1、M2表型转化的作用。方法雄性C57BL/6小鼠40只随机分为4组(每组10只):正常组(饲喂常规饲料),模型组(饲喂MCD饲料),罗格列酮干预组(30mg/kg)和小檗碱干预组(150mg/kg),采用预防给药方式,连续2周。通过组织病理学评分评估动物模型及药物疗效;采用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-6)及IL-10水平;流式细胞术检测肝组织中M1、M2型巨噬细胞的数量和比值。结果罗格列酮和小檗碱可显著改善MCD饮食诱导小鼠NASH的病理程度,显著下调血清中TNF-α水平(P<0.05),显著上调血清中IL-10水平(P<0.05),显著降低肝组织中M1型巨噬细胞及增加M2型巨噬细胞的数量,降低M1/M2比值(P<0.01)。结论小檗碱对MCD饮食诱导小鼠NASH有较好改善作用,其部分药理机制为:调节肝组织中巨噬细胞表型转化,增加M2型巨噬细胞比例,上调抗炎细胞因子的分泌。

自体骨髓干细胞移植配合针灸治疗糖尿病周围神经病变患者24例双下肢神经电生理的变化

目的:观察2型糖尿病并发周围神经病变患者自体骨髓干细胞移植配合针灸治疗后,双下肢胫神经与腓总神经的电生理变化。方法:①选取河北医科大学唐山临床医学院2005-01/2006-12收治住院的确诊为糖尿病足或糖尿病下肢动脉闭塞症同时并发糖尿病周围神经病变的24例患者,男16例,女8例,平均年龄(56.8±6.1)岁,平均病程(12.6±3.6)年,均无严重的心、肾、肝、肺病变,对本实验知情同意。随机数字表法分为干细胞组、针灸组、干细胞+针灸组,8例/组。②局麻下由双侧髂后上棘采集每位患者的骨髓血200～300mL,应用密度梯度离心分离骨髓血中单个核细胞,镜下计数单个核细胞总数约为1.1×1012L-1,用生理盐水稀释成30mL干细胞悬液。③干细胞组给予单纯自体骨髓干细胞移植治疗,在硬膜外麻醉下将干细胞混悬液沿闭塞血管两侧多点肌肉注射到患者下肢,进针深度约1.4cm,相邻两点间的距离及与闭塞血管间距离均为1.5cm,每点注射0.8～1.0mL,注射时避开血管与神经。针灸组给予单纯针灸治疗,用普通手法针刺足三里、环跳、阳陵泉、三阴交。针刺15min/次,1次/d,持续治疗30d。干细胞+针灸组行自体骨髓干细胞移植配合针灸治疗,过程同上。④使用肌电图仪检测治疗前及治疗后3个月各组患者双下肢胫神经与腓总神经的感觉神经传导速度、运动神经传导速度。结果:24例2型糖尿病并发周围神经病变患者均进入结果分析。①各组患者治疗后一般状况:干细胞+针灸组治疗24h,足趾疼痛感和麻木感明显减轻;1个月后疼痛消失,足趾可轻微活动;3个月后足趾活动力量可达3级,除2例患者有跛行外,其余6例患者均可正常行走。干细胞组、针灸组患者预后情况较干细胞+针灸组差。②各组治疗前后双下肢神经传导速度的变化:与治疗前比较,各组患者胫神经、腓总神经的运动神经传导速度均显著增加(P<0.05或P<0.01);干细胞组、干细胞+针灸组胫神经的感觉神经传导速度均显著增加[(16.9±4.5),(25.2±5.5);(17.1±4.9),(29.4±8.5)m/s;P均<0.01],腓总神经的感觉神经传导速度亦均显著增加[(16.5±5.9),(30.3±5.2);(17.8±5.2),(31.7±7.2)m/s;P均<0.01];针灸组感觉神经传导速度变化不明显(P>0.05)。组间比较,各组改善运动神经传导速度的效果差异无显著性意义(P>0.05);与干细胞组改善胫神经、腓总神经的感觉神经传导速度比较,针灸组治疗效果较差[(25.2±5.5),(20.1±4.9);(30.3±5.2),(20.3±5.4)m/s;P均<0.05],而干细胞+针灸组改善效果显著[(25.2±5.5),(29.4±8.5);(30.3±5.2),(31.7±7.2)m/s;P均<0.01]。结论:自体骨髓干细胞移植配合针灸治疗可显著改善糖尿病并发周围神经病变的电生理指标。

重组胸腺素β4在干眼模型中对炎症反应的调节作用及对眼表修复的影响

背景研究证实炎症与干眼的发生和发展相关，其中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）是重要的炎症因子。胸腺素β4（Tβ4）具有促进上皮细胞迁移和抑制炎症反应的作用，但其对干眼眼表修复的影响及其机制尚未阐明。 目的观察重组Tβ4对干眼模型鼠眼中TNF-α和IFN-γ表达的调控作用及其对眼表修复的影响。 方法选用清洁级雄性成年SD大鼠50只，用质量分数0.3%苯扎氯铵溶液连续点左眼7 d以诱导干眼模型，以泪膜破裂时间（BUT）、角膜荧光素染色评分、Schirmer试验Ⅰ（SⅠt）结果评估造模情况。将造模成功的36只眼按随机数字表法分为模型对照组、重组人表皮生长因子（rhEGF）点眼组、Tβ4点眼组及PBS点眼组，按照分组分别用5 μl Tβ4溶液（9 μg/ml）、rhEGF滴眼液、无菌PBS点眼，每日3次，连续7 d，大鼠右眼不进行任何干预作为正常对照组。各组大鼠均于点眼后7 d行BUT、角膜上皮荧光素染色和SⅠt检查。点眼后7 d以过量麻醉法处死动物，制备大鼠眼表组织切片，采用苏木精－伊红染色法观察各组大鼠角膜和结膜组织形态学变化；采用过碘酸希夫染色法计数结膜组织中杯状细胞的数目；透射电子显微镜下观察大鼠角膜和结膜细胞超微结构改变；分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测大鼠结膜组织中TNF-α mRNA和IFN-γ mRNA及其蛋白的表达。 结果正常对照组、模型对照组、rhEGF点眼组、Tβ4点眼组和PBS点眼组大鼠BUT分别为（10.42±0.66）、（7.46±0.49）、（8.71±0.50）、（9.59±0.35）和（8.63±0.68）s，总体比较差异有统计学意义（F＝5.65，P＝0.00），其中模型对照组大鼠BUT明显短于正常对照组，rhEGF点眼组和Tβ4点眼组大鼠BUT明显较模型对照组大鼠延长，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。各组间大鼠SⅠt和角膜荧光素染色评分的总体比较差异均无统计学意义（F＝0.42，P＝0.79；F＝136.77，P＝0.00）。苏木精－伊红染色显示，模型对照组大鼠角膜、结膜上皮缺损，角膜基质层水肿；rhEGF点眼组和Tβ4点眼组大鼠角膜、结膜上皮细胞形态不规则，呈过度增生状。各组大鼠结膜组织中杯状细胞数量的总体比较差异有统计学意义（F＝3.16，P＝0.04），其中模型对照组和rhEGF点眼组大鼠结膜组织中杯状细胞数量均明显低于正常对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.05），而Tβ4点眼组大鼠结膜杯状细胞数量与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。透射电子显微镜下观察可见，模型对照组大鼠角膜、结膜上皮细胞的微绒毛和微皱襞肿胀、融合、卷曲、断裂和脱落，Tβ4点眼组角膜、结膜上皮细胞微绒毛呈增生修复状态。各组大鼠结膜组织中TNF-α mRNA和IFN-γ mRNA相对表达量总体比较差异均有统计学意义（F＝43.08、371.69，均P＝0.00），各组大鼠结膜组织中TNF-α和IFN-γ蛋白表达量总体比较，差异均有统计学意义（F＝34.27、43.52，均P＝0.00），其中模型对照组大鼠结膜组织中TNF-α mRNA和IFN-γ mRNA及其蛋白的表达量均明显高于正常对照组，而Tβ4点眼组上述因子的表达量均明显低于模型对照组和rhEGF点眼组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。 结论Tβ4局部点眼可通过下调干眼大鼠结膜组织中TNF-α和IFN-γ的表达而增加泪膜的稳定性，促进眼表损伤的修复。

一种基于长短帧的串口实时通信方法

介绍了一种基于长短帧的串口实时通信方法,将上位机、下位机通信协议设计成短帧和长帧2种不同的帧结构,短帧为1个字节,长帧为多个字节。长帧的帧头和帧尾与短帧一起进行编码。基于短帧的通信是实时的,基于长帧的通信是非实时的。采用这种帧结构设计方法,在实时数据量不大的情况下,提高了串口通信的数据吞吐率。从帧结构设计到软件实现及实例论证了该实时通信方法的可行性,完成了基于该方法的核检测仪器γ能谱仪上的通信应用。

实验性干眼大鼠的角结膜上皮组织学改变

目的建立大鼠干眼模型并进行评价,比较正常大鼠和干眼大鼠角结膜上皮组织形态学特点。方法采用苯扎氯铵滴眼诱导大鼠出现干眼,麻醉后处死动物,取正常大鼠和干眼大鼠角结膜组织行HE染色,及电镜下观察大鼠角结膜超微结构。结果干眼大鼠角膜上皮和结膜上皮出现上皮细胞缺失,结膜上皮杯状细胞减少,电镜下观察干眼大鼠角膜结膜上皮细胞微绒毛缺失,断裂,出现基底膜溶解,细胞内线粒体溶解。结论苯扎氯铵诱导的大鼠干眼模型与人干眼发生后角膜结膜发生的改变相似,此干眼模型在动物实验研究中具有重要的参考价值。

基质金属蛋白酶-9在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的:研究基质金属蛋白酶- 9(MMP - 9)的表达与甲状腺癌的临床分期和淋巴结转移的关系,探讨其在甲状腺癌发生发展、侵袭和转移中的机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测5 0例甲状腺癌标本及2 0例癌旁正常甲状腺组织中MMP - 9蛋白的表达。结果:甲状腺癌中MMP - 9的表达显著高于癌旁正常组织,与甲状腺癌的临床分期和淋巴结转移密切相关。结论:MMP - 9在甲状腺癌的侵袭转移中发挥关键作用。

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胃黏膜5-HT和NPY的变化

目的:研究大鼠实验性胃溃疡自愈期间胃黏膜5-羟色胺(5-HT)和神经肽Y(NPY)的表达变化及其在大鼠实验性胃溃疡自愈中的作用。方法:胃前壁黏膜下注射冰乙酸制备大鼠乙酸性胃体溃疡模型,应用免疫组织化学S-P法检测42只胃溃疡组、21只盐水组及6只正常组大鼠胃黏膜5-HT和NPY的表达,以图像分析系统进行积分光密度值(IOD)测量。结果:正常组大鼠胃黏膜5-HT和NPY蛋白呈弱阳性表达。5-HT阳性细胞主要表达于内分泌细胞,散在分布于胃底腺;NPY主要表达于胃底腺壁细胞、内分泌细胞胞浆内,以靠近黏膜肌层信号较强。溃疡术后1d 5-HT阳性细胞和NPY阳性细胞即显著增多(与正常组相比,P<0.01),至溃疡术后4d 5-HT和NPY积分光密度值均达到高峰,之后虽呈下降趋势,但5-HT阳性细胞积分光密度值仍维持于较高水平(与对照组相比,P<0.01);NPY阳性细胞于溃疡术后23d积分光密度值显著降低,但高于对照组(P<0.01)。结论:大鼠胃溃疡自愈时期5-HT和NPY参与了胃黏膜修复过程。

大鼠实验性胃溃疡期间海马肠三叶因子的变化

目的:探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)在海马的表达及其与实验性胃溃疡愈合的关系。方法:以免疫组织化学染色和RT-PCR法分别检测溃疡组(n=42)和正常组(n=6)大鼠海马ITF蛋白的表达和mRNA的转录及变化。结果:ITF免疫反应阳性物质主要位于海马的锥体细胞和颗粒细胞的胞浆内,海马内部分神经纤维也显示阳性。与正常组比较,溃疡1 d海马ITF平均灰度值略降低(P>0.05),溃疡后2、4、6 d逐渐降低,6 d达低谷(P<0.01),10、14、23 d均维持在较低水平(P<0.05)。RT-PCR显示海马ITF mRNA转录水平在溃疡1 d开始增高(P>0.05),溃疡后6 d最高,10、14 d略有下降,但仍高于正常组(P<0.01或P<0.05),23 d和1 d水平接近。结论:实验性胃溃疡大鼠海马可能通过ITF的高表达参与实验性溃疡愈合的神经内分泌调节。

甲状腺肿瘤患者血清中MBL和MASP-2的表达及意义

目的检测甲状腺肿瘤患者血清中甘露糖结合凝集素(MBL)和相关的丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)的水平并探讨其意义。方法应用ELISA法检测26例甲状腺乳头状癌、30例甲状腺腺瘤患者MBL和MASP-2的血清水平。结果甲状腺乳头状癌患者MBL血清含量[(565.23±76.7)μg/L]高于甲状腺腺瘤患者[(324.267±24.74)μg/L]及健康者[(152.69±16.95)μg/L],甲状腺乳头状癌患者与甲状腺腺瘤患者及健康者间差异有统计学意义(P<0.05),甲状腺腺瘤患者与健康者间差异无统计学意义(P>0.05);甲状腺乳头状癌患者MASP-2血清含量[(726.153±78.88)μg/L]高于甲状腺腺瘤患者[(379.266±30.26)μg/L]及健康者[(203.846±29.09)μg/L],甲状腺乳头状癌患者与甲状腺腺瘤患者及健康者间差异有统计学意义(P<0.05),甲状腺腺瘤患者与健康者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MBL和MASP-2在甲状腺乳头状癌患者中血清水平高,说明作为免疫防御分子,可能参与了甲状腺肿瘤的免疫防御过程。

儿童慢性荨麻疹血清嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)和血清总IgE的检测及其意义

应用了 ECP FEI荧光酶标法检测了 32例典型慢性荨麻疹患儿及 13名正常儿童的血清嗜酸细胞阳离子蛋白 (ECP)值，同时还检测了患儿和正常儿童血清总 IgE值及外周血嗜酸粒细胞 (EOS)计数，并比较了它们之间的联系。结果显示：患儿血清 ECP值为 12.96± 9.72μ g/L、血清总 IgE值为 970.10± 312.61IU/mL，二者均明显高于正常对照组 (P< 0.05)；而患儿的血 EOS计数与正常儿童相比增高不明显 (P >0.05)。慢性荨麻疹患儿血清 ECP和血清总 IgE与外周血 EOS计数之间无相关性。提示儿童慢性荨麻疹中血清 ECP和血清总 IgE的变化可能较血 EOS计数变化更灵敏，更能反映 EOS的活化程度。

葛根芩连汤对高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝炎的影响

目的:探讨葛根芩连汤对非酒精性脂肪性肝炎的干预作用.方法:高脂饲料喂养SD大鼠以制备非酒精性脂肪性肝炎模型,各给药组在造模的同时进行灌胃给药,持续8 wk后取材,血清用比色法对谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、总胆固醇(cholesterol total,CHO)、低密度脂蛋白((low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)的含量进行检测,用放免法对空腹胰岛素(fasting insulin,F I N S)的含量进行检测,并进行胰岛素抵抗指数(homeostatic model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)计算;肝组织制成石蜡切片及冰冻切片进行HE及油红O染色,并根据"非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)活动度积分"对各组肝组织进行NASH评估.结果:与空白组比较,NASH大鼠血清中A S T、A LT、C H O、L D L的含量显著升高(P<0.05或P<0.01),H D L的含量显著降低(P<0.01),HOMA-IR指数显著升高(P<0.05),葛根芩连汤可显著抑制高脂饲料喂养SD大鼠过程中血清AST、ALT、CHO、LDL含量(P<0.01)及HOMA-IR指数的升高(P<0.05)以及HDL含量的降低(P<0.01);HE染色、油红O染色及NAFLD活动度积分结果显示,葛根芩连汤可显著抑制NASH及相关病理变化的发生发展.结论:葛根芩连汤对非酒精性脂肪性肝炎有一定的干预作用,并可改善胰岛素抵抗.

实验性胃溃疡大鼠自愈期间胰腺组织三叶因子3水平的变化

目的:探讨实验性胃溃疡(GU)期间大鼠胰腺组织中三叶因子3(TFF3)的表达及变化。方法:SD大鼠共30只,随机分为GU1、GU4、GU10、GU23和正常组5组,每组6只。GU1、GU4、GU10和GU23组通过胃前壁黏膜下注射冰乙酸制备GU模型,并分别于造模后1、4、10和23d取材。正常组不做任何处理。应用免疫组化SP法检测胰腺组织TFF3蛋白和胰岛素的表达,RT-PCR法检测胰腺TFF3mRNA,ELISA法检测血清TFF3水平。结果:5组大鼠胰腺组织TFF3蛋白和胰岛素的表达水平、胰腺TFF3mRNA和血清TFF3水平差异有统计学意义(F分别为9.276、12.362,166.600,21.316,P均<0.001)。造模4、10d后胰腺组织TFF3蛋白表达水平升高,23d时仍处于较高水平(P<0.05);胰岛素变化趋势与TFF3一致;造模4d后,胰腺组织中TFF3与胰岛素的表达存在正相关(r=0.826,P<0.05)。胰腺TFF3mRNA和血清TFF3水平在造模4d后达最高,10d时略有下降,23d时进一步降低但仍高于正常组(P<0.05)。结论:胰岛TFF3与胰岛素共同释放入血,参与GU自愈期间胃黏膜的修复。