一种基于疏水基团标记和反相色谱分离的富集策略及其在含赖氨酸多肽分析中的应用

赖氨酸(K)已被广泛用于靶向赖氨酸的交联剂设计、蛋白质复合物的结构解析以及蛋白质-蛋白质相互作用等研究领域。在基于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)联用技术的“鸟枪法”蛋白质组学研究中,复杂生物样品中的蛋白质被酶切成上万条肽段,为直接分析含有K的肽段带来了巨大挑战。鉴于目前缺乏针对含K多肽的有效富集方法,本工作发展了一种基于疏水标记试剂C10-S-S-NHS和反相色谱分离的方法(简称HYTARP),实现对复杂样品中含K多肽的高效富集和鉴定。合成的C10-S-S-NHS试剂可以高效标记含不同数目K的标准肽段,且对HeLa细胞蛋白酶解肽段的标记效率高达96%。通过考察标记肽段在反相色谱中的保留行为,发现大部分被标记的含K肽段在流动相中乙腈比例升高至约57.6%(v/v)时开始洗脱。进一步优化色谱洗脱梯度,发现阶梯式洗脱能够实现对复杂样品酶解肽段中标记的K肽段的高效分离和富集。富集后样品中含K肽段的占比>90%,较富集前提高了35%。富集的含K肽段对应蛋白质的丰度动态范围跨越了5~6个数量级,实现了对复杂样品中低丰度蛋白质的鉴定。综上,本工作发展的HYTARP策略为降低样品复杂度、提高含K肽段及低丰度蛋白质的鉴定覆盖率提供了一种简单、高效的方法。

朱家峁煤矿3#煤层导水裂缝带发育高度分析研究

根据朱家峁煤矿三盘区煤层赋存条件及工作面巷道布置与开采状况,为研究3#煤层开采后覆岩导水裂缝带发育高度及形态规律,在理论分析与详细探测设计基础上,采用钻孔分段注水测漏法对3301综采面采后覆岩导水裂缝带高度进行了现场探测。通过系统资料整理与分析,得到了该条件下的两带高度实测资料,3301综采面观测站处导水裂缝带最大高度为55.4m,为采厚的19.8倍。建议在后续矿井突水危险性评价时,采用本次实测裂采比20倍作为依据。

有机-硅胶杂化整体柱的制备及应用研究进展

有机-硅胶杂化整体柱结合了有机聚合物整体柱和硅胶整体柱的优势,具有制备简单、机械强度高和通透性好等优点,近年来备受关注.有机-硅胶杂化整体柱的制备方法主要有常规溶胶-凝胶法、'一锅法'和其它聚合方法.目前,杂化整体柱已被广泛应用于微纳尺度分离分析、样品预处理和固定化酶反应器基质中.本文综述了有机-硅胶杂化整体柱的制备方法及应用研究进展,并展望了其今后的发展前景.

“一锅法”制备C18-硅胶杂化毛细管整体柱及其应用

发展了一种"一锅法"制备有机-无机杂化毛细管整体柱的方法。首先将四甲氧基硅烷、乙烯基三甲氧基硅烷在弱酸条件下水解,然后加入有机单体(甲基丙烯酸-N,N-二甲基十八烷基溴化铵乙酯)及自由基聚合引发剂,同步原位完成硅羟基间的缩聚反应及双键间的自由基聚合反应,从而制成C18-硅胶杂化整体柱;同时用毛细管电色谱(CEC)和毛细管液相色谱(CLC)对其柱效和分离能力进行了初步评价,并将其应用到微柱液相色谱-串联质谱对牛血清白蛋白酶解液的分离分析。结果表明,该C18-硅胶杂化整体柱具有较高的柱效和较好的重现性,在分离分析复杂生物样品方面具有较大的应用前景。此外,本文所发展的方法在制备杂化整体柱的过程中不借助相应的硅烷试剂,为杂化整体柱的制备提供了一种新的思路。

核心素养目标下提高初中数学作业设计有效性策略研究

文章探讨初中数学作业有效性设计策略,旨在促进教师转变教学思维、明确数学作业设计目的,围绕数学的基础知识、基本技能、基本思想、基本活动经验(即“四基”),通过开展“层次性”作业设计,帮助学生夯实数学基础;通过“针对性”作业设计,提升学生数学基本技能;通过“典型性”作业设计,帮助学生体悟数学思想;通过“实践性”作业设计,丰富学生基本经验。在满足新课标对发展学生核心素养的基本要求的同时,提高教师作业设计整体水平。

含多面体低聚倍半硅氧烷杂化毛细管整体柱的制备及修饰

本文采用自由基聚合法原位制备了两种杂化毛细管整体柱。首先以含有一个甲基丙烯酸基团的多面体低聚倍半硅氧烷(POSS)试剂(Bu-POSS)为单体、以含有多个甲基丙烯酸基团的POSS试剂(POSS-MA)为交联剂在二元致孔剂(正丙醇/聚乙二醇400)和引发剂(偶氮二异丁腈)存在下发生热引发聚合,在毛细管中形成聚(Bu-POSS-co-POSS-MA)杂化整体柱;另外仅以POSS-MA为单体在相同条件下制备聚(POSS-MA)杂化整体柱,并将这两种杂化整体柱应用于小分子的毛细管液相色谱(cLC)分析。结果表明,含POSS杂化整体柱具有制备简单、重现性好以及稳定性高的特点。此外,利用聚(POSS-MA)杂化整体柱表面剩余的甲基丙烯酸基团,可以将功能单体(甲基丙烯酸硬脂酸酯等)化学键合到整体柱上,不但可以提高色谱柱效,而且使其具有不同的选择性。本文所发展的以POSS试剂为原料采用自由基聚合法制备杂化整体柱的方法为新型杂化整体柱的制备提供了一种新思路。

对两起扒窃案件两种不同处理结果的剖析

近年来,我分局针对公共电汽车上扒窃案件发案突出的现状,从提高群众自身安全防范意识入手,通过多种渠道,采取,多种形式,加强了对群众的安全防范宣传教育,广大乘车群众的防扒反扒意识有了明显增强。据不完全统计,仅1998年1至8月,群众直接抓获、扭送扒窃嫌疑人就达到300余名。但是由于一些民警在受理这些案件的过程中,往往忽视取证工作,导致这部分扒窃嫌疑人被依法处罚的却为数不多,这对于教育群众、打击扒窃犯罪极为不利。

基于反相有机整体柱的新型蛋白质酶反应器

以牛血清白蛋白(BSA)为标准样品,以鉴定的独立肽段数目、蛋白质鉴定覆盖率和漏切率为考察指标,通过考察酶解缓冲液、反相柱基质的多孔结构、酶解反应时间和整体柱的疏水性对反相蛋白质酶反应器酶解效率的影响,构建了一个基于反相有机整体柱的新型酶反应器,此反应器具有制备简单、通透性好、酶解时间短和蛋白质鉴定覆盖率高等特点。

提高用电效率的智能配电网协调规划技术探讨

本文研究了智能配电网的发展模式,通过将传统配电网与有分布式电源加入的智能配电网进行比较,得出分布式电源并网对规划模型的影响。考虑分布式电源的配电网扩展规划,运用智能算法得出可以满足负荷增长需要的系统最佳增容方案。在现有电力网络布点规划基础上,合理加入分布式电源,提高用电效率。最后辅以遗传算法算例说明提高用电效率的可能性。

润物无声 用爱心去播种希望 ——浅谈初中班主任德育教育

近年来,在素质教育的深刻影响下,德育教育成了班主任教学工作中的首要目标。德育教育工作是学生思想成长道路上的一个关键性因素,对学生的德智体美劳养成有重要影响。而班主任作为班集体的领导者,就必须做好对学生的德育教育工作,为学生的思想健康成长营造出良好环境。本文主要围绕初中班主任德育教育进行简要的分析。

浅谈高层建筑设计与城市空间整合

近年来,城市化进程是不可阻挡的时代新潮流,我国城市化发展的主要障碍就是土地资源短缺,严重影响了城市居民生活水平的提高。

“有压生产,无压检修”生产组织模式研究

本文通过对陕西中太能源有限公司朱家峁煤矿3302工作面回采过程中“有压生产,无压检修”生产组织进行介绍,为支架承载力差状况下类似综采工作面的顶板管理和生产组织方式提供了借鉴。

基于开放教育理念下的教育建筑空间设计探究

“开放教育”指的是不拘泥于形式和教材、不采用分科教学的一种教育模式。“开放教育”的宗旨是在传授知识的同时,培养学生健康、健全的人格;培养学生的学习兴趣,让学生在兴趣的驱动下快乐学习。