人类白细胞抗原G(HLA-G)与非小细胞肺癌的研究进展

人类白细胞抗原G(HLA-G)属于非经典主要组织相容性复合体Ⅰb(MHCⅠb)类分子,包括膜结合型和可溶性HLA-G两种形式,通过相应受体调节多种免疫细胞的功能,是形成母胎耐受、肿瘤免疫逃逸的重要免疫学机制之一。非小细胞肺癌(NSCLC)在肺癌中占比最高且预后差,研究发现HLA-G的基因多态性及表达水平与NSCLC发生发展密切相关,提示HLA-G可作为NSCLC早期诊断、亚型区分、治疗及预后等潜在的生物标志物,具有辅助诊断依据的临床价值,对其机制的深入研究更可能提供NSCLC诊疗的新策略。

糖平煎复方对实验性糖尿病大鼠血糖、血脂和蛋白质糖化终末产物的影响

目的 :研究糖平煎复方对糖尿病大鼠代谢的影响。方法 :观察该方对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血糖、血脂、蛋白质糖化终末产物的影响。结果 :糖平煎复方对实验动物有显著降低血糖、血脂 ,降低蛋白质糖化终末产物的作用。结论

阻断白介素-17对博来霉素诱导小鼠肺纤维化及肺组织Fas/FasL表达的影响

目的 :探讨阻断白介素-17(interleukin-17,IL-17)对博来霉素(bleomycin,BLM)诱导小鼠肺纤维化、细胞凋亡和肺组织Fas/FasL表达的影响。方法 :80只C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为假手术组(SG)、BLM组(BG)、中和抗体组(NG)和抗体对照组(IG),经小鼠气管内一次性注入BLM诱导肺纤维化的形成,假手术组则给予等量生理盐水。NG和IG小鼠分别从造模前1天每隔3 d通过尾静脉给予抗鼠IL-17单克隆中和抗体或同型对照抗体,SG和BG则给予等量PBS。于造模后28d,处死各组小鼠,取肺组织,通过Masson染色及羟脯氨酸含量测定评价各组小鼠肺纤维化程度,用流式细胞仪和免疫组织化学法分别检测肺组织细胞凋亡和Fas/FasL的表达情况。结果:与BG和IG相比,NG小鼠肺纤维化程度明显减弱(P<0.01),羟脯氨酸含量显著下降(P<0.01),细胞凋亡率和Fas/FasL表达亦显著降低(P<0.01)。结论:内源性IL-17被阻断后,能显著改善BLM诱导的肺纤维化,降低细胞凋亡率和Fas/FasL表达,表明阻断IL-17对BLM诱导的小鼠纤维化改善与Fas/FasL凋亡通路有关。

“课程思政”融入生物化学教学改革研究

生物化学是医学类专业的核心课程,将“课程思政”融入生物化学教学对学生职业素养、科学精神、敬业精神、责任意识和创新能力的培养意义重大。通过科学设计“课程思政”教学方案、教学方式及评价方法,将“课程思政”有机融入生物化学教学中,形成课程体系育人合力,为生物化学“课程思政”教学改革提供思路与方法。

“新医科”背景下基于OBE理念的混合式教学模式在医学检验技术专业中的应用研究

“新医科”建设的核心是医学知识体系的重塑,在此背景下,为适应行业发展和社会需求,构建基于OBE(outcome-based education)理念的混合式教学模式,培养学生学习的自主性和积极性,促进教学质量的提升,为培养能引领未来检验医学发展的卓越检验医师提供新的路径。

IL-17在沙眼衣原体呼吸道感染早期表达及与衣原体复制的关系

目的探讨炎症性细胞因子IL-17在沙眼衣原体呼吸道感染中的早期表达及与衣原体复制的关系。方法128只小鼠按随机数字表法分为实验组和对照组,实验组用4000包涵体形成单位(IFU)沙眼衣原体小鼠肺炎株(MoPn)通过鼻腔感染小鼠,对照组则给予等量蔗糖磷酸盐缓冲液(SPG),分别在感染后0、1、1.5、2、3、4、8、12d处死小鼠,用免疫荧光检测(IFA)衣原体在肺组织中的生长情况,通过ELISA检测小鼠肺组织IL-17表达。24只小鼠分为3组,分别用160、800、4000IFUMoPn通过鼻腔感染小鼠,于感染后第2天测定肺组织中衣原体生长及IL-17表达。16只小鼠随机分为2组,用4000IFUMoPn通过鼻腔感染小鼠,实验组肌肉注射利福平和氯霉素,对照组则给予等量PBS,于感染后第2天测定肺组织中衣原体生长及IL-17表达。结果MoPn感染后第1天,肺组织有衣原体生长,于感染后第8天达高峰。感染后第2天,IL-17在小鼠肺组织中的表达达峰值,并很快下降。仅剂量为4000IFUMoPn感染小鼠2d后,肺组织中同时有衣原体生长和IL-17的表达。经抗生素处理后衣原体生长被抑制,同时也检测不到IL-17的表达。结论IL-17在衣原体呼吸道感染早期出现,其表达情况与衣原体感染剂量和早期复制有关。

白介素-17在沙眼衣原体呼吸道感染中的早期产生可提高局部白介素-6和巨噬细胞炎性蛋白-2的表达

目的:探讨炎症性细胞因子白介素-17(interleukin-17,IL-17)在沙眼衣原体呼吸道感染中的早期产生与细胞分泌白介素-6(interleukin-6,IL-6)和巨噬细胞炎性蛋白-2(macrophage inflammatory protein2,MIP-2)之间的关系。方法:在体内,用沙眼衣原体小鼠肺炎株(MoPn)通过鼻腔感染小鼠,用免疫荧光法(immunofluoresent assay,IFA)检测衣原体在肺组织的生长;通过酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠肺组织IL-17,IL-6和MIP-2的表达,未感染小鼠作为对照组;在体外,用重组鼠IL-17(recombinant murine IL-17,rmIL-17)预处理L929细胞24h,rmIL-17预处理并感染MoPn的细胞作为实验组,未用rmIL-17预处理但感染MoPn的细胞作为对照组,24h后收集上清液,利用ELISA检测IL-6和MIP-2的产生,细胞则通过IFA进行衣原体包涵体计数(inclusion-forming unit,IFU)。结果:体内实验表明,MoPn感染后第1天,肺组织有衣原体生长,感染后第8天达高峰,以常用对数(lg)计数每个肺组织的IFU为6.49±0.19。感染后第2天,IL-17在小鼠肺组织中的产生达峰值(83.0±35.8)ng/L,并很快下降。IL-6在感染后第3天达到峰值(3.98±0.04)μg/L,而MIP-2则在第8天出现高峰(2.19±0.71)μg/L。体外实验发现,分别用20,100和500μg/L不同剂量的rmIL-17预处理细胞后再感染衣原体MoPn24h,细胞上清液中IL-6含量分别为(531.65±24.40),(629.95±7.71)和(646.51±35.92)ng/L,与对照组(55.10±16.54)ng/L比较差异有统计学意义(P<0.01),细胞上清液中MIP-2含量分别为(107.21±28.40),(181.95±25.51)和(221.9±17.32)ng/L,与对照组(13.71±0.84)ng/L比较差异有统计学意义(P<0.05)。单独rmIL-17对细胞并无刺激作用,rmIL-17对感染细胞衣原体包涵体生长无直接抑制作用。结论:IL-17在衣原体呼吸道感染中早期出现,rmIL-17能诱导感染MoPn的L929细胞分泌IL-6和MIP-2。IL-17在衣原体呼吸道感染早期可能通过诱导IL-6和MIP-2的产生,在宿主抵御细胞内病原菌感染中发挥重要的作用。

制备小鼠支气管肺泡灌洗液方法的改进

支气管肺泡灌洗术是一种通过对支气管肺泡灌洗技术，获取肺泡灌洗液进行免疫细胞、炎症因子和可溶性物质检查的方法，为某些呼吸道疾病的病情观察、诊断和预后判定提供新途径。医学科研工作者经常需要从小鼠动物模型制备支气管肺泡灌洗液，其制备方法非常重要，操作者需要有较好的技术，既要保证灌洗液一定的数量以完成较多细胞因子等测定，又要保证足够的细胞进行计数和分类。

中和白细胞介素-17加重小鼠衣原体呼吸道感染

目的:探讨中和白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)对小鼠沙眼衣原体呼吸道感染的作用。方法:(1)32只小鼠随机分为4组,每组8只,分别为中和抗体组(neutralizing antibody group,NG)、同型抗体对照组(isotype-matched control antibody group,IG)、回补重组鼠IL-17(recombinant mouse,rmIL-17)组(compensating rmIL-17 group,CG)和PBS组(PBS control group,PG),用高剂量沙眼衣原体小鼠肺炎株(mouse pneumonitis,MoPn)通过鼻腔感染小鼠,从感染前1天每隔48 h通过腹腔分别给予各组小鼠抗鼠IL-17单克隆中和抗体、同型对照抗体、抗鼠IL-17单克隆中和抗体同时回补rmIL-17、PBS,记录每天小鼠体重变化和死亡情况,计算生存率。(2)另外32只小鼠随机分为4组,分组情况同方法(1),用中等剂量MoPn通过鼻腔感染小鼠,随后操作同方法(1),于感染后第8天处死各组小鼠,取支气管灌洗液(bronchial alveolar lavage fluids,BALF),计数细胞分类,用免疫荧光法(immunofluoresentassay,IFA)检测衣原体在肺、肾和脾组织的生长。结果:高剂量MoPn感染的小鼠IL-17被中和后,小鼠平均体重变化明显,自12 d起,IG、CG和PG组体重开始上升,NG组则继续下降直至死亡。NG小鼠生存率明显下降,感染后第21天全部死亡,而IG、CG和PG组生存率分别为75%、75%、87.5%,NG组与IG、CG和PG组相比差异有统计学意义(χ2值分别为11.096、10.575、13.781,均P<0.05),IG、CG和PG组间差异无统计学意义。中等剂量MoPn感染第8天肺组织以及扩散至肾和脾的衣原体包涵体形成单位(inclusion-forming unit,IFU)以lg计数,NG组分别为6.85±0.12、1.85±0.35、1.59±0.35,IG组分别为6.03±0.25、0.86±0.80、0.57±0.82,CG组分别为5.42±0.66、0.43±0.23、0.21±0.15,PG组分别为5.65±0.29、0.68±0.39、脾未检出;NG组肺、肾、脾组织IFU与其余3组比较差异均有统计学意义(P<0.05),IG、CG和PG组间差异无统计学意义。BALF的中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞占细胞总数的百分数:NG组分别为54.17%±5.29%、26.92%±6.28%、18.90%±5.01%,IG分别为74.50%±7.33%、13.43%±5.69%、12.06%±6.64%,CG分别为76.13%±8.12%、12.31%±7.73%、11.56%±7.25%,PG分别为69.97%±6.45%、14.55%±6.59%、15.48%±6.11%;NG组BALF中细胞构成比与其余3组比较差异均有统计学意义(χ2值分别为21.32、25.374和14.772,P<0.001),IG、CG和PG组间差异无统计学意义。结论:内源性IL-17活性被中和后小鼠的体重下降,生存率显著降低,肺组织衣原体生长明显增加,且扩散至肾和脾等,中性粒细胞浸润显著减少,表明IL-17在宿主抵御衣原体感染过程中具有重要的免疫保护作用。

开设综合性、设计性生物化学实验的探索与实践——以河北北方学院医学检验学院生物化学实验教学改革为例

生物化学实验教学通过更新实验内容、增加综合性和设计性实验项目、实施以学生为中心的教学模式、改革实验教学考核方式等一系列举措,提高了学生的实验操作能力、观察分析能力、解决问题能力、归纳总结和论文写作能力,探索出实验教学改革的新思路。

浅谈PBL教学模式

PBL被称为“以问题为基础的学习” ,是一种以解决问题为主的教学模式。与传统教学模式相比 ,能够加强学科间的渗透与综合 ,能扩大学生知识面 ,培养学生综合素质 ,提高其解决临床问题的能力 ,激发其学习的积极性、主动性和创造性 ,培养出具有个体发展优势的全面发展的高素质人才 ,指导教师通过PBL教学也能真正做到教学相长。

PBL教学法在生物化学教学中的尝试与探讨

我们通过对我院临床医学 2 0 0 0级二个班级生物化学教学进行传统授课法和PBL教学法的教学效果对比和问卷调查 ,结果显示 ,PBL教学法能显著提高学生的学习兴趣 ,提高其综合分析问题的能力 ,促进自学 ,加强师生之间的交流与沟通 ,是一值得推广的教学法。

细胞自噬与肺纤维化

内质网应激、氨基酸饥饿、病原体感染等因素可诱导自噬的发生。真核细胞通过自噬途径清除降解细胞内受损伤的细胞器、长寿命蛋白质和核酸等生物大分子。肺纤维化以成纤维细胞过度增生、胶原蛋白过度沉积为特点,细胞自噬活化可以促进胶原的降解,抑制则引起胶原的大量堆积。本文就细胞自噬的分子机制及与肺纤维化关系的最新进展做一综述,为肺纤维化的靶向治疗研究提供新的思路。

Rituximab在非霍奇金淋巴瘤治疗中的作用

Rituximab，又称为美罗华，是第一个由美国FAD批准用于治疗非霍奇金淋巴瘤（Non—Hodgkin’s lymphoma，NHL）的单克隆抗体。Rituximab是基因工程人鼠嵌合型单克隆抗体，是由鼠Fab和人Fc构成，分子质量约45000。可特异地与B淋巴细胞表面的CD20抗原结合，并引发一系列作用，导致B淋巴细胞的死亡。Rituximab，不但可用于NHL的治疗，还可用于特发性血小板减少性紫癜、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病等多种免疫相关性疾病的治疗。现就Rituximab在NHL治疗中的作用作一综述。

蚁皇浆口服液抗衰老作用的实验研究

目的:以衰老的自由基学说为依据,研究蚁皇浆口服液的抗衰老作用。方法:52周龄小白鼠30只随机分为老龄实验组和老龄对照组,4周龄15只作为成年对照组,灌胃四周后分别取血测定SOD、CAT、Tch、TG和MDA等各项生化指标。结果:老龄实验组SOD、CAT活性均明显升高(P<0.01),MDA、Tch和TG含量明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论:蚁皇浆口服液具有较强的抗氧化和抗衰老作用,是一种很有经济价值药食两用的保健品。

拟黑多刺蚁对小鼠SOD、MAO含量和脂褐素的影响

本文观察了拟黑多刺蚁匀浆液对小鼠血中SOD活性、MAO含量及脾脏脂褐素的影响。给药组老龄小鼠与老年对照组比较RBC-SOD增高(P<0.01),脾脏脂褐素分布相对减少,两血浆MAO水平显著降低(P<0.01);与成年对照比较二酶均未见显著差异。

人工改造的A型肉毒毒素重链Hc段基因在大肠杆菌中的可溶性表达研究

目的人工合成A型肉毒毒素Hc段基因,并在大肠杆菌中进行高效表达。方法人工合成Hc段基因,选择宿主细胞偏爱的同义密码子替换其原有稀有密码子,使AT含量降至57.3%,然后将其克隆入pQE-60表达载体,在大肠杆菌中进行可溶性表达。结果可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的11.5%左右,表达产物可被A型肉毒毒素马血清抗毒素识别。结论成功地表达并鉴定了A型肉毒毒素Hc蛋白,为进一步进行A型肉毒毒素的疫苗或抗体研究奠定了基础。

人源化Fab段噬菌体抗体库的构建

目的构建人源化Fab噬菌体抗体基因库。方法利用反转录PCR和PCR技术从B细胞淋巴瘤患者外周血淋巴细胞中扩增人IgG抗体重链Fd基因及κ、λ轻链基因,将之克隆入噬菌体载体pComb3,构建人源性Fab噬菌体抗体库,并进行鉴定。结果构建完成了库容量为6.0×108的噬菌体抗体库。结论成功地构建了人源化噬菌体抗体库,为下一步抗CD20抗体的筛选和表达奠定了基础。

人CD20跨膜区与g3pN端融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的 :构建g3pN1 hCD2 0跨膜及胞外区基因表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效融合表达。方法 :利用反转录PCR和PCR方法 ,分别从Daudi细胞和M13K0 7噬菌体中扩增hCD2 0基因和编码g3pN1蛋白N1端的基因 ,并重组到pTIG Trx表达载体中 ,在大肠杆菌中融合表达。结果 :表达产物可被抗CD2 0分子的单克隆抗体 (mAb)识别。结论 :成功地表达并鉴定了目的蛋白。