IGHG1对急性髓系白血病THP-1细胞增殖、凋亡和侵袭的机制研究

目的 探讨免疫球蛋白γ-1重链恒定区(immunoglobulin γ-1 heavy chain constant region,IGHG1)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)THP-1细胞中的表达以及调控转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad通路对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 以9例AML患儿的骨髓标本、8例骨折患儿的骨髓标本、人骨髓基质细胞HS-5及人AML细胞THP-1、HL60为研究对象,Western blot检测IGHG1蛋白表达;将THP-1细胞分组为空白(细胞未经任何处理)、si-NC、si-IGHG1-1、si-IGHG1-2、si-IGHG1-3、TGF-β、si-IGHG1-1+TGF-β、si-IGHG1-1+TGF-β+LY364947(TGF-β/Smad通路抑制剂)组。CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术和Transwell实验分别测定细胞凋亡和侵袭;Western blot评估细胞中IGHG1、TGF-β、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结果 与骨折患儿骨髓比较,AML患儿骨髓中IGHG1蛋白((0.24±0.03)vs(0.87±0.12))表达水平显著升高(P<0.05);与HS-5细胞比较,THP-1、HL60细胞中IGHG1蛋白((0.89±0.14)(0.75±0.08)vs(0.21±0.02))表达升高(P<0.05);与空白组比较,si-IGHG1-1组THP-1细胞OD_(450)值(24、48、72 h)、侵袭细胞数目、TGF-β、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率升高,TGF-β组对应指标呈相反变化(P<0.05);TGF-β逆转了沉默IGHG1对THP-1细胞增殖、凋亡和侵袭的影响;与si-IGHG1-1+TGF-β组比较,si-IGHG1-1+TGF-β+LY364947组TGF-β、p-Smad2、p-Smad3蛋白、OD_(450)值(24、48、72 h)及侵袭细胞数目显著降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论 IGHG1在AML细胞中高表达,沉默IGHG1可抑制AML细胞增殖及侵袭,并促进AML细胞凋亡,该机制可能与抑制TGF-β/Smad通路有关。

前降钙素在新生儿脓毒症诊断中的应用

目的探讨新生儿脓毒症早期诊断快速、可靠的方法和前降钙素(Procalcitionin,PCT)在新儿脓毒症中的临床意义。方法用免疫发生测量法(Immunoluminmetric,IL-MA)检测102例临床怀疑有脓毒症的新生儿,结合C-反应蛋白(C-Reaction Proteint,CRP)测定和血培养。结果102例病例中PCT阳性44例,CRP阳性17例,血培养阳性12例。在有明显感染灶组中,PCT和CRP阳性率比较有明显差异(P<0.05);在伴有多脏器损害功能组中PCT和CRP阳性率比较无明显差异(P>0.05),但与有明显感染灶组比较PCT阳性率有明显差异(P<0.05),PCT均值比较亦有显著差异(P<0.05)。结论PCT持续升高或进行性升高提示预后差。

新生儿缺氧缺血性脑病血清抵抗素与高敏C反应蛋白含量变化的临床研究

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿血清抵抗素和高敏C反应蛋白（hs-CRP）水平的动态变化。方法分别测定116例HIE患儿及40例正常新生儿血抵抗素与hs—CRP水平，并进行观察与比较。结果生后2h内HIE各组（重、中、轻）抵抗素与hs．CRP水平明显高于对照组，差异有统计学意义（t=18．45，16．72，13．17与t=19．78，17．31，12．58，均P〈0．01），并且随着病情程度的加重而逐渐升高。抵抗素与hs—CRP水平生后第1天时最高，轻度组第3天基本恢复正常；中度组第3天明显下降，第10天基本恢复正常；重度组第3天无明显下降，第10天有明显降低，但仍高于对照组（t=11．27与t=11．36，均P〈0．01）。HIE患儿血清抵抗素水平与hs-CRP水平呈显著正相关（r=0．62，P〈0．01）。结论新生儿HIE血抵抗素与hs—CRP水平变化与HIE严重程度有关。

纳络酮预防早产儿原发性呼吸暂停32例

目的:探讨纳络酮预防早产儿原发性呼吸暂停的疗效。方法:将胎龄≤34周的早产儿62例随机分为两组,对照组30例出生后立即给予氨茶碱3mg/kg加入10% GS 15mL静脉滴注,3次/d,治疗组32例出生后即在给予氨茶碱的基础上加用纳络酮0.1mg/(kg·次)静脉推注,3次/d,72h或120h观察结果。结果:治疗组发生原发性呼吸暂停的次数(2.8±0.9)较对照组(3.8±1.2)减少(t=3.38,P<0.01),持续时间(28.7±4.17)s较对照组(34.7±5.2)s缩短(t=3.4,P<0.01)。结论:纳络酮预防早产儿原发性呼吸暂停疗效显著,未见明显不良反应,建议对≤34周早产儿出生后常规应用纳络酮,可降低原发性呼吸暂停发生率,改善预后。

miR-22靶向FMNL2对儿童急性髓系白血病细胞迁移和凋亡的影响

目的:探讨miR-22靶向同源形成素样蛋白2(FMNL2)对儿童急性髓系白血病(AML)细胞迁移和凋亡的影响。方法:以11例AML患儿、10例免疫性血小板减少患儿的外周血标本以及人AML细胞系TF-1a、HL-60、THP-1和人骨髓基质细胞HS-5为研究对象,UniCel DxH 800型全自动血液分析仪检测外周血标本的血小板数、血红蛋白、白细胞数,RT-q PCR检测外周血标本和AML细胞中miR-22表达;利用LipofectamineTM 2000试剂盒对HL-60细胞进行转染,实验分为空白(细胞未转染)、miR-NC、miR-22 mimics、si-NC、si-FMNL2、miR-22 mimics+OE-NC和miR-22 mimics+OE-FMNL2共7组,RT-q PCR检测各组细胞miR-22表达;Transwell检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-22与FMNL2靶向关系;Western blot检测FMNL2蛋白表达情况。结果:与对照组比较,AML患儿外周血中白细胞数显著升高(P<0.001),血红蛋白浓度及血小板数显著降低(P<0.001);AML患儿外周血中miR-22的表达水平显著低于对照组(P<0.001);与HS-5细胞比较,TF-1a、HL-60、THP-1细胞中miR-22的表达水平均显著降低(P<0.05),且HL-60细胞中的miR-22的表达水平最低,因此,选择HL-60细胞进行后续实验;上调miR-22或沉默FMNL2均可降低迁移细胞数目,提高细胞凋亡率(P<0.05);miR-22靶向负调控FMNL2的表达;FMNL2过表达逆转了上调miR-22对HL-60细胞迁移和凋亡的影响。结论:miR-22通过靶向下调FMNL2表达,抑制HL-60细胞迁移、促进细胞凋亡。

LncRNA XIST调控miR-200b/ZEB1轴参与儿童急性髓系白血病阿柔比星耐药的机制研究

目的:研究LncRNA XIST调控miR-200b/ZEB1轴参与儿童急性髓系白血病(AML)阿柔比星耐药的机制。方法:以阿柔比星浓度递增法诱导建立人AML阿柔比星耐药细胞株K562/ADM,检测人AML细胞K562及K562/ADM细胞中LncRNA XIST表达。体外培养K562/ADM细胞,随机分为对照组、LncRNA XIST inhibitor组、阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor阴性对照组、阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor组,分组转染并以药物处理后,检测各组细胞增殖凋亡情况;检测各组细胞LncRNA XIST、miR-200b、ZEB1、MDR1 mRNA表达水平和ZEB1、耐药蛋白P-gp蛋白表达水平。结果:相比K562细胞,LncRNA XIST在K562/ADM细胞中表达明显升高(P<0.05)。与对照组相比,阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor组细胞存活率明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05);LncRNA XIST inhibitor组、阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor阴性对照组上述指标无明显改变(P>0.05)。与LncRNA XIST inhibitor组相比,阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor组细胞存活率明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05)。与对照组、阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor阴性对照组分别相比,阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor组、LncRNA XIST inhibitor组LncRNA XIST、ZEB1及MDR1 mRNA表达水平、ZEB1及P-gp蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),miR-200b表达水平均明显升高(P<0.05);阿柔比星+LncRNA XIST inhibitor阴性对照组细胞上述各指标无明显改变(P>0.05)。结论:LncRNA XIST可使儿童AML细胞产生耐药性,下调其表达可促进miR-200b表达,降低ZEB1表达,抑制耐药基因MDR1、P-gp表达,提高阿柔比星对AML细胞的杀伤。

卫生事业运行机制研究

卫生事业的经济运行机制,是受整个社会经济环境,即社会主义有计划的商品经济和卫生事业本身的双重性质,即其公益性与经济性所制约和决定的。

病毒性心肌炎患儿血清高迁移率蛋白-1和内脂素水平的变化

目的探讨病毒性心肌炎患儿血清高迁移率蛋白-1(HMGB1)和内脂素的变化及临床意义。方法采用ELISA法测定52例病毒性心肌炎患儿血清HMGB1和内脂素水平,同时检测磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB),并与36例健康儿童作对照。结果病毒性心肌炎治疗前血清HMGB1和内脂素水平明显高于治疗2周后及对照组(P<0.01);治疗2周后HMGB1和内脂素水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);病毒性心肌炎患儿HMGB1与内脂素、CK-MB呈正相关(r=0.73,0.79,P<0.05),内脂素与CK-MB亦呈正相关(r=0.82,P<0.05)。结论 HMGB1和内脂素可能参与病毒性心肌炎的发生、发展,并可作为病情判断及预后的观察指标。

护理干预在早发型母乳性黄疸患儿中的应用效果

目的探讨护理干预在早发型母乳性黄疸患儿中的应用效果。方法将158例早发型母乳性黄疸患儿按随机数字表法分为干预组80例和对照组78例。两组均给予常规治疗和护理，干预组在此基础上采取日光灯照射、适当增加喂养频率和抚触等护理干预措施。比较两组患儿每日的治疗效果。结果干预组患儿每天哺乳次数（9．1±1．9）次高于对照组（5．7±1．6）次，排便次数（5．6±1．7）次高于对照组（3．1±1．3）次，两组比较差异有统计学意义（t分别为12．15、10．36；P〈0．01）；干预组患儿胆红素每天下降值（33．4±9．7）μmol／L高于对照组患儿（23．9±8．5）μmol／L，两组比较差异有统计学意义（t=6．54，P〈0．05）。干预组黄疸消退所需蓝光照射时间为（30±5）h，对照组为（42±7）h，两组比较差异有统计学意义（t=12．42，P〈0．01）。结论对早发型母乳性黄疸患儿采取护理干预措施，可促进胆红素的排泄，降低血清胆红素水平，减少蓝光照射时间，提高治疗效果。

川崎病患儿内脂素和血管内皮细胞钙黏蛋白的含量变化

目的 观察川崎病（KD）急性期患儿血清内脂素（visfatin）和血管内皮细胞钙黏蛋白（VE-cadherin）水平变化,探讨其与川崎病的相关性及临床意义.方法 90例川崎病患儿（KD组）与30例健康体检儿童（对照组）,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清内脂素和VE-cadherin含量,并结合临床表现进行分析.结果 川崎病组血清中VE-cadherin[（5.03±1.06）mg/L]含量明显高于对照组[（2.86±1.02）mg/L],内脂素[（32.35±4.82）μg/L]含量明显高于对照组[（16.83±4.36）μg/L],两组之比较差异均有统计学意义（t=15.23,12.47,P＜0.01）.川崎病组中冠状动脉损伤患儿血清VE-cadherin[（6.14±1.23）mg/L]含量明显高于冠状动脉正常患儿[（4.02±1.01）mg/L],内脂素[（36.61±5.22）μg/L]含量明显高于冠状动脉正常患儿[（28.16±4.67）μg/L],两组之间比较差异均有统计学意义（t=8.38,7.16,P＜0.01）;川崎病组血清内脂素和VE-cadherin含量呈正相关（r=0.65,P＜0.05）.结论 内脂素和VE-cadherin在川崎病急性期尤其伴冠状动脉病变时明显升高,可作为判断川崎病冠状动脉损伤的参考指标.