“一稻两虾”稻田综合种养生产模式试验

为有效探索青虾在稻渔综合种养模式上的应用,江苏现代农业(青虾)产业技术体系浦口推广示范基地开展两季青虾和一季水稻的“一稻两虾”综合种养模式的试验。2021年3-5月,在休耕稻田内开展春季虾生产试验(以下简称“轮养”);2021年5月底-12月底,利用留存的抱卵虾在沟内育苗开展稻虾共养试养(以下简称“共养”)。

绞吸式挖泥船外力计算软件及应用

介绍了绞吸式挖泥船外力计算软件的基本原理和功能,以2 000 m3/h绞吸式挖泥船为研究对象,把软件计算得到的结果与实际测量结果作比较,两者非常接近。设计者可以参考该软件计算得到的外力值合理选取相关的设计参数,同时也为结构计算提供了依据。

青虾冷休克蛋白Y-box编码基因的cDNA全长克隆与表达分析

为研究冷休克蛋白Y-box基因在青虾应答环境胁迫过程中所起的调控作用,实验应用RACE PCR技术首次克隆了青虾的冷休克蛋白Y-box基因全长c DNA序列,并利用在线软件对其序列特征进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR技术对其在青虾不同组织及环境胁迫过程中的表达变化特征进行分析。青虾冷休克蛋白Y-box基因c DNA全长1501 bp,包括84 bp的5′末端非翻译区(UTR),876 bp的开放阅读框(ORF),541 bp的3′UTR,开放阅读框编码291个氨基酸。氨基酸相似度比对显示,青虾冷休克蛋白Y-box基因富含高度保守的冷休克结构域。系统进化树分析显示,青虾冷休克蛋白Y-box基因与水蚤等节肢动物冷休克Y-box聚类一支,具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示,冷休克蛋白Y-box基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量在肝胰腺组织中最高,使用荧光定量PCR检测青虾冷休克蛋白Y-box基因在低温胁迫和恢复条件下在肝胰腺中的m RNA时空表达情况,结果显示,与对照组相比冷休克蛋白Y-box在肝胰腺中的表达量分别在低温和低氧胁迫3,6和12 h出现了显著上调,而在恢复刺激后其表达量与对照组差异不显著。此外,本实验对Y-box进行了原核表达,为进一步研究Y-box基因的功能奠定了基础。

中国大陆美国白蛾的侵入分布、危害与防治概述

本文概述了美国白蛾在国内外的分布,以吉林省为例介绍了美国白蛾从无到有、迅速蔓延的过程,分析了其成灾的原因,比较了各种防治方法的效果,并据此提出加强检疫、人工防治、生物防治相结合的综合防治是防治美国白蛾的有效措施。

青虾幼虾发育时期性腺发育组织学研究

采用组织切片及类固醇激素含量测定等方法,研究青虾Macrobrachium nipponense幼虾发育第1~31d的精巢、卵巢及促雄腺发育的起始时间、发育过程及成熟时间。结果表明：青虾幼虾发育到第10d（PL10）时促雄腺呈索状结构开始发育,随后经历增殖期（PL10）、合成期（PL13）和分泌期（PL19）3个发育阶段发育成熟,形成完整的促雄腺。青虾精巢和卵巢均在幼虾发育第13d（PL13）开始发育,精巢形成不规则排列的精原细胞,而卵巢生殖上皮开始分化为椭圆或多边形的卵原细胞。精巢经精原细胞期（PL13）、精母细胞期（PL16）、精细胞期（PL19）和精子期（PL22）4个发育阶段成熟,此时成熟的精巢生精小管内充满成熟的精子。卵巢经卵原细胞期（PL13）、初级卵母细胞期（PL16）、次级卵母细胞期（PL16）和卵子期（PL19）4个时期发育成熟,此时卵巢充满成熟卵子。从PL1到PL22,睾酮分泌量逐渐增加,维持在稳定水平至PL25后逐渐下降;从PL1到PL19,17β-雌二醇的分泌量逐渐增加,维持在稳定水平至PL25后逐渐下降。本研究显示：促雄腺与精巢发育过程均持续10d,但促雄腺早于精巢3d开始发育和成熟,这可为性别和生殖相关基因的筛选及性别调控机制的研究提供参考。

低氧和复氧对日本沼虾抗氧化酶活力及组织结构的影响

为研究低氧胁迫及恢复后日本沼虾(Macrobrachiumnipponense)抗氧化酶活力和组织结构的变化,将体重(2.0±0.2) g的日本沼虾暴露于(2.0±0.2) mg/L低氧环境中24 h,设定溶解氧(6.0±0.2) mg/L为对照组,每组设置3个重复,于低氧胁迫0 h、6 h、12 h、24 h及复氧1 h、6 h、12 h、24 h分别采集实验组及对照组鳃、肝胰腺及肌肉组织,测定这些组织的抗氧化酶活力,并进行组织切片观察。实验结果表明,低氧胁迫期间肌肉组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活力先升高后下降, 3种酶活力在低氧胁迫12 h时显著高于对照组(P<0.05),复氧阶段肌肉组织中SOD、CAT酶活力呈波动性变化,GPX酶活力在复氧24h时显著低于对照组(P<0.05)。鳃组织中SOD、CAT和GPX酶活力在低氧胁迫12 h时显著高于对照组(P<0.05), GPX酶活力在复氧24 h时显著高于对照组(P<0.05)。在低氧胁迫期间肝胰腺SOD、CAT和GPX酶活力在低氧6 h均达到最大值并显著高于对照组(P<0.05),复氧阶段3种酶活力均呈现波动性变化,肝胰腺中丙二醛(MDA)含量在低氧及复氧阶段均显著高于对照组(P<0.05)。低氧胁迫及恢复并未对肌肉组织结构产生明显的影响。鳃组织在低氧胁迫期间鳃小片上皮细胞与支柱细胞排列发生紊乱,次级层片发生肥大的现象且有红细胞流入,泌氯细胞形态发生变化且细胞数目有所增加,但复氧后均得到一定程度的恢复。肝胰腺组织在低氧胁迫期间B细胞数量逐渐降低,胞内运转泡体积减小,复氧阶段B细胞数量及体积恢复明显。结果表明急性低氧胁迫能够导致日本沼虾肝胰腺和鳃组织结构损伤并引起抗氧化酶活力发生显著变化,且24 h恢复期不足以让日本沼虾在低氧胁迫中完全恢复。

高效降解氨氮的芽孢杆菌筛选及发酵条件优化

采用96孔板初筛以及摇瓶复筛方法,从淤泥中分离到1株去除氨氮能力强的菌株,经形态学、生理生化、16S rDNA鉴定,确定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌株经细菌同化作用实现对氨氮以及亚硝酸盐氮的去除,对100 mg/L的氨氮去除率达92.32%,对50 mg/L亚硝酸盐可完全去除,高氨氮情况下有更高的降解速率,并且在3.2 g/L有机氮情况下仍可有效去除氨氮。当发酵培养基碳氮比(质量比)为1.32时,摇瓶发酵产芽孢浓度为2.3×10^9 CFU/mL。在3 L发酵罐补料发酵过程中,当葡萄糖补料速度为10 mg/(L·h)时,24 h产芽孢数可达1.12×10^10 CFU/mL。将发酵液与玉米芯粉混合制得菌剂,并用于模拟养殖水体,对不同浓度的初始氨氮均有快速高效的去除效果,平均去除率为3.92 mg/(L·h),展示了对养殖水体良好的水质调控作用。

青虾Ran基因的克隆、表达及其在卵巢发育中的功能

本研究应用RACE技术克隆了青虾(Macrobrachium nipponensis)Ran(Ras related nuclear protein,Ras相关核蛋白)基因全长cDNA序列,该基因cDNA全长1191 bp,包括218 bp的5'UTR,648 bp的开放阅读框(ORF),405 bp的3'UTR,编码215个氨基酸。青虾Ran基因属于P-loop-NTPase超级家族,拥有PTZ00132跨结构域,多肽分子量约为24.57 kDa,理论等电点7.13。系统进化树分析表明,在动物界进化中非常保守的青虾Ran多肽与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)聚为一支,具有最近的亲缘关系。使用荧光定量PCR技术检测Ran基因在成体青虾不同组织和卵巢不同发育期的表达差异,结果显示,Ran基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量在卵巢中最高,是精巢表达量的7~8倍;随着卵巢的发育,Ran基因的表达水平呈现上升趋势,在卵巢消退期又恢复到较低水平。RNA干扰后,实验组Ran基因表达量显著低于对照组(P<0.05),同时卵巢发育关键基因Vg(vitellogenin)在卵巢中的表达量也显著低于对照组(P<0.05),推测Ran基因参与雌性卵巢发育过程并对Vg基因的表达起到调控作用。

青虾精(卵)母细胞特有因子Gtsf1基因的克隆及其时空表达分析

为了研究青虾性早熟现象,在实验室构建的青虾精卵巢表达谱中发现一个Gtsf1同源EST序列,采用RACE技术克隆获得青虾Gtsf1基因cDNA序列长349 bp(GenBank登录号:KR349325),开放阅读框(Open reading frame,ORF)为240 bp,编码79个氨基酸。生物信息学分析预测青虾Gtsf1蛋白包含1个zf-U11-48K结构域,并发现该蛋白无信号肽,属于非分泌蛋白。系统进化树分析表明青虾Gtsf1蛋白与昆虫纲的蝽类(Lygus hesperus)亲缘关系最近。组织表达分析结果显示,Gtsf1基因在性腺中表达很高,特别是在卵巢中表达最高(为精巢的6倍),其他组织中表达极低。卵巢不同发育时期表达结果发现,发育初期Gtsf1基因表达水平较低,随着卵巢的发育,该基因的表达水平呈现显著上升趋势(P<0.05),在成熟期达到最高峰,在消退期显著下降并恢复到较低水平(P<0.05)。胚胎和胚后不同发育时期结果显示,Gtsf1基因在胚胎发育早期表达水平较高,囊胚期时显著升高并达到峰值(P<0.05),从原肠期显著下降直至变态后第10天该基因表达水平维持较低水平(P<0.05)。以上研究结果表明Gtsf1基因与生殖密切相关,特别是在卵巢发育过程中有关,且呈正相关趋势。同时,Gstf1基因可能主要参与青虾胚胎早期发育的调控。研究首次在甲壳动物中克隆获得Gtsf1基因,并分析Gtsf1基因在青虾中的时空表达模式,研究结果将为进一步研究青虾Gtsf1基因功能和青虾性腺发育调控规律奠定基础,也为其他甲壳动物的生殖相关研究提供参考。

不同碳氮比对生物絮团形成及对日本沼虾生长、抗氧化酶和消化酶的影响

为了研究不同碳氮比对生物絮团形成及对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)生长、抗氧化酶和消化酶的影响,设置5个不同实验组[对照组(不做任何添加),碳氮比10组(C/N10)、碳氮比15组(C/N15)、碳氮比20组(C/N20)和碳氮比25组(C/N25)],每组设三重复;将初始体重(0.25±0.03)g的日本沼虾置于不同碳氮比的玻璃缸(30 cm×40 cm×100 cm)中,进行50d的饲养实验。研究结果表明,随着碳氮比升高,生物絮团含量有上升趋势,生物絮团含量C/N20>C/N25>C/N15>C/N10,C/N20生物絮团最多,生物絮团体积和总固体悬浮物分别为(328.67±7.09)mL/L和(40.33±1.53)mg/L而C/N10几乎没有生物絮团产生,C/N15和C/N25有少量生物絮团,但含量显著低于C/N20。对照组的氨氮和亚硝酸氮浓度持续升高,C/N10和C/N25的氨氮和亚硝酸氮浓度有较大波动,先升高后降低,随后又有升高的趋势,氨氮和亚硝酸氮浓度分别高于2和1.5 mg/L,C/N15和C/N20的氨氮和亚硝酸氮浓度在整个养殖期间都维持在较低水平,氨氮和亚硝酸氮浓度分别低于0.35和0.6 mg/L,且无剧烈波动。增重率依次是C/N20>C/N25>C/N15>C/N10>Control,C/N10、C/N15、C/N20和C/N25分别比对照组高出29.69%、50.22%、89.52%和75.98%(P<0.05);特定生长率依次是C/N20>C/N25>C/N15>C/N10>Control,C/N10和C/N15、C/N20和C/N25分别比对照组高出18.41%、24.69%、42.26%和33.89%(P<0.05);在抗氧化酶方面,谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性C/N20>C/N25>C/N15>C/N10>Control,与对照组相比,C/N10、C/N15、C/N20和C/N25分别高出1.70%、21.42%、43.19%和31.49%(P<0.05);超氧化物歧化酶(SOD)活性C/N20>C/N25>C/N15>C/N10>Control,与对照组相比,C/N10、C/N15、C/N20和C/N25分别高了19.34%、35.26%、73.35%和47.12%。在消化酶方面,淀粉酶活性依次是C/N20>C/N15>C/N25>Control>C/N10,与对照组相比,C/N15、C/N20和C/N25分别高出68.09%、231.91%和42.55%(P<0.05);脂肪酶活性依次是C/N20>C/N25>C/N15>Control>C/N10,与对照组相比,C/N15、C/N20和C/N25分别高出2.86%、25.45%和23.12%(P<0.05);胰蛋白酶活性依次是C/N20>C/N25>C/N15>C/N10>Control,与对照组相比,C/N10、C/N15、C/N20和C/N25组分别高出12.98%、14.52%、36.45%和24.63%(P<0.05)。研究结果提示,日本沼虾在生物絮团养殖模式下,当碳氮比达到20时能有效产生生物絮团,降低水体氨氮和亚硝酸氮浓度并显著提高日本沼虾的生长性能、肠道消化酶活性和肝胰腺抗氧化酶活性。

青虾transformer-2基因RNA干扰规律的研究

通过对青虾性别调控相关基因transformer-2(tra-2)的RNA干扰规律进行研究,探讨了tra-2基因RNA干扰的最适注射部位、注射剂量、干扰效果以及干扰规律等。通过对青虾肌肉、心脏、围心腔和眼柄基部注射比较发现,围心腔注射死亡率最低,适宜RNA干扰研究。采用4μg/g的dsRNA剂量进行时间依赖性干扰试验,RT-PCR检验注射后第1,7,14天的卵巢tra-2表达量,结果显示第7天基因表达量出现显著降低(P<0.05)。不同剂量水平(0.4μg/g、4μg/g以及12μg/g)干扰研究发现,0.4μg/g dsRNA没有干扰结果,4μg/g和12μg/g剂量的干扰效果均显著。与4μg/g的剂量相比,12μg/g的dsRNA能在较短时间内起到明显的干扰效果,且能持续较长的时间,表明干扰规律会随着剂量的改变而变化。但两组tra-2的最低表达量分别为正常水平的23%和21%,无显著差异(P>0.05)。

《整百数乘一位数的口算》教学设计与评析

【教学内容】三年级(上册)第70～71页。【教学目标】1.引导学生经历探索整百数乘一位数口算方法的过程,理解并掌握相关的口算方法,能正确、熟练地进行相关的口算。2.引导学生在具体情境中应用数学方法解决相应的实际问题,加深对乘法运算意义的理解,进一步发展数学思考,提高解决实际问题的能力。3.在探索算法和解决问题的过程中,引导学生感受数学与生活的联系,体会合作交流的价值,获得学习成功的体验,树立学习的信心。

酶解制备日本沼虾游离精子方法的研究

为了获得数量多且存活的游离青虾精子,首次采用胰蛋白酶消化日本沼虾精荚的方法,获得了游离日本沼虾的精子。通过观察游离精子形态,并经台盼蓝染色,以每克精荚所获得形态正常、结构完整且不被染色的存活精子数为依据,探究胰蛋白酶处理的最佳条件。在p H 7.1的条件下,设计三因素四水平正交试验,设置不同酶浓度(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%)、处理时间(5 min、10 min、15 min、20 min)和处理温度(30℃、35℃、40℃、45℃),根据正交试验结果确定酶处理最佳反应条件。结果表明,酶浓度对获得游离精子影响最大,其次是处理温度和处理时间。酶处理的最适条件为:酶浓度0.8%,处理时间10 min,处理温度40℃。经优化验证试验,表明上述理论组合确为最佳组合。本研究通过酶解法获得较多数量的存活游离精子,为进一步研究日本沼虾精子提供了获得游离精子的方法。

青虾泛素特异性蛋白酶9基因Usp9全长cDNA序列的克隆及表达分析

本研究首次克隆了青虾的Usp9(ubiquitin-specific protease 9)基因全长c DNA序列,并在青虾中使用荧光定量PCR技术首次检测了Usp9基因在不同组织和发育阶段中的表达变化。青虾Usp9基因c DNA全长1259 bp,包括162 bp的5’UTR,978 bp的开放阅读框以及116 bp的3’UTR。氨基酸序列比对分析显示,青虾Usp9蛋白与太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)、凤仙花熊蜂(Bombus impatiens)及灰短尾负鼠(Monodelphis domestica)的蛋白相似度分别为99%、97%和95%。应用MEGA5.1软件对青虾与其他物种的Usp9氨基酸进行系统进化树分析,结果表明,青虾Usp9与同为甲壳纲的钩额型蚤状溞聚为一支,具有最近的亲缘关系。采用荧光定量PCR技术检测了Usp9基因的时空表达,水温28℃时,Usp9基因在青虾发育的后幼体发育期第5天PL5出现表达高峰。Usp9基因在6种成体组织中均有表达,表达水平依次为:脑>腹神经>精巢>卵巢>肌肉>肠。而在雌雄组织差异表达分析表明,精巢中Usp9基因表达量比卵巢的比值为2.86,脑组织中雄虾的表达量比雌虾为2.27,差异均为极其显著(P<0.01)。这表明Usp9基因的表达和雄性偏向基因趋势是一致的(雄性表达:雌性表达≥1.5)。本研究为进一步开展青虾Usp9基因功能等相关研究奠定了基础,并可为青虾性别的遗传调控机制研究提供参考。

X射线灭活活体日本沼虾精子的初步研究

为检测X射线对日本沼虾精子的灭活效果,利用X射线对雄性日本沼虾进行不同时间的照射处理,将处理后的雄虾与刚完成生殖脱壳的雌虾交配。待雌虾产卵后,计数雌虾抱卵天数,并在显微镜下观察卵的畸形情况。X射线管照射强度为100 k V,5 m A,源距10 cm,照射时间为0、30、60、90、120 min。结果发现：照射30 min组的抱卵天数及卵的畸形率较0 min组无变化,卵的畸形率为0,卵能正常发育至孵化出膜。随着照射时间的增加,在30-90 min之间,雌虾抱卵天数逐渐减少,且所抱卵的畸形率呈上升趋势。照射120 min组的抱卵天数较90 min组变化不大,卵的畸形率达100%。在本试验照射时间范围（0-120 min）内,灭活日本沼虾精子遗传物质的最佳照射时间为90-120 min。

山奈酚通过p38MAPK通路抑制6-OHDA所致帕金森病大鼠黑质神经炎症的实验研究

山奈酚(Kaempferol,KAE)是一种中药提取物,药理作用广泛,其对帕金森病(Parkinson􀆳sdisease,PD)的抗炎和神经保护作用及其机理尚未明确。本实验选择SPF级成年雄性SD大鼠单侧纹状体注射6-OHDA造模,30d后筛选成功模型。将成功模型随机分为模型组和治疗组,另设对照组,每组10只。治疗组以50mg穔g-1的KAE灌胃30d,正常组和模型组以生理盐水替代灌胃。

论知识产权裁判的不确定性及其约束路径

与其他民事诉讼相比,我国知识产权诉讼在事实认定与法律适用环节中均具有更高的不确定性,引发了判决结果可预测性的危机。这种不确定性缘于“知识”的无形性,以及知识产权与技术间的紧密联系。而实践中的模糊立法与任意司法,则加剧了这一问题。为有效约束知识产权诉讼中的不确定性,在立法层面,应当及时反思制度缺陷,并逐步细化自由裁量标准;在司法层面,应当着力解决庭审中的技术事实调查难题,提高先例对判决的约束作用,同时真正落实知识产权法官的说理责任,从而维护司法公信力。

巧用信息化教学手段让小学数学教学更加灵动

《基础教育课程改革纲要》中明确指出:"要大力推进信息技术在教学中的普遍应用,促进信息技术与学科的整合,逐步实现教学内容的呈现方式和师生互动方式的变革。"面对信息化时代,信息化教学手段在小学数学教学中的应用是课程改革的必然要求。因此,在小学数学课堂教学中,教师应充分借助信息技术的优势,通过创设情境,将抽象的数学知识变得生动化、形象化,揭示知识的内在规律,并为师生、生生互动搭建沟通的桥梁,让学生在互动的过程中,激发兴趣、活跃思维、学习知识和锻炼能力。

褪黑素通过JNK通路抑制帕金森病大鼠黑质炎症反应的实验研究

帕金森病(Parkinson􀆳sdisease,PD)是常见的神经系统变性疾病,其发病机制与神经炎症有关。褪黑素是哺乳动物松果体合成的一种激素,具有抗氧化、抗炎和神经保护作用。为探讨褪黑素对PD的抗炎和神经保护作用及其机制,制备由6-OHDA单侧纹状体注射诱导的PD大鼠模型,将PD大鼠随机分为褪黑素组(10只,褪黑素溶液,6mg/kg,i.p.,14d)、模型组(10只)。另取10只正常大鼠为对照组。

远程教育资源应用也要有创新

农村远程教育资源对于偏僻的西部地区中小学来说，就象—个学校的“骨干教师”。自然，校长不重用—个学校的“骨干教师”，就是对教育资源的极大浪费；教师不与本校的“骨干教师”进行深刻交流，就是骄傲自大；学生得不到—个学校的“骨干教师”培养，就是终生的遗憾!那么，我们如何更科学更有效地应用远程教育资源，让它在教育教学中能够发挥应有的作用呢？