电力检修现场作业风险评价与风险管理策略

在电力系统中,为保障其正常运行,需要定期对电力系统进行检修。电力企业在检修工作中进行现场作业风险评价,可以为后续的安全管理工作提供依据,风险评价工作主要是对作业过程中可能会出现的危险源进行辨识,并分析可能发生危险的原因和危害程度。基于此,本文利用风险辨识评价指标体系对电力检修现场作业潜在的风险进行分析和探讨,并根据电力检修现场作业风险评价结果,提出风险管理策略。

三种伞形科蔬菜作物棕榈酰基转移酶基因家族的鉴定与分析

在全基因组水平鉴定胡萝卜(Daucus carota)、芹菜(Apium graveolens)、香菜(Coriandrum sativum)3种伞形科蔬菜作物的棕榈酰基转移酶(protein S-acyltransferase,PAT),对其家族成员进行生物信息学和表达分析,为深入探究该类蛋白在3种伞形科作物生长发育及抵御逆境胁迫中的作用提供参考。利用Basic Local Alignment Search Tool(BLAST)和hmmsearch程序,从胡萝卜、芹菜、香菜基因组中筛选、鉴定PAT家族成员;利用TBtools绘制PAT基因染色体分布图;利用Expasy分析PAT蛋白的等电点、分子量;利用TMHMM-2.0预测PAT蛋白跨膜区;利用CELLO v.2.5、WoLF PSORT预测PAT蛋白的亚细胞定位情况;利用MEGA6构建系统发育进化树;利用MEME分析PAT蛋白保守基序;基于荧光定量PCR实验结果及转录组数据,利用TBtools绘制基因表达热图,分析PAT基因的组织表达特性及胁迫响应情况。结果表明,在胡萝卜、芹菜及香菜基因组中各存在27、25、27个PAT基因,分别命名为DcPAT 1~27、AgPAT 1~25、CsPAT 1~27。这些PAT成员不均匀地分布于染色体上,理化性质存在差异,且均为跨膜蛋白。系统进化分析将伞形科及来源于其他物种的PAT蛋白分为7个类群(Group1~7),伞形科作物PAT蛋白在7个类群中均有分布。结构分析表明,所有的PAT蛋白均含有DHHC-CRD结构域,该序列内的保守氨基酸残基在不同物种间已发生变异。荧光定量PCR和转录组数据分析表明,PAT基因在胡萝卜、芹菜、香菜不同组织间的表达水平有差异,但有部分成员在不同组织间均呈现高水平或低水平表达,另有部分DcPAT基因在盐胁迫和低温胁迫处理后,表达水平发生改变。

胡萝卜4CL基因家族的鉴定及分析

旨在全基因组水平上鉴定胡萝卜4CL基因,揭示该基因家族成员的理化性质、系统进化、基因结构、组织表达模式及胁迫响应情况,为胡萝卜4CL的功能研究和利用奠定基础。基于AMP结合结构域(PF00501)的隐马尔可夫模型文件,利用HMMER软件对胡萝卜蛋白质数据库进行检索,获得胡萝卜4CL基因(命名为Dc4CL);利用ProtParam分析Dc4CL的理化性质;利用MEGA6对Dc4CL进行系统进化分析;使用GSDS2.0、MEME分析Dc4CL的基因及蛋白结构;利用荧光定量PCR技术对Dc4CL的组织表达模式及胁迫响应情况进行研究。结果表明,胡萝卜基因组中存在12个4CL基因,分别为Dc4CL1~Dc4CL12。Dc4CL基因开放阅读框(ORF)长度为1350~3363 bp,编码蛋白质长度为449~1120 aa,编码蛋白的分子质量和等电点分别为48.92~123.73 ku和5.34~8.82。系统进化分析表明,Dc4CL与其他来自水稻、拟南芥、二穗短柄草、高粱、大白菜的4CL蛋白可分为两个类群。结构分析表明,Dc4CL基因外显子数目为4~11个,其蛋白序列中均含有BoxⅠ(SSGTTGLPKGV)和BoxⅡ(GEICIRG)两个保守序列。荧光定量PCR结果表明,Dc4CL3、Dc4CL12在胡萝卜叶片及肉质根中均有表达,而Dc4CL8主要在叶片中表达,盐胁迫和低温胁迫均使Dc4CL3、Dc4CL8、Dc4CL12的表达降低。总之,胡萝卜的12个Dc4CL基因在影响4CL蛋白功能的关键位点处具有保守性,而在其他位置上存在一定的差异,且部分成员在逆境胁迫应答过程中可能发挥了一定的作用。

猕猴桃多胺氧化酶基因家族的鉴定及表达分析

通过鉴定猕猴桃多胺氧化酶(PAO)基因家族成员,分析其在猕猴桃果实生长发育、成熟及储藏过程中的表达变化,发掘与猕猴桃果实成熟、软化相关的重要候选基因,为调控猕猴桃鲜果的发育及采后保鲜提供参考。以拟南芥AtPAO、水稻OsPAO蛋白序列作为参考序列,利用BLAST程序分别从中华猕猴桃、毛花猕猴桃、软枣猕猴桃基因组或转录组中筛选和鉴定PAO家族成员;利用Compute pI/Mw分析蛋白质分子质量、理论等电点,利用SignalP-4.1、TMHMM-2.0预测信号肽和跨膜区,利用WoLF PSORT进行亚细胞定位预测;利用MEGA 6构建系统发育进化树,利用MEME进行保守基序分析,利用TBtools分析PAO基因的共线性关系;基于转录组数据和荧光定量PCR技术,分析PAO基因的组织表达情况及其在猕猴桃果实生长发育、成熟及储藏过程中的表达变化。结果表明,中华猕猴桃、毛花猕猴桃、软枣猕猴桃中各存在4、4、5个PAO基因,分别是AcPAO1—4、AePAO1—4、AaPAO1—5。AcPAO、AePAO位于中华猕猴桃、毛花猕猴桃的8条染色体上,基因长度为1722~9837 bp。AcPAO、AePAO、AaPAO编码的氨基酸数目为420~496个,分子质量为45.74~55.92 ku,等电点为5.29~5.79,均不含有信号肽和跨膜区;AcPAO、AaPAO主要定位在过氧化物酶体,而AePAO分布范围较广;依据系统进化关系,13个猕猴桃PAO蛋白分属于3个类群,同一类群含有相似的motif分布及保守结构域;AcPAO、AePAO间存在4对共线性基因,它们在进化中经历了纯化选择。AcPAO3的表达量随猕猴桃果实成熟、软化呈现先升高后降低趋势,且能够响应不同储藏温度;AaPAO为组成型表达,多数成员的表达量在果实储藏过程中亦呈现先升高后降低的趋势。

基于数据窗口技术用户可管理界面软件的实现

利用Powerbuilder数据窗口技术实现最终用户对应用软件界面的管理,并将用户对界面的修改结果持久存储到数据库,软件开发者无需对软件重新编译和连接,提高了软件的适应性,降低了软件维护成本。

不同施氮期对小麦千粒重影响的QTL分析

本研究以花培3号×豫麦57的168个双单倍体（doubled haploid,DH）群体为材料,根据2年12个环境下千粒重性状的表型数据和含有323个位点的分子遗传图谱,对千粒重性状进行了QTL分析。结果共检测到40个QTL,主要集中在染色体2D、3A、4D、5B、6A和7D上。其中,2010年莱阳点3种施氮期下检测到8个QTL,2010年泰安试验点共检测到13个QTL,2011年济源点检测到12个QTL,2011年泰安试验点检测到7个QTL,单个QTL所解释的表型变异介于4.19%～23.14%之间。亲本花培3号对于千粒重的贡献占主导地位。Qtgw3A-2、Qtgw5B、Qtgw6A-1和Qtgw7D-1在三个施氮期都检测到,说明这些QTL是氮肥对千粒重影响较大的QTL。Qtgw3A-2、Qtgw4D、Qtgw6A-1、Qtgw7D-1等在多个试验点均能检测到,说明这些QTL是稳定表达的QTL。总之,影响千粒重的QTL数目及其QTL表达效应在不同施氮期下有很大的变化,说明不同施氮期对千粒重基因的表达存在特异性。小麦育种中,上述结果可为今后合理追施氮肥,增加粒重和产量及千粒重的分子标记辅助选择提供理论依据。

胡萝卜类黄酮含量的测定及DcCHS基因家族的鉴定分析

查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)是类黄酮合成过程中的第一个关键酶,具有重要的生理功能。测定胡萝卜不同发育时期、不同组织部位的类黄酮含量,并在全基因组水平上对胡萝卜CHS基因家族进行鉴定和分析。结果表明,无论在苗期还是收获期,胡萝卜叶中的类黄酮含量均极显著地高于根中的含量。叶中的类黄酮含量在不同发育时期无显著差异,而根中的类黄酮含量在不同发育时期却差异显著。胡萝卜基因组中共有12个DcCHS基因,分布于5条染色体上,氨基酸序列长度为253~398 aa,外显子1~3个。经预测,DcCHS蛋白均定位于细胞质,二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主。DcCHS蛋白可分为ClassⅠ和ClassⅡ两类,含有10种保守基序,motif1、4、6、7为CHS蛋白N端结构域,motif2、3、8为CHS蛋白C端结构域。这些研究结果可为胡萝卜CHS基因的功能研究提供参考。

菊芋HtCCR1基因的克隆与表达分析

肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoA reductase,CCR)是木质素合成代谢的关键酶。该研究以菊芋(Helianthus tuberosus L.)‘廊芋8号’为材料,克隆到1个菊芋的CCR基因,命名为HtCCR 1(GenBank登录号为MN205540),其开放阅读框(ORF)长975 bp,编码324个氨基酸,其中含有FR_SDR_e保守结构域。系统进化分析表明,HtCCR1与向日葵CCR蛋白(XP_021989763.1)共聚于一支,二者亲缘关系最近。实时定量PCR分析表明,HtCCR 1基因在菊芋茎和叶中的表达量显著高于在根和块茎中;盐(150 mmol·L^-1 NaCl)胁迫处理6、12和24 h后,处理组HtCCR 1基因的表达量均显著高于对照组;干旱(20%PEG6000)胁迫6和12 h后,处理组HtCCR 1基因的表达较对照组均显著上调。成功构建pET-28a-HtCCR 1原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导出了符合预期大小的蛋白,表明HtCCR1重组蛋白已成功表达。该研究结果为进一步研究HtCCR 1基因的功能及利用基因工程手段调节菊芋中木质素的生物合成奠定了基础。

本科生遗传学实验课程教学改革的探索与研究

为适应高等教育人才培养模式由"传授知识"向"全面素质教育"转变的形势,本科生遗传学实验教学应突破传统教学模式,有效整合实验教学体系,进行开放性实验教学管理、改善基础设施、完善考核制度等方面的改革,在传统遗传学实验的基础上推行新型教学形式。通过上述改革来提升遗传学实验教学的质量并获得更好的教学效果,为提高生物专业本科学生实践能力奠定基础。

异源表达菊芋HtHCT基因对受体植物木质素相关生理生化指标的影响

羟基肉桂酰辅酶A:莽草酸/奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(HCT)是木质素合成过程中的关键酶之一。本研究构建了菊芋HtHCT基因的植物表达载体pCAMBIA1390-HtHCT,分别对拟南芥和本氏烟进行遗传转化,并对转基因植株进行生理生化指标测定。PCR和RT-PCR结果表明,HtHCT基因已经插入到受体植物基因组中,并能进行转录;转基因植株生理生化指标检测表明,HtHCT基因能够调节拟南芥和本氏烟中木质素的含量及组成,并对受体材料的类黄酮合成亦有一定的影响。

如何加强建筑工程施工技术管理

现代建筑工程建设中,施工技术管理是提高工程质量的必要途径。建筑行业的竞争非常激烈,加强施工技术管理,对于建筑行业发展具有十分重要的意义。本文对施工技术管理在建筑工程中的主要内容和重要性进行分析,并提出加强施工技术管理的措施。

模板技术在建筑施工中的应用

随着我国经济的发展,我国建筑业发展较为迅猛。对建筑施工技术也也较高的要求,现代建筑结构主要抗震性能、整体性能、防火性能的要求,从而催生了模板技术。我国现代模板技术形成了三大体系:永久式、工具式、组合式。现代。本文对模板技术在建筑施工中的应用进行简单的分析。

菊芋查尔酮合成酶基因的克隆与表达分析

为揭示菊芋(Helianthus tuberosus L.)查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因的功能,以菊芋‘廊芋8号’叶片为材料,采用同源克隆和RT-PCR技术,克隆得到菊芋CHS基因命名为HtCHS,其编码区全长为1197 bp(GenBank登录号MN124515),编码398个氨基酸。HtCHS的基因组DNA(gDNA)全长为1567 bp,含2个外显子和1个内含子。序列比对和系统进化树分析显示,不同植物中的CHS氨基酸序列具有极高的同源性,菊芋与同属的向日葵CHS氨基酸序列一致性达到99.25%,共聚于一个分支。HtCHS蛋白相对分子质量为43.61 ku,等电点为6.33。HtCHS蛋白具有查尔酮合成酶结构域,属于查尔酮合成酶超家族成员,HtCHS不含信号肽和跨膜区,属于非分泌蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,HtCHS在根中表达量最高。与对照相比,150 mmol·L-1 NaCl和20%PEG 6000处理6 h时HtCHS表达显著上调,处理12 h时显著下调。原核诱导表达分析结果显示,成功诱导出与预测蛋白大小一致的目的蛋白。

孙红雷:母亲靠捡垃圾把我养大

小学四年级时，孙红雷得知，家里要推迟两个小时吃晚饭，因为母亲下班后，要去捡破烂贴补家用。一天，母亲轻言细语地对他说：“三郎，你放了学也和妈一起去捡好吗？”“不，我要做作业。”他飞快地答道，不敢看母亲的眼睛。这以后，孙红雷开始变得孤僻、沉默。有一天，孙红雷放学回来，走到二楼楼梯口时，看到母亲正背对着他站在走廊里。“请问，家里有人吗？”孙红雷听到母亲讷讷的声音，几秒钟后那家的门“嘎吱”开了，却很快又“哐当”一声关上了，伴随着没好气的一声：“又来借钱？我们没有钱!”孙红雷鼻子一阵发酸……

借助心理暗示,强化高中数学教学

在高中数学教学中,教师不仅要教会学生数学知识,还应该积极引导学生,给学生正面的心理暗示。心理暗示能够对学生的学习产生很大的影响,是学生学习的前提条件。然而,在高中阶段,学生往往缺乏对数学的兴趣,严重的甚至可能会导致学生失去学习数学的积极性,最终影响整个学科的学习,甚至还会影响其他科目。由此可见,教师应该从多方面着手,提高数学的趣味性,让学生在学习时感到愉快轻松,这样就是一种积极的心理暗示。本文分析了心理暗示在高中数学教学中的优势,并进行具体陈述。

番茄SlNRT2基因家族鉴定、启动子克隆及表达分析

硝酸盐转运蛋白2(Nitrate transporter 2,NRT2),是一种高亲和硝酸盐转运蛋白,在植物对硝酸盐的吸收和转运过程中发挥重要作用。本研究通过生物信息学方法对番茄(Solanum lycopersicum)NRT2(SlNRT2)家族基因进行鉴定,利用热图分析SlNRT2家族成员基因表达模式,并利用启动子嵌合GUS报告基因转化拟南芥对SlNRT2启动子活性进行分析。结果表明番茄基因组中鉴定到5个NRT2基因,定位于细胞膜,氨基酸序列长度介于458~531 aa,等电点介于9.05~9.33,不稳定性指数介于31.84~40.70。基因结构分析表明,该基因家族由3~4个外显子构成。染色体定位分析显示,SlNRT2基因分布于3条染色体上。系统进化和保守结构域分析显示,SlNRT2分别归属于I和II两个类群,具有10种保守基序,蛋白保守性很高。番茄不同组织热图分析表明SlNRT2.1和SlNRT2.2呈组成型表达;SlNRT2.3~SlNRT2.5主要在根部表达。启动子顺式作用元件及GUS组织化学染色分析结果表明,SlNRT2.4启动子驱动GUS基因在拟南芥根部特异性表达,而SlNRT2.3和SlNRT2.5除驱动GUS基因在拟南芥根部表达,叶片也有表达。本研究为后续开展SlNRT2基因的功能研究提供依据,同时为培育氮素高效利用型转基因番茄奠定了基础。

番茄SlPP2C67启动子克隆及表达分析

番茄(Solanum lycopersicum)PP2C67基因(SlPP2C67)是番茄蛋白磷酸酶2C基因家族的重要成员。本研究以‘Micro-Tom’番茄为材料,采用PCR方法克隆SlPP2C671657 bp启动子序列。启动子顺式作用元件分析表明该启动子除含有CAAT-box与TATA-box等基本调控元件外,还包含多个组织特异表达元件、光响应元件和激素响应元件。用克隆的启动子同向置换pCAMBIA1300-GN载体上的CaMv35S启动子来构建重组表达载体,然后转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)进行功能验证。GUS组织化学染色结果表明,SlPP2C67启动子驱动GUS基因在拟南芥叶片特异性表达。实时定量PCR结果表明SlPP2C67基因主要在番茄叶片表达,该结果与SlPP2C67启动子驱动的GUS基因在拟南芥中的表达结果一致。本研究为后续开展SlPP2C67基因的功能研究和番茄遗传改良提供理论依据。

菊芋木质素合成相关基因HtHCT的克隆及表达分析

羟基肉桂酰辅酶A:莽草酸/奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(hydroxycinnamoyl-CoA:shikimate/quinate hydroxycin-namoyltransferase,HCT)在植物木质素合成过程中具有重要作用。本研究以菊芋‘廊芋8号’为材料,成功克隆到一个菊芋HCT基因——HtHCT,其不含内含子,开放阅读框(ORF)为1293 bp,编码430个氨基酸。HtHCT含有HCT蛋白共有的保守序列HXXXD和DFGWG。系统进化分析表明,HtHCT与向日葵HCT蛋白(QBM78942.1)亲缘关系最近,共聚于一支。原核表达结果表明,HtHCT蛋白成功被诱导表达。荧光定量PCR结果显示,Ht HCT基因在菊芋各组织中均有表达,其中茎中表达量最高。此外,HtHCT基因能够响应盐胁迫(150 mmol·L-1 NaCl)和干旱胁迫(20%PEG-6000),NaCl处理24 h的Ht HCT基因表达量显著高于对照,PEG处理12 h的HtHCT表达量与对照相比显著上调了10倍。

燕山地区软枣猕猴桃天然种群表型多样性分析

为探明燕山地区软枣猕猴桃天然种群表型性状的多样性,本研究对3个软枣猕猴桃天然种群内软枣猕猴桃资源的叶片、果实的14个质量性状和11个数量性状进行了观测及分析,结果表明:燕山地区三个软枣猕猴桃种群部分果实性状存在显著差异,而不同种群的叶片表型性状间未达到显著差异;11个数量性状变异系数在12.86%~30.40%,其中果心大小的变异幅度最大;14个质量性状变异系数在5.13%~77.80%,其中果实萼片宿存的变异幅度最大;11个数量性状多样性指数均值在1.69~3.10,其中叶柄长度的多样性最丰富;14个质量性状多样性指数均值在0.23~1.20,其中果实喙端形状的多样性最丰富。对燕山地区3个软枣猕猴桃种群的表型性状均值对比分析,结果表明花厂峪种群表型性状的变异系数最大,多样性指数最高,果实横径纵径较大,与其它种群相比具有较大的开发利用价值。本研究可为今后的软枣猕猴桃育种和群体遗传进化研究提供形态学方面的参考。

番茄SlTIP-1基因的克隆、表达及启动子活性分析

为研究水孔蛋白分子功能,本研究以番茄(Solanum lycopersicum)矮化品种‘Micro-Tom’为材料,采用RTPCR技术克隆得到1个液泡膜内在蛋白(tonoplast intrinsic proteins,TIPs)类的水孔蛋白基因,命名为SlTIP-1,其开放阅读框(ORF)长753 bp,编码250个氨基酸。基因结构分析发现SlTIP-1有3个外显子和2个内含子。生物信息学分析表明SlTIP-1蛋白含有6个跨膜区及2个NPA(天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸)基序,具有MIP超家族典型的蛋白保守区序列特征。系统进化分析表明,SlTIP-1蛋白与野生种潘那利番茄TIP共聚于一支。实时定量PCR结果表明,SlTIP-1在番茄根中特异性表达。将SlTIP-1基因起始密码子上游1085 bp的序列构建到植物表达载体pBI121中,转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)并进行GUS组织化学染色分析。结果表明,SlTIP-1基因启动子驱动GUS基因在拟南芥根部特异性表达,与实时定量PCR结果一致。本研究拟为进一步探索该基因的功能及番茄分子辅助育种提供理论依据。