黄瓜 27 kD LHC-Ⅱ复合物三维结构的电子晶体学初步研究(英文)

从黄瓜 (CucumissativusL .)叶片中分离出只含有一种亚基 (2 7kD)的LHC_Ⅱ复合物。采用batch方法获得了其二维晶体 ,大小为 0 .7μm× 1.0 μm ,衍射能力达 30 。负染样品的二维投影结果表明 ,该晶体为p3对称性 ,晶胞参数为 15 .4nm× 15 .4nm ,不同于以往报道的菠菜 (SpinaciaoleraceaL .)或豌豆 (PisumsatiumL .)LHC_Ⅱ晶体 ,为另外一种晶型。采用tomography技术 ,收集了 0°～ - 5 5°系列倾斜照片 ,进行三维重构。LHC_Ⅱ复合物是由 6个单体组成的六元环 ,相邻 2个单体分别从膜的两侧插膜 ,方向相反 ,在膜区靠疏水 疏水相互作用成二聚体 ,3个相同的二聚体相互连接成六元环。

胡杨液泡膜微囊的纯化及其质子转运活性

为进一步研究液泡膜及 H+ - ATP酶在胡杨抵御盐胁迫中所起的作用 ,比较了研磨、捣碎和超声破碎三种细胞破碎方法 ,从悬浮培养的胡杨细胞中制备液泡膜微囊的效果 ;并用差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心纯化了胡杨液泡膜微囊 .通过测定 H+ - ATP酶对 NO-3 、VO3-4和 Na N3的敏感性 ,以及焦磷酸酶质子转运活性表明 ,液泡膜微囊主要分布在 0 %～ 2 5%的蔗糖界面上 .捣碎法破碎细胞结合差速离心和蔗糖密度梯度离心可获得正向微囊比例高。

乙醇辐解机理研究

本文研究了氧、温度和4-甲基-4-苯基-2-戊酮(Mpp)对乙醇辐解的影响。Mpp在实验使用的浓度范围内对乙醛的G值没有影响,G(2,3-丁二醇)值随Mpp浓度增加而下降,最后达0.9恒值。使用Mpp求得原初过程形成的G_(H_2)=1.9,动力学处理求得G_H=2.4,k_(12)/k_(11)=(11.9±1.8)×10~3。实验证明Mpp清除了体系中的H原子,抑制了CH_3CHOH自由基的形成,从而抑制了2,3-丁二醇的生成,但不影响乙醛的产额。这一研究否定了传统文献所述的在γ辐解乙醇时相当量的羟乙基自由基歧化反应生成乙醛。本文还对乙醇γ辐解机理进行了讨论,并求得了乙醇辐解的物料平衡。

胡杨液泡膜H^+-ATPase的部分纯化及其耐盐性研究

为了阐明液泡膜H+-ATPase在盐胁迫下的作用和适应性机制,对悬浮培养的胡杨细胞在50mmol/L盐浓度下处理10d,结果表明液泡膜H+-ATPase、焦磷酸酶的水解活性、质子泵活性增加。将通过差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心富积的液泡膜微囊先由脱氧胆酸钠(DOC)和n-辛基-β-D-葡萄糖(OG)分步破膜抽提,经蔗糖密度梯度离心分离,部分纯化的酶含V型H+-ATPase的主要亚基。

胡杨液泡膜微囊H^+ -ATPase质子泵活性研究(英文)

将悬浮培养的胡杨 (PopuluseuphraticaOliv .)细胞捣碎后 ,通过差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心获得富集液泡膜的膜微囊。通过连续监测吖啶橙的荧光淬灭研究膜微囊上H+_ATPase的质子转运特性。结果表明 ,质子转运依赖于ATP ,其表观米氏常数Km 值为 0 .6 5mmol/L。质子泵活性受pH和温度的影响较大。测定液pH值为7.5时 ,质子泵的活性最高 (测定温度选定为 2 2℃ )。一些二价阳离子可启动H+_ATPase的质子转运 ,其中Mg2 +的作用远高于Fe2 +。在实验条件下 ,Ca2 +、Cu2 +和Zn2 +均不能启动H+_ATPase的质子转运。质子跨膜转运还可被一价阴离子激活 ,激活作用的顺序为 :Cl->Br->I->F-。质子泵活性受NEM(乙基马来酰亚胺 )、DCCD (二环己基碳二亚胺 )、NO-3 和BafilomycinA1的强烈抑制 ,但对Na3VO4 和NaN3 不敏感。这些性质说明胡杨液泡膜微囊上的H+_ATPase属于囊泡型的ATPase。

乙醇-苯乙烯体系的辐解及α-羟乙基自由基反应动力学

γ射线辐照乙醇,通过苯乙烯抑制其辐解产物的研究,证明在乙醇介质中α-羟乙基自由基只进行重合反应,而无歧化反应;苯乙烯可与α-羟乙基自由基反应,其竞争反应为Sl+CH_3 CHOH→P 2CH_3CHOH→(CH_3CHOH)_2求得动力学方程为G'=G_0 k_6/2(k_7) 1/2 (G'/Dk')[Sl] G_0为纯乙醇γ射线辐照时2、3-丁二醇的产额,G_0=2.1,k_6/(k7)^(1/2)=0.53.假定k_7为扩散反应速率常数,则α-羟乙基自由基与丰乙烯加成反应的速率常数为k_6=4.0×10~4 L.mol^(-1).s^(-1).

低温诱导及Ca^(2+)信号对胡萝卜悬浮培养细胞抗冻蛋白的合成及细胞抗冻能力的影响

选择胡萝卜这种较抗冻的植物作为实验材料,在 MS+2.4D_1液体培养基中加入 Ca^(2+)阻断剂进行悬浮培养。对胞外提取物进行 SDS-PAGE 分析的结果表明,加 LaCl_3与加入 EGTA 处理的细胞样品共同存在一条低量表达的36 kD 多肽。且两者细胞的抗冻能力均有所下降。通过 Western-blotting 证实了这条36 kD 的多肽是一种抗冻蛋白,研究表明该抗冻多肽在低温条件下的合成、诱导与钙信号紧密相关。

乙醇敏化苯乙烯辐射聚合的研究

本文研究了乙醇对苯乙烯辐射聚合的影响,发现乙醇对苯乙烯的辐射聚合有敏化作用,经WAS方程计算,求得在γ射线照射下,苯乙烯的G_(ri)=0.1,G_(gi)=4.0;讨论了敏化机理,认为是质子转移过程, St^+·+C_2H_5OH→St·+C_2H_5OH_2^+产生了苯乙烯自由基,敏化了苯乙烯的聚合。

线粒体解偶联蛋白UCP2的研究进展

本文综述了线粒体解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)研究方面的进展。UCP2定位于线粒体内膜上,通过消散线粒体内膜的质子梯度调节线粒体的功能,包括线粒体内膜电位、ATP合成、呼吸链ROS产生、线粒体钙库的存储和释放等。目前,UCP2的质子漏机理并不清楚,但体内实验表明UCP2活性可被过氧化物激活。特别是近年来UCP2调控胰岛素分泌方面的研究取得了重要进展。

中草药的辐解

中药是我国的传统药物。一些中药也很易滋生细菌，ＥＴＯ消毒法因有残毒而不能应用于中药消毒。蒸汽消毒易使挥发性成分损失。γ射线冷消毒是一种很好的消毒方法，但需注意是否会导致有害成分的生成及药效成分的变化。中药主要成分辐射化学的研究有３个目的：（１）为药理和毒性试验作筛选。（２）模式体系研究能确定和推测新的化合物的形成，对预测药物辐照后的药理与毒理变化起重要作用。（３）寻找抑制药物分解的途径。

生物膜研究的一个难点与热点:内在膜蛋白三维结构的解析

１研究内在膜蛋白的三维结构的重要性象水溶性蛋白质一样，要深入了解膜蛋白的功能必须解析它们的三维结构。第一个水溶性蛋白质－肌红蛋白的三维结构的解析是由英国Ｋｅｎｄｒｅｗ于１９５７年用Ｘ－射线衍射法完成的，从而使他获得了诺贝尔奖。由于各种技术的日益发展与...

心肌肌浆网膜含有膜质微区结构(英文)

细胞膜质微区(microdomain)是细胞膜上特殊的结构域,在细胞信号转导和物质运输过程中起着非常重要的作用.绝大多数膜质微区来源于全细胞膜,即包括质膜和细胞器膜.最新研究表明细胞器膜如高尔基体膜也有膜质微区,因此分离了猪心肌浆网膜的膜质微区.首先获得了没有质膜污染的猪心肌浆网,用去污剂TritonX-100处理该肌浆网,获得了去污剂不溶的质膜微区(SR-DRM),该微区富集胆固醇和鞘磷脂.质膜微区的标记脂和蛋白质:神经节苷脂GM1和Caveolin-3也在该区富集.同时还研究了心肌浆网Ca2+-ATPase(SERCA2a)的分布,结果表明,相当数量的SERCA2a分布在膜质微区,并且有正常的生理功能.上述研究结果表明,在心肌浆网膜上有膜质微区的存在,进一步证明膜质微区不仅存在于细胞质膜,也普遍存在于细胞器膜.

猪心线粒体F_o的纯化、重建及其质子转运功能

比较了猪心线粒体FoF1 ATPase膜部分Fo 的四种纯化方法 .结果表明 ,用NaBr从亚线粒体除去FoF1 ATPase的水溶性部分F1 ATPase后 ,再以CHAPS增溶 ,并经蔗糖梯度离心 ,可获得高纯度的Fo.SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表明 ,纯化的Fo 含有b、OSCP (寡霉素敏感授予蛋白 )、d、a、e、F6、IF1、A6L和c等 9种亚基 .用去污剂稀释法将纯化的Fo 在脂质体上重建后 ,重建Fo 表现较高的被动转运质子活性 .这为在体外深入研究Fo 的活性、构象与膜脂的关系 ,以及Fo 与F1 ATPase的组装等提供了很好的实验模型 .

质膜Ca^2＋-ATPase的结构与功能

质膜Ca2+-ATPase(PMCA)是P型ATPase家族的一员,在真核细胞中主要负责信号刺激后胞内高浓度Ca2+的清除扫尾工作,并对维持静息状态下较低Ca2+浓度起着重要的调节作用.PMCA的一级结构已被确定,拓扑学结构显示,它有10个跨膜区和3个胞浆功能区.它的4个编码基因可产生4种亚型(PMCA 1~4),这些亚型在功能与分布上存在差异.PMCA的活性可被钙调蛋白等多种因素调节,这与其结构特征息息相关.近年来,PMCA已被证实与脂筏结构有一定关联,它在信号传导和细胞凋亡中的作用也成为目前科学研究的焦点.本文主要对PMCA的结构、亚型和功能的研究现状进行综述.

DOPE、DOPC对重组去脂肌质网Ca^(2+)-ATPase活力和构象的影响

经磷脂酶Ａ２ 去脂的肌质网Ｃａ２ ＋ － ＡＴＰａｓｅ 重组于不同比例的二油酰磷脂酰胆碱（Ｄｉｏｌｅｏｙｌｐｈｏｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ，ＤＯＰＣ） 和二油酰磷脂酰乙醇胺（Ｄｉｏｌｅｏｙｌｐｈｏｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ，ＤＯＰＥ） 形成脂酶体，研究了不同磷脂环境中Ｃａ２ ＋ － ＡＴＰａｓｅ 的ＡＴＰ 水解和Ｃａ２ ＋ 转运活力。结果表明，ＤＯＰＣ 和ＤＯＰＥ 分别有利于ＡＴＰ 水解和Ｃａ２ ＋ 的转运，ＤＯＰＥ 可以增强Ｃａ２ ＋ － ＡＴＰａｓｅ 的ＡＴＰ水解和Ｃａ２ ＋ 转运之间的偶联效率。利用内源荧光、荧光淬灭及Ｆｏｒｓｔｅｒ 能量转移原理测定Ｃａ２ ＋ －ＡＴＰａｓｅ 相应的构象变化， 发现随着ＤＯＰＥ／ ＤＯＰＣ 比例的改变使Ｃａ２ ＋ － ＡＴＰａｓｅ 构象发生相应的变化。

欧洲山杨液泡膜Na^+/H^+反向运输体的性质鉴定

植物液泡膜Na+/H+反向运输体可将细胞质中的Na+转运到液泡内储存,以减少胞内Na+的毒性.但木本植物如杨树是否有同样的机制目前还不清楚.以欧洲山杨的愈伤组织为材料,捣碎破碎愈伤组织细胞,经过差速离心和不连续蔗糖梯度离心得到纯化的欧洲山杨液泡微囊.通过液泡V-ATPase建立质子梯度,该液泡能够利用此梯度调控Na+的转运,表明液泡膜上存在Na+/H+反向运输体活性(表观米氏常数Km是11.4mmol/L).Na+/H+反向运输体的抑制剂——氨氯吡嗪咪能明显抑制转运体的活性.该Na+/H+反向运输体也可以转运K+,但亲和能力比Na+低30%.该结果首次证明木本植物的液泡膜上存在Na+/H+反向运输体.初步功能研究表明,愈伤组织在盐胁迫条件下,Na+/H+反向运输体活性明显下降,提示该机制可能与山杨不耐盐有关.

猪脑突触体质膜(Ca^(2+)-Mg^(2+))-ATPase的分离纯化与性质

以猪脑为材料 ,经匀浆、差速离心、蔗糖密度梯度离心分离突触体 .低渗破膜得到突触体膜 .TritonX 10 0增溶后 ,经钙调蛋白亲和层析可得去脂的质膜Ca2 + ATPase .用大体积亲和柱和大体积低Ca2 +淋洗液淋洗 ,可得产率、纯度和活性均较高的质膜Ca2 + ATPase .与大豆磷脂保温后 ,去脂的Ca2 + ATPase的水解活力可恢复达 3 32 μmol/ (mg·min) .SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳银染显示单一蛋白质带 ,分子质量约为 140ku ,纯度在90 %以上 .不同Ca2 +浓度明显影响酶的活力 .

THE EFFECT OF POLAR ADDITIVES ON THE γ RADIATION INDUCED POLYMERIZATION OF STYRENE

The γ induced polymerization of styrene in the presence of polar additives such as tributylphosphate, triethyl amine and ethanol was studied at dose rate of 5.0×10^(17) eV/ml. min. The re-sult shows that radiation induced polymerization of styrene was sensitized by the three kinds ofadditives at the approximate same rate and the experimental results were in agreement with thetheoretical calculation of WAS equation. The cause of sensitization is due to the proton transfer.

我国在生物医学中应用辐射加工技术的研究进展和展望

综述我国八十年代以来，辐射加工技术在生物医学中应用的研究进展：（１）生物医学材料或制品γ辐射消毒研究的进展；（２）利用辐射技术制备生物材料的进展。还讨论了应用前景及今后发展方向。