系统性红斑狼疮患者外周血CD_4^+CD_(25)^+ T细胞亚群的初步研究

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+T细胞亚群的比率改变。方法采用微量全血三色标记法,以流式细胞技术检测SLE患者外周血CD4+、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群,分析阳性细胞百分率和平均荧光强度(Meanfluorescenceintensity,MFI)。结果SLE患者外周血中CD4+T细胞百分率,活动期(29.29%±8.86)%和非活动期(29.55±8.96)%均低于正常对照(37.41±3.29)%(P均<0.05);CD4+CD25+T细胞百分率SLE活动期(10.30±5.60)%显著高于正常对照(5.39±1.43)%(P<0.05),非活动性SLE病人组(5.63±2.49)%和正常组差异无显著性(P>0.05);CD4+CD25+CD45RO+T细胞百分率SLE活动期(3.96±3.51)%显著高于正常对照(1.39±0.63)%,非活动期(0.75±0.66)%显著低于正常对照(P均<0.05)。平均荧光强度分析表明SLE患者组和正常组的CD25和CD45RO抗原密度差异并无显著性(P均>0.05)。结论SLE患者外周血中存在CD4+CD25+及CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群比率异常增高,且与病情活动性相关。

Ⅲ型胶原α链基因mRNA的表达与舌苔形成的关系研究

目的研究Ⅲ型胶原α链基因表达水平与舌苔形成之间的关系。方法应用基因芯片技术和实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测Ⅲ型胶原α链在不同舌苔中的表达水平。结果基因芯片显示,常见舌苔中Ⅲ型胶原α链表达水平差异有统计学意义;实时荧光定量PCR证实从高到低依次为:黄厚苔>白薄苔>白厚苔>无苔>黄薄苔>胎儿白薄苔。结论常见舌苔中,Ⅲ型胶原α链表达水平有差异,提示Ⅲ型胶原α链基因表达水平的调控在舌苔形成过程中可能有一定的意义。

基于GC-MS技术的脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织与血清代谢谱研究

目的探讨脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织和血清中差异表达的代谢物。方法采用Zea Longa改良栓线法构建大鼠脑中动脉栓塞(MCAO)模型,收集脑组织和血清,采用气相色谱-质谱(GC-MS)方法检测代谢物表达谱。利用OmicShare工具对代谢物进行聚类分析。运用主成分分析法(PCA)、最小二乘法-判别分析法(PLS-DA)结合t检验筛选得到差异表达的代谢物。进一步利用Metabo Analyst数据库对差异表达的代谢物进行通路分析。结果总共鉴定出105个血清代谢物以及95个脑组织代谢物。PLS-DA分析表明,假手术组和MCAO模型组血清和脑组织区分较好。假手术组相比,MCAO大鼠血清中尿素、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘露糖、尿素、苯丙氨酸以及蛋氨酸代谢物显著升高(P<0.05),与脯氨酸、丙氨酸、谷氨酸、肌醇、丝氨酸、丙三醇、亚油酸以及4-羟基脯氨酸显著降低(P<0.05)。MCAO模型大鼠脑组织丙氨酸、乳酸、尿素、亮氨酸、脯氨酸、缬氨酸、2-羟基异丁酸、异亮氨酸显著升高(P<0.05)。代谢通路分析结果表明,这些差异代谢物可参与部分氨基酸合成及代谢通路、亚油酸代谢通路、甲烷代谢通路、甘油酯类代谢通路及氨酰-tRNA生物合成等。结论脑缺血再灌注损伤脑组织与血清中存在差异表达的代谢物,可能参与脑卒中发病机制,为研发脑卒中的早期诊断标志物提供依据。

针药结合改善痴呆模型大鼠学习记忆能力的机理初探

目的 :探讨针药结合改善大鼠学习记忆能力的中枢胆碱能机制。方法 :测定大鼠大脑皮层乙酰胆碱酯酶活性 (AchE)和乙酰胆碱 (Ach)含量及跳台回避能力。结果 :东莨菪碱造模大鼠中枢胆碱能功能降低 ,学习、记忆错误次数增加 ,针刺、针药结合可拮抗东莨菪碱诱发的学习记忆障碍 ,提高乙酰胆碱的含量 ,降低AchE和Ach两者在脑组织中的比例 (AchE Ach) ,且针药结合作用更优。结论

盐酸川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨盐酸川芎嗪对大脑局灶性缺血再灌注模型大鼠的保护作用及可能的机制。方法:采用线栓法使大鼠先缺血30min再灌注120min制备模型,观察盐酸川芎嗪对模型大鼠星形胶质细胞、氧自由基、一氧化氮合成酶、细胞凋亡等的作用。结果:与假手术组相比,缺血再灌注组大鼠胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫染色呈强阳性,血清中NOS和诱导型NOS(iNOS)活性明显增强,血清和脑组织中SOD活力明显降低,细胞凋亡率显著增加。与缺血再灌注组相比,各川芎嗪治疗组大鼠GFAP免疫染色则呈阳性—弱阳性改变;川芎嗪小剂量组大鼠脑组织中SOD活力显著增加;川芎嗪大剂量组大鼠iNOS显著降低,血清和脑组织中SOD活力均显著增加,细胞凋亡发生率显著降低。结论:盐酸川芎嗪对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用,其机制可能与其清除氧自由基、抑制一氧化氮合成酶、抗细胞凋亡等作用有关。

超声空化增强川芎嗪对脑缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

川芎的生物活性成分(川芎嗪)已广泛应用于治疗心脑血管疾病。基于谷氨酸诱导PC12细胞损伤建立脑缺血再灌注损伤的细胞模型,探讨超声增强川芎嗪对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用机制。研究结果表明,超声能进一步加强川芎嗪对细胞的保护,其主要作用机制为:(1)抑制氧化应激和细胞凋亡相关的Bcl-2蛋白和Bax蛋白的变化从而达到抗凋亡的效果;(2)降低炎症因子(TNF-α和IL-8)的表达,减轻炎症反应损伤;(3)适当的声压可以增强川芎嗪对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用,但过高的声压会引起细胞损伤,导致细胞凋亡。本文的工作表明超声能够增强川芎嗪对脑缺血再灌注损伤的保护作用,为临床脑缺血再灌注损伤的治疗提供了新治疗策略。

针药结合改善痴呆模型大鼠学习记忆能力的机制研究(英文)

背景:胆碱能系统与行为学研究相结合,已被广泛应用于包括中医药在内的益智和治疗老年性痴呆的研究。目的:探讨针药结合改善大鼠学习记忆能力的中枢胆碱能机制。设计:随机对照的试验研究。单位:江苏省中医院检验科,南京中医药大学第二临床医学院。材料:实验于2000-10/2001-02在南京中医药大学实验动物中心完成,50只健康9个月龄SD雄性大鼠,体质量(300±10)g。方法:将大鼠随机分为5组:空白组、模型组、尼莫地平组、针刺组及针药组。测定鼠大脑皮质乙酰胆碱酯酶活性(AchE)和乙酰胆碱(Ach)含量及跳台回避能力。主要观察指标:①跳台测试结果。②大鼠皮质的AchE活性和Ach含量。结果:东莨菪碱造模大鼠中枢胆碱能功能降低,学习、记忆错误次数增加,学习和测试错误次数空白组为1.70±0.34,0.50±0.17,模型组为3.90±0.48,2.20±0.70。针刺、针药结合可拮抗东莨菪碱诱发的学习记忆障碍(错误次数分别为2.00±0.21,0.80±0.25;1.80±0.63,0.60±0.84),提高乙酰胆碱的含量,降低AchE和Ach两者在脑组织中的比例(AchE/Ach),且针药结合作用更优。结论:针药结合改善学习记忆能力的机制可能与中枢胆碱能有关。

脉络宁对大鼠大脑中动脉阻塞中风模型6-酮-PGF_(1α)和TXB_2的作用

脉络宁与常用治疗中风药钙拮抗剂尼莫地平比较，两者在降低死亡率、减轻神经系统损伤等方面疗效相近，与未治疗的模型组比较，均有显著的统计学差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。脉络宁大剂量（３．６ｍｌ／ｋｇ）除上述作用更显著外（与模型组比较，Ｐ＜０．０１），对梗塞引起的脑水肿也有显著的消除作用（Ｐ＜０．０５）。脉络宁有显著增加动物模型血浆中６－酮－ＰＧＦ１α的含量（小、大剂量皆Ｐ＜０．０１），并能使其血浆浓度显著高于正常动物（小、大剂量皆Ｐ＜０．０５）和显著降低血浆中ＴＸＢ２的含量的作用（与模型组比较，小剂量Ｐ＜０．０５，大剂量Ｐ＜０．０１）；

川芎嗪降低二甲酰胺诱导的PC12细胞凋亡

目的分析川芎嗪预处理大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株PC12细胞后二甲酰胺诱导的细胞凋亡情况,探讨川芎嗪治疗脑缺血再灌注损伤的机制。方法采用川芎嗪预处理PC12细胞后,制备二甲酰胺细胞损伤模型,通过CCK-8法活细胞检测、Hoechst-33342染色、流式细胞术和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)分析细胞凋亡发生机制。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数提高,细胞未见大量核固缩及凋亡小体形成,总体凋亡率降低,caspase 3、caspase 9活性降低,线粒体膜电位提高,Bax/Bc l-2比值降低。结论川芎嗪预处理后可以降低二甲酰胺诱导的PC12细胞凋亡。

非浓缩尿SDS-琼脂糖凝胶蛋白电泳的临床应用

目的 探讨非浓缩尿蛋白电泳对早期肾损伤诊断的应用价值。方法 对 5 5例患者尿液标本分别进行尿蛋白半定量及尿蛋白 (U Pr)、尿微量白蛋白 (mAlb)、N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶 (NAG) ,β D 半乳糖苷酶(GAL)定量测定 ,与非浓缩尿的十二烷基磺酸钠 琼脂糖凝胶蛋白电泳 (SDS AGE)结果进行分析比较。结果 与SDS AGE结果相比较 ,尿常规及全自动生化仪定量测定有关指标的灵敏度相对较低。结论 SDS AGE检测灵敏度高 ,方法简便 ,省时 ,扫描后可得半定量结果 ,且结果较直观 ,对早期肾损伤诊断有较大的应用价值。

痛痹颗粒及拆方的含药血清对硝普钠诱导软骨细胞凋亡的实验研究

目的观察痛痹颗粒及其拆方对软骨细胞的保护作用。方法采用2 mmol/L硝普钠(SNP-NO供体)诱导软骨细胞凋亡,观察痛痹颗粒及拆方的含药血清对软骨细胞凋亡的保护作用。结果痛痹颗粒及其拆方(补肝肾方、活血化瘀方、祛风湿方)含药血清组凋亡率明显低于模型组及空白组(P<0.01)。结论痛痹颗粒及其拆方的含药血清均对硝普钠所诱导的软骨细胞凋亡具有保护作用。

基于递归量化观测的复合材料损伤贝叶斯估计方法

针对复合材料损伤定位定量识别中损伤指数构建困难与损伤预测的不确定性问题,提出一种基于递归量化特征观测的损伤状态贝叶斯概率估计方法。该方法无需基准无损信号参考与损伤波包识别,采用Lamb波信号的递归量化分析(RQA)特征,从结构非线性动力学角度对复材板内部损伤进行观测,根据特征与损伤位置大小的相关性与单调性进行了敏感特征筛选。根据各传感路径信号的RQA特征与损伤形态参量间的线性/非线性关联特性,采用多变量二次交互模型建立了损伤状态的特征描述空间。综合考虑各传感路径中RQA特征对损伤观测的不确定因素,建立了复材板损伤状态的观测模型,采用贝叶斯更新算法对复材板损伤位置尺寸进行估计。复材板的脱层损伤仿真分析结果表明,本文提出方法无需分析结构损伤与Lamb波的复杂交互机制,就能同步实现复材板内部损伤的量化评估与定位分析,估计出的损伤位置大小在仿真模型的损伤参数设定值的75%置信区间内,损伤估计成像区域与仿真损伤区域相符合。复合材料板的疲劳损伤试验分析结果表明,采用本文方法经过24次迭代更新后,得到的损伤面积与大小完全覆盖了X射线扫描检测的真实损伤。该方法充分考虑了复材板损伤评估中的不确定因素,更加贴合复合材料结构损伤检测与评估的工程实际应用,具有较好的应用前景。

醒脑静干预SLE小鼠继发狼疮脑病的实验研究

目的观察醒脑静对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠继发狼疮脑病进程的干预,初步探讨其干预机制。方法 SLE模型小鼠醒脑静腹注给药,4个月后行MRI扫描、学习记忆行为测定及脑组织病理分析;RT-PCR、免疫组化分析脑组织血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达情况。结果醒脑静改善了模型小鼠脑部出血、炎症、水肿等症状,增强了小鼠的记忆能力;调低了脑组织中VCAM-1蛋白表达水平。结论醒脑静有效干预了SLE模型小鼠继发狼疮脑病进程,调控VCAM-1表达可能是其干预机制之一。

RNA干扰抑制Fas基因的表达对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3的影响

目的用RNA干扰(RNAi)技术抑制小鼠Fas基因表达,观察其对脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖及FADD-FLIP-TRAF-NF-κB信号传导途径的影响,为后续FasL低剂量兴奋效应研究提供实验基础。方法设计合成靶向小鼠Fas基因的小干扰RNA(siRNA)片段,用脂质体包埋转染bEnd.3细胞;CCK-8法检测细胞增殖;RT-PCR检测bEnd.3细胞Fas mRNA的表达情况;western blot检测Fas、FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平。结果 CCK-8法检测显示,Fas-siRNA组细胞增殖水平与空白对照组比较,无统计学差异(t=1.805,P>0.05);RT-PCR结果表明,与空白组的Fas mRNA表达水平比较,Fas-228-、Fas-310-、Fas-427-、Fas-891-siRNA组mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(F=123.127,P<0.05);western blot显示,Fas-siRNA组与空白对照组Fas蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(t=12.101,P<0.01);Fas-siRNA组FADD、FLIP、TRAF蛋白相对表达水平与空白对照组比较,表达均下调(t=28.315、17.563、8.903,P<0.05)。结论 Fas-siRNA能有效封闭Fas基因的表达,抑制Fas下游信号FADD、FLIP、TRAF蛋白表达。

川芎嗪通过干预Bax/Bcl2平衡调控Caspase9途径抑制谷氨酸诱导的PC-12细胞凋亡

目的:通过制作谷氨酸诱导的PC-12细胞损伤模型,进一步探讨川芎嗪影响凋亡的作用机制。方法:应用细胞毒性试验,确定细胞模型中谷氨酸浓度;进而,应用不同浓度的川芎嗪同时处理PC-12细胞,采用荧光燃料Hoechst-33258染色直接观察细胞核的改变,采用流式细胞术检测细胞凋亡和Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9活性,最后应用实时荧光定量RT-PCR检测Bax和Bcl2转录水平。结果:谷氨酸具有细胞毒性,其半数抑制浓度(ID50)是21.72mmol/L;川芎嗪呈剂量依赖性的提高细胞存活率。谷氨酸诱导的PC-12细胞以中晚期凋亡为主,但川芎嗪处理后,PC-12细胞凋亡率显著降低(P<0.05),且以早期凋亡为主。川芎嗪处理谷氨酸细胞模型后,Caspase-8活性未见显著改变(P>0.05),但在1mmol/L和10mmol/L川芎嗪干预组,Caspase-3和Caspase-9活性显著降低,同时伴随Bax/Bcl2比值显著降低(P<0.05)。结论:谷氨酸通过Caspase9而不是Caspase8途经活化Caspase3诱导凋亡;川芎嗪通过干预Bax/Bcl2平衡调控Caspase9途径抑制谷氨酸诱导的PC-12细胞凋亡。

慢性浅表性、萎缩性胃炎与胃癌患者血清微量元素测定及其临床意义

测定了８４例慢性浅表性胃炎、６８例慢性萎缩性胃炎及２７例胃癌患者和１０６例健康人的血清Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｇ、Ｃａ的含量。结果表明：（１）慢性浅表性胃炎组与正常组相比，Ｚｎ、Ｆｅ下降（Ｐ＜０．０１），Ｃｕ轻度升高（Ｐ＜０．０５）；而慢性萎缩性胃炎组的血Ｚｎ又比慢性浅表性胃炎组低（Ｐ＜０．０５），Ｆｅ、Ｃｕ也有所下降；胃癌患者的Ｚｎ、Ｆｅ、Ｃａ显著低于慢性萎缩性胃炎患者（Ｐ＜０．０１），血清Ｃｕ明显高于慢性萎缩性胃炎患者（Ｐ＜０．０１）。（２）慢性萎缩性胃炎患者男、女组间仅Ｍｇ元素有差异（Ｐ＜０．０１）；≤５０岁的患者较＞５０岁的患者血清Ｚｎ高（Ｐ＜０．０１）。

构建以学生为中心的微生物与免疫学教学体系

微生物免疫学是医学院校各专业的一门公共基础课程,对于培养现代化人才具有十分重要的意义。以"教"为中心的传统教学模式弊端日显,为调动学生学习积极性与主动性,培养学生创新能力,对微生物免疫学理论与实验教学内容、方法进行改革,创建以学生为中心顺应现代化发展的新教学体系已成为必然趋势。

OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪性能的评价

对日本 OLYMPUS生产的 AU2 70 0全自动生化仪的基本结构作了简要介绍 ,并对该机进行了基本性能评价。

低剂量FasL诱导bEnd.3细胞增殖及机制研究

目的探讨低剂量FasL诱导小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖及其可能机制。方法以500～0.015 6ng/mL 1/2倍比稀释共9个浓度梯度FasL干预bEnd.3细胞培养48h,CCK-8检测bEnd.3细胞增殖能力,ELISA检测bEnd.3细胞分泌表达VEGF能力,RNAi抑制Fas表达,Western blotting检测FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平,EMSA检测NF?κB蛋白表达水平。结果 0.156ng/mL FasL干预bEnd.3细胞,可诱导细胞增殖明显增加(P<0.05),bEnd.3细胞分泌表达VEGF能力明显增加(P<0.05),FADD、FLIP、TRAF、NF?κB蛋白表达水平明显增加(P<0.05);RNAi抑制Fas基因后,细胞增殖无明显变化(P>0.05),FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平明显下降(P<0.05),NF?κB蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。结论低剂量FasL可诱导bEnd.3细胞增殖,FADD-FLIP-TRAF-NF?κB信号传导途径是其机制之一。

基于Lamb波高阶JS散度的铝合金板损伤定征方法

针对高速列车车体铝合金构件疲劳损伤的在线检测问题,提出一种基于Lamb波时频高阶JS散度的铝合金裂纹损伤量化评估方法。采用基于相空间重构的奇异值分解方法对Lamb波传感信号进行噪声抑制,利用归一化窗S变换分析损伤信号的时频域瞬态能量分布特征。为了更深层次地揭示Lamb波损伤信号在时间维度与频率维度的非线性分布特性,提出信号时域与频域的n阶矩计算方法,采用损伤信号与无损信号间的时频高阶JS散度距离作为损伤指数对铝合金板的疲劳损伤进行量化评估,并分析高阶JS散度距离与铝合金板疲劳裂纹密度间的线性相关性。有限元仿真和铝合金板的疲劳损伤检测试验结果表明,本文提出的方法对铝合金薄壁件早期裂纹具有较高的敏感性,对疲劳裂纹损伤具有较好的量化表征能力。该方法无需进行Lamb波在复杂构件中传播机理分析与损伤波包识别,简单高效,可操作性强,在高速列车车体复杂结构损伤评估中具有较好的应用前景。