泡桐丛枝病类菌原体DNA的分子克隆与序列分析

以部分纯化的泡桐丛枝病类菌原体为材料，抽提ＤＮＡ，进行ＥｃｏＲ Ⅰ－Ｈｉｎｄ Ⅲ双酶切，回收的ＤＮＡ 片段插入到载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋ ）中，转化Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ ５α。经双重杂交初筛以及Ｄｏｔｂｌｏｔ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交的回交确证，获得两个仅与患丛枝病泡桐总核酸有杂交而与健康对照无杂交的克隆（Ａ４，１．６９ ｋｂ；Ｃ４２，２．０８ ｋｂ）。部分测序的结果表明：Ａ４ 和Ｃ４２插入片段中Ａ＋Ｔ含量分别为７２．５％ 和６７．９％ 。

肝硬化门脉高压症合并胆道疾病的手术治疗

目的探讨肝硬化门脉高压症患者胆道疾病手术治疗的适应证和术中及术后处理方法。方法手术治疗肝硬化门脉高压症合并胆道疾病患者27例。结果出血量在20～3 300 ml之间,2例静脉曲张严重者分别出血500 ml,3 300 ml。7例出现腹水,经保肝、利尿治疗后,腹水消退;肝功能不全2例,其中1例死亡;切口感染2例;肺感染1例;上消化道出血1例,原因为应激性溃疡。结论严格掌握手术适应证,术中重视手术技巧,术后加强保肝、抗感染及支持治疗,肝硬化门脉高压症患者行胆道手术是安全可行的。

恶性胆道梗阻致肝内胆管自发破裂治疗体会(附1例报告)

由于恶性肿瘤导致的胆道梗阻称为恶性胆道梗阻,本科收治一名恶性胆道梗阻患者,术前出现肝内胆管自发破裂,现将其诊治情况及体会报道如下.

胆道支架放置术治疗恶性梗阻性黄疸的体会

目的探讨胆道支架放置术治疗恶性梗阻性黄疸的安全性和有效性。方法采用自膨式胆道支架放置术治疗恶性梗阻性黄疸78例病人。术前实验室检查血总胆红素为(362.4±106.7)μmol/L,以直接胆红素升高为主[(271.9±74.3)μmol/L]。结果所有病例均成功放置支架,术中、术后无因操作原因致死病例,1～4周黄疸完全消退68例,血胆红素降到正常水平,10例血胆红素平均降至65.2μmol/L;并发症以胆道感染为主。结论胆道支架放置术治疗恶性梗阻性黄疸有效、安全。

胰十二指肠切除术围手术期并发症分析

目的 探讨5年来实施的50例胰十二指肠切除术围手术期并发症。方法 应用胰十二指肠切除术治疗壶腹周围癌患者50例。结果 全组围手术期死亡率0％,并发症发生率26％（13/50）,并发症中以切口感染发生率最高10％（5/50）,严重并发症为多脏器功能衰竭（MOF）、成人呼吸窘迫综合征（ARDS）等。结论 虽然胰十二指肠切除术术后并发症发生率仍然较高,如对解剖结构熟悉,提高手术技巧及熟练程度,应用胰腺导管引流、TPN及重症监护呼吸机等新技术,可减少其严重并发症。

利用RT-PCR扩增和分析柑桔裂皮病类病毒

参考国外CEVd-A株中央保守区段(C区)和左端区段(T区),设计并合成引物Cl(-)、C2(+)、C3(+)、T1(-)、T2(+)。对感染 CEVd中国分离物的柑桔(Citrus L.)和香橼(Citrus medica L.)总核酸进行了cDNA第一链合成和PCR扩增,其中C1/C3、C1/C2分别能从感病香橼和柑桔总核酸中扩增出210bp和370bp左右的特异DNA,分别相当于CEVd的左半部和全长片段,T1/T2未能扩增出产物;健康香橼和柑桔总核酸中均未能扩增出产物。扩增结果用DIG标记的CEVd-cDNA探针进行了确证。扩增结果说明:CEVd中国分离物在左端T区与CEVd-A株存在差异。PAGE-银染法分析扩增产物表明:建立的RT-PCR方法可从约0.1ng柑桔总核酸中扩增出全长CEVd-cDNA。

生物素肼化学标记和DIG标记cDNA探针检测柑桔裂皮病类病毒

分别用生物素肼化学标记和ＤＩＧ标记我国柑桔裂皮病类病毒（ＣＥＶｄ）全长克隆ｃＤＮＡ，用以上探针对不同来源的核酸样品进行斑点杂交。两种探针可检出病柑桔总核酸的最低含量约为４００ｎｇ／斑点和８０ｎｇ／斑点；生物素肼标记ＣＥＶｄ－ｃＤＮＡ探针，可检出ＣＥＶｄ－ｃＤＮＡ的最低含量约为１０ｐｇ／斑点。研制的ＣＥＶｄ检测试剂盒能检测出发病和隐性带毒苗木中的ＣＥＶｄ，灵敏、特异、简便、快速、试剂盒已被用于检测来自我国主要裂皮病病区、湖南、湖北、福建等地的柑桔和香橼材料。

泡桐丛枝病类菌原体单克隆抗体的研制及初步应用

以部分纯化的泡桐丛枝病原类菌原体为抗原,免疫6周龄BALB/C雌鼠,取其脾细胞与鼠骨髓瘤细胞SP2/O融合。从4次融合产生的459个杂交瘤细胞克隆中,用部分纯化的泡桐丛枝病类菌原体和同样方法制备的健康泡桐抽提物分别为检测抗原,以间接ELISA法双重筛选,获得稳定分泌抗泡桐丛枝病类菌原体的杂交瘤细胞2株。用奥氏琼脂双扩散法检测该2个抗体分属Ig G2a和Ig G3两亚类。该二杂交瘤细胞腹水抗体效价以间接ELISA法测定均超过1.6×10~4。用斑点酶联免疫法检测抗原时,最小检出量为10 ng。初步应用于几种类型样品的检测,结果所有的有病症植株全部阳性,并检出隐性带毒植株,进一步证实该2单克隆抗体确系泡桐丛枝病类菌原体的单抗。

食品工程专业课程“三体”式工程伦理教育模式探析——以“酿造酒工艺学”为例

在大部分高校的食品工程专业中都缺少工程伦理教育,单独设置一门工程伦理课程并不是一个有效的解决办法。在食品工程专业课程中,以“酿造酒工艺学”为例,从体现、到体会、再到体验“三体”式层层递进,开展融入工程伦理教育模式探索。课程设计中“体现”工程伦理,对课程任务中的伦理教育有了更严格的要求;一体化教学“体会”工程伦理,对老师的职业素质要求有了新的定义;实习实训“体验”工程伦理,对学生亲身经历体验社会伦理责任感有了完整的验证和诠释。“三体”式逐层加深,实现了将工程伦理教育渗透到食品专业课程中。

小切口胆总管探查术后I期缝合的临床应用

目的 :探讨小切口胆总管切开取石后I期缝合的疗效及适应证。方法 :选择58例胆总管结石患者 ,常规经右上腹腹直肌开腹 ,切口长度6～8cm ,于十二指肠上方纵行切开胆总管 ,长度以结石大小而定 ,一般在2cm以内 ,胆总管切开取石后不放置T型管 ,以胆道镜探查胆道黏膜情况及结石 ,以取石钳及纤维胆道镜网篮取净结石 ,并确认远端通畅无残余结石及狭窄 ,应用5_0的可吸收胆肠吻合线I期缝合。结果 :所有病例均无胆瘘发生 ,术后平均住院时间为 (5 5±1 5)d ,具有住院时间短、痛苦小 ,并发症少、恢复快等优点。结论 :在严格掌握适应证前提下 ,胆总管切开取石后行I期缝合是可行的。

浅议高职物流课程的仓储实训教学

随着我国物流业的高速发展,高等职业院校的物流的人才培养已远远不能达到物流企业对人才的要求,多元化、高技能、高素质的物流专业人才的培养已经引起国家有关部门的高度重视。高等职业院校的物流课程的实训教学本着以学生的就业为导向,不仅以培养技能为目标,而且以培养高素质劳动者作为最终目标。但是如果物流实训教学内容的选择、物流实训课程的设计与实训教学实施水平等存在差异的话,都将直接影响学生掌握技能操作的程度和综合素质的养成。因此,我们在学习借鉴别人教学模式的同时,探索符合自身情况的物流实训教学模式,具有现实意义。

中西医结合治疗肝脓肿40例

目的 :中西医结合与纯西医治疗肝肿疗效比较。 方法 :采用我院肝胆外科自 1993年～ 1999年治疗细菌性肝脓肿的 6 0例病例 ,随机分为两组 ,用中西医结合 (治疗组 )和单纯西医方法 (对照组 )治疗。结果 :治疗组和对照组有效率分别为 95 %和 70 % ,经统计学处理 P<0 .0 5两组疗效比较有显著性差异 ,结论

普通超声探头引导下胆道置管引流的临床应用

目的评价普通超声探头引导经皮经肝胆管穿刺置管引流术(PTCD)的临床价值。方法应用彩色超声诊断仪,普通3.5MHz探头,对73例梗阻性黄疸患者行经皮经肝胆管穿刺置管引流术。结果73例中一次性成功70例(95.9%),其中2例因引流管脱落而先后行再穿刺;3例首次穿刺失败,再次穿刺成功。62例为姑息性治疗,患者带管生存。11例行PTCD术后,黄疸消退再行外科手术治疗。结论PTCD术前减黄及对不能切除的晚期恶性肿瘤引起的阻塞性黄疸患者,既可以改善症状,又可延长生命。同时使用普通探头引导,使PTCD术更加灵活、准确、安全、实时,是固定不动的穿刺探头所不能比拟的。

开滦范各庄煤矿地质特征及F_0断层富水性

断层发育特征及其富水性的确定,多少年来人们主要靠地面钻探及井下揭露获得信息,继而提出矿井防治水措施。笔者根据采区三维地震成果,并结合瞬变电磁法成果,对贯穿开滦矿务局范各庄煤矿南一、南二、南三、南四四个采区的F0断层进行了研究。主要对该断层的发育特征及其富水性进行了探讨与评价,其成果可为拟定煤矿防治水方案提供较全面可靠的设计依据。