γδT细胞在感染性疾病中的研究进展

T细胞免疫应答在感染性疾病中发挥着抗感染和清除外来病原微生物的重要作用。根据TCR两条肽链构成的不同,可将T细胞分为αβT细胞和γδT细胞,αβT细胞在获得性免疫应答中发挥重要作用;而γδT细胞由于其分布特点和应答的非MHC限制性,在固有性免疫中发挥着独特的作用。随着研究的深入,其在获得性免疫应答中的作用也逐渐被揭示。

小鼠IL-17A-GST融合蛋白的克隆表达

目的:构建含有小鼠IL-17A(mIL-17A)基因的重组原核表达载体,获得高效表达mIL-17A的基因工程菌,以及较高产量的mIL-17A蛋白。方法:以PMA活化后小鼠脾脏单个核细胞的总RNA逆转录合成的cDNA为模板,PCR法扩增mIL-17A的编码序列,并分别亚克隆至pMD18-T载体和原核表达载体pGEX-4T-1中,经酶切和DNA测序鉴定后,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,产物经SDS-PAGE及Westernblot鉴定。结果:PCR产物大小及其双酶切鉴定均证明所克隆的基因是mIL-17A,DNA序列测定进一步证实与GenBank报道的序列完全一致。成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1/mIL-17A,并在大肠杆菌中高效表达出相对分子质量(Mr)约40000的具有可溶性的融合蛋白,且Westernblot证实确为目的蛋白。结论:成功构建了基因重组体pGEX-4T-1/mIL-17A;并制备出可溶性IL-17A-GST融合蛋白。

ORACLE中随机条件统计的实现

在ORACLE数据库管理系统中,SQL*FORMS是一个很有用的实用程序。利用它可以方便地进行数据库的录入、修改、删除、查询,也可以容易地得出条件字段个数固定的统计数据,但对随机条件的情况,即条件字段个数不固定时,要得到统计数据就有一定的困难,虽然通过用户出口的方式可以实现这个功能,但程序占用的内存很大,而且在ORACLE中用户出口方式的汉化没有进行,因此在微机汉字环境下不能采用。作者在开发软件时,利用触发器实现了随机条件的统计。