MTHFR基因多态性对骨肉瘤患者首次应用大剂量甲氨蝶呤后不良反应的影响

目的探讨MTHFR基因多态性对骨肉瘤患者首次应用大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)后不良反应的影响。方法采用前瞻性研究方法。选择东部战区总医院53例首次入院进行HD-MTX治疗的骨肉瘤患者,根据其人口学因素及MTHFR基因中rs1801133位点的基因多态性确定HD-MTX给药剂量并进行全程化药学监护,收集第1个化疗周期后该药的肝、肾、血液毒性和胃肠道反应数据。采用单因素分析和二元Logistic回归分析对MTX给药剂量、24 h血药浓度、rs1801133位点基因型与上述4种不良反应之间的相关性进行分析。结果CC野生型患者的MTX给药剂量显著高于TT突变型患者(7.97 g/m2 vs.6.98 g/m2,P=0.030),但这种差异不影响MTX的0 h和24 h血药浓度。上述4种不良反应与MTX的给药剂量无相关性。二元Logistic回归分析结果显示,每携带一个T等位基因,患者发生血液学毒性的风险会升高4.13倍(95%置信区间为1.35~12.62,P=0.013)。当MTX 24 h血药浓度阈值设定为2.65μmol/L时,肝功能损害预测的灵敏度为53.33%,特异性为86.96%;当该阈值设定为7.28μmol/L时,肾功能损害预测的灵敏度为100%,特异性为81.63%。结论MTHFR基因中rs1801133位点的基因多态性与MTX的血液学毒性相关;首次应用HD-MTX并且携带T等位基因的患者,其血液学毒性风险较高。MTX 24 h血药浓度与该药的肝、肾毒性相关,监测患者的MTX 24 h血药浓度可以预测肝、肾毒性并及早采取干预措施。

液相色谱-串联质谱法监测不同负荷方案替考拉宁治疗骨髓炎患者的血药浓度比较

目的建立并验证液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测替考拉宁血浆浓度,并分析我院不同负荷方案骨髓炎患者的替考拉宁谷浓度(C_(min))达标情况。方法建立LC-MS/MS法测定替考拉宁的C_(min),考察方法的专属性、标准曲线、精密度与回收率、基质效应和稳定性。收集43例接受替考拉宁治疗的骨髓炎患者,根据给药方案不同分为2组:试验组A患者接受3次负荷剂量400 mg,q12h,试验组B患者接受6次负荷剂量400 mg,q12h,同时进行治疗药物监测(TDM)。两组均于第4天维持剂量给药前30 min采样,检测患者替考拉宁C_(min)值,比较两组替考拉宁C_(min)达标情况。结果血浆中替考拉宁标准曲线方程为Y=0.0324X+0.000886(r=0.9964),在0.20~50.00μg·m L^(-1)内线性关系良好;质控样本的准确度为94.71%~112.50%内;日内、日间RSD为3.17%~15.19%;提取回收率为81.22%~91.26%;基质效应为93.54%~119.78%。临床应用中,试验组A负荷剂量后替考拉宁平均C_(min)为(8.32±4.76μg·mL^(-1),C_(min)≥10μg·mL^(-1)比例仅为25.90%;试验组B负荷剂量后替考拉宁平均C_(min)为(19.58±7.78)μg·mL^(-1),16例患者C_(min)均≥10μg·mL^(-1);两组平均C_(min)差异有统计学意义(P<0.0001)。结论建立的LC-MS/MS方法适用于替考拉宁常规TDM。临床应用中,低频次负荷方案下替考拉宁C_(min)达标情况较差,而TDM指导的高频次负荷方案下替考拉宁C_(min)达标情况更优。研究表明替考拉宁TDM的重要性,尤其是针对感染高危患者人群。

他克莫司个体化用药指南解读

他克莫司体内过程个体差异大,治疗窗窄,给药剂量难以掌握。为保证其临床实践中安全、有效及合理应用,已有许多国家和地区发布了他克莫司用药的相关指南;但这些指南仅针对特定疾病和人群,具有一定的局限性。文中对相关指南进行解读和分析,并结合他克莫司药物基因组学与治疗药物监测的最新研究进展,归纳整理适合中国人群的他克莫司个体化用药方法,进一步完善他克莫司在临床上的合理使用。

肺癌患者使用帕博利珠单抗致免疫相关肺炎的药学监护

临床药师参与1例肺癌患者使用免疫检查点抑制剂(ICPIs)帕博利珠单抗致免疫相关性肺炎的治疗过程,通过文献复习分析不良反应的原因、梳理治疗过程,对治疗方案提出药学监护建议,以期为临床用药提供参考意见,有利于提高患者药物治疗的安全性和有效性。

临床药师对1例骨肉瘤患者术后假体周围感染的药学监护

目的:探讨临床药师在骨肉瘤患者术后假体周围感染(PJI)个体化治疗中的作用。方法:我院收治了1例骨肉瘤患者,术后出现PJI,临床药师根据患者病原学和药敏结果对其初始抗感染方案进行调整并进行药学监护,根据抗菌药物药动学-药效学(PK-PD)原理,结合治疗药物监测(TDM)进行抗菌药物剂量调整。当患者出现药品不良反应时,临床药师再次调整用药方案。结果:该患者明确PJI诊断后首先给予头孢替安进行经验性治疗;在获得病原学和药敏结果后,临床药师建议换用对耐苯唑西林表皮葡萄球菌敏感的万古霉素进行针对性抗感染治疗,根据稳态谷浓度调整给药剂量后,患者出现轻度肝功能损伤,同时伴有胸闷气促等症状,临床药师分析后考虑为万古霉素相关药物不良反应,再次建议换用替考拉宁进行治疗。医师采纳临床药师建议更换治疗方案后,患者PJI得到有效控制,且不良反应症状消失,最终痊愈出院。治疗期间,临床药师还针对患者所用药品进行用药教育。结论:临床药师需熟练掌握抗菌药物PK-PD原理,积极运用TDM技术手段对抗感染药物的临床疗效和安全性进行动态评估,从而为骨肉瘤术后PJI患者制订个体化抗感染药物治疗方案,提高临床治疗效果,保障用药安全。

利伐沙班治疗儿童肿瘤相关性血栓1例报告

目的:验证利伐沙班用于儿童肿瘤相关性血栓抗凝治疗的安全性与有效性。方法:临床药师全程参与1例7岁骨肉瘤患儿中心静脉导管相关性血栓的抗凝治疗药学监护,为其制定个体化的利伐沙班(5 mg,bid)抗凝方案,并通过抗凝门诊监测凝血酶原时间(PT)指标和利伐沙班谷质量浓度,随访抗凝的安全性和有效性。结果:利伐沙班抗凝1个月后患儿左上肢血栓消失,期间监测PT平均值为(12.33±0.88)s,利伐沙班谷质量浓度平均值为(24.67±7.42)ng·ml^-1,均在参考范围内,未出现新发血栓或出血症状。结论:利伐沙班可作为肿瘤相关血栓患儿口服抗凝治疗的一种选择,联合监测血药质量浓度和PT可在一定程度上保证这一特殊人群用药的安全性及有效性。

焦磷酸测序法在幽门螺杆菌克拉霉素耐药基因检测及药物疗效评价中的应用

目的本研究建立了幽门螺杆菌(Hp)克拉霉素耐药基因检测的焦磷酸测序方法,在获知耐药情况的同时根据半定量结果初步评估治疗效果。方法通过考察最合适的扩增引物、体系、退火温度建立最优的PCR扩增体系。分别对方法的灵敏度,特异性及一致性进行了评价。通过对44例临床标本的检测,比较本方法与快速尿素酶试验和13 C呼气试验的检出率。结果最优的PCR扩增体系为HiFi体系,最佳退火温度为59.8℃。本方法特异性良好,灵敏度达到100 copies/μL,与Sanger测序结果100.0%一致。36例标本快速尿素酶和焦测序法的检出率分别为48.7%和81.1%,耐药率为10.81%。8例标本13 C呼气试验和焦测序法的检出率分别为75.0%和87.5%,阳性标本检出一致率为100.0%。结论焦测序检测方法具备灵敏度高、快速、半定量的特点,为临床Hp克拉霉素耐药检测及初步疗效评价提供了一种新的方法。

基于级联核酸侵入反应的real-time PCR法检测咽拭子样本中UGT1A1*6基因多态性

伊立替康(irinotecan)不良反应与UGT1A1*6单核苷酸多态性相关,目前应用的单核苷酸多态性检测方法具有耗时长、开盖易污染、操作繁琐等缺点,因此需建立一种操作简便且不易污染的适合临床应用的新方法。本研究利用3种已知基因型的DNA样本建立基于级联核酸侵入反应的real-time PCR法检测UGT1A1*6多态性的最佳反应体系,并对其检测口腔咽拭子样本的灵敏度和准确性进行了考察。结果显示,本文成功建立了基于级联核酸侵入反应的UGT1A1*6基因多态性检测方法,可用于咽拭子样本的分型检测,其灵敏度达到6 ng DNA,分型准确性达到100%。因其取样方便对人体无创,单管闭管检测不易产生交叉污染,具有用于临床检测伊立替康的个体化用药相关UGT1A1*6基因多态性的潜力。

LC-MS/MS法测定骨肉瘤患者血清中甲氨蝶呤及其代谢产物7-羟基甲氨蝶呤的浓度

目的:建立测定人血清中甲氨喋呤及其代谢产物7-羟基甲氨喋呤浓度的LC-MS/MS法,并应用于骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤化疗后的治疗药物监测,为临床合理用药提供依据。方法:以氨基蝶呤作为内标,血清样品经含内标甲醇沉淀蛋白处理。色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C_(18);柱温35℃;流速0.4 mL·min^(-1);流动相为含0.1%甲酸的水溶液和含0.1%甲酸的乙腈溶液,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM扫描,监测甲氨蝶呤m/z 455.098→308.000,7-羟基甲氨喋呤m/z 471.187→324.100,氨基蝶呤m/z 441.198→294.100。结果:甲氨蝶呤浓度在2~1000 ng·mL^(-1)(r=0.9985),7-羟基甲氨蝶呤浓度在20~10000 ng·mL^(-1)(r=0.9984)与峰面积线性关系良好。甲氨蝶呤、7-羟基甲氨蝶呤日内及日间RSD≤6.21%。甲氨蝶呤、7-羟基甲氨蝶呤的平均回收率分别为102.83%~119.34%、88.41%~95.37%。结论:本方法简便、准确、快速,适用于甲氨喋呤及其代谢产物7-羟基甲氨喋呤的血药浓度测定。

多学科参与的1例大剂量甲氨蝶呤排泄延迟骨肉瘤患者的药学监护

目的通过大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)治疗骨肉瘤时出现排泄延迟的个体化治疗实践,探讨HD-MTX治疗骨肉瘤排泄延迟解救的个体化治疗。方法临床药师通过基因检测预测MTX给药方案、排泄延迟及不良反应风险,多学科联合协同进行HD-MTX化疗的骨肉瘤患者进行药学监护。通过监测MTX血药浓度指导亚叶酸钙解救,针对导致MTX排泄延迟的原因(药物相互作用、尿液pH、尿液量等),采取应对措施。结果患者进行HD-MTX化疗过程中出现排泄延迟及急性肾损伤(AKI),可能与患者水化量、基因型等因素相关。结论骨肉瘤患者行HD-MTX化疗前应进行基因检测,医生根据基因型制定个体化治疗方案,并在化疗过程中及时监测MTX血药浓度、肝肾功能及影响MTX排泄的因素。对MTX排泄延迟患者实施个体化解救,在保持化疗效果的同时避免MTX毒性蓄积,可为同类患者的MTX个体化治疗提供借鉴。

一例儿童骨肉瘤患者截肢术后镇痛治疗的药学监护

目的探讨临床药师在儿童患者术后镇痛治疗过程的药学监护作用。方法临床药师对一例儿童骨肉瘤患者截肢术后进行药学监护,为临床制定多模式镇痛治疗方案提供建议。结果临床药师协助骨科医生合理使用围术期镇痛药物和儿童截肢术后幻肢痛的用药,同时,及时发现患儿不良情绪,对患儿进行心理安抚,患儿疼痛评分显著下降,顺利出院。结论临床药师参与术后镇痛方案的制定,提供药学监护,优化镇痛治疗方案,体现药师价值。

用于新型冠状病毒检测的核酸等温扩增技术研究进展

核酸检测作为新型冠状病毒肺炎(COVID-19)筛查诊断和病情监测的主要手段,在疫情防控中发挥了重要作用。虽然实时荧光定量PCR被认为是新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测的金标准,但其依赖荧光定量PCR仪且扩增检测时间较长,难以实现现场快速检测。因此许多基于核酸等温扩增的SARS-CoV-2检测方法相继诞生。等温扩增对仪器温控要求不高,通过与微流控芯片和可视化检测技术结合,可进一步简化操作、降低成本,为SARS-CoV-2现场快速筛查提供有力的技术支撑。本文围绕已报道的SARS-CoV-2等温扩增检测方法原理、检测性能及优缺点进行探讨,为进一步发展SARS-CoV-2现场快速检测平台提供参考。

临床药师参与多学科合作的骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤药学监护的效果评价

目的评估临床药师参与多学科合作的骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤(high dose methotrexate,HD-MTX)药学监护的工作效果。方法纳入2018年5月至2020年10月期间在我院进行HD-MTX化疗的骨肉瘤患者作为干预组,采用多学科合作模式对其进行药学监护;同时选取2015年3月至2018年4月期间进行HD-MTX化疗的骨肉瘤患者作为对照组,对两组患者的MTX血药浓度、血药浓度达标率、MTX排泄延迟发生率、亚叶酸钙(leucovorin calcium,LV)解救方案调整情况、不良反应发生率、住院时间及药物治疗费用等指标进行统计分析。结果与对照组相比,干预组患者在用药后各监测点血药浓度有下降趋势,血药浓度达标率明显提高,MTX排泄延迟发生率明显下降,P值均小于0.05。LV解救方案正确调整比率明显提高。急性肾功能损伤、肝酶升高以及中性粒细胞减少等不良反应发生率均明显下降,Ⅲ级及以上的严重不良反应发生率也明显降低,P值均小于0.05。干预组患者的平均住院日明显缩短(5.76 vs 6.62,P=0.002),药物治疗费用也较对照组大幅降低(7165.0 vs 14628.4,P=0)。结论采用多学科合作模式进行骨肉瘤患者HD-MTX药学监护可以有效提高用药安全性,降低治疗成本。

基于有限采样法的骨肉瘤患者甲氨蝶呤体内暴露量估算模型的建立与验证

目的采用有限采样法估算骨肉瘤患者静脉滴注大剂量甲氨蝶呤(high dose methotrexate, HD-MTX)后的体内药物暴露量,即药时曲线下面积(area under the drug concentration versus time curve, AUC_(0-t))。方法 34名骨肉瘤患者共进行67个周期HD-MTX化疗,分别于滴注结束时、开始滴注10,24,48和72 h收集患者血液样本,采用化学发光免疫法(CMIA)进行MTX血药浓度测定。计算得到患者MTX临床药动学参数后,经多元线性回归,建立基于有限采样法的AUC_(0-t)估算模型。采用Bootstrap法和Jackknife法进行模型准确性验证,采用Bland-Altman分析法评估有限采样法与经典药动学方法之间的一致性。通过绘制ROC曲线,评估AUC_(0-t)对HD-MTX不良反应的预测性能。结果综合考虑临床可操作性及准确性,选择两点(c_(max)、c_(24 h))模型用于MTX AUC_(0-t)的估算,回归方程为AUC_(0-t)=6.36c_(max)+161.30c_(24 h),r^2为0.933,平均预测误差为0.47%,均方根误差为6.78%。AUC_(0-t)对肝功能损伤、骨髓抑制及消化道反应等药物不良反应具有良好的预测能力,P<0.05。结论基于c_(max)、c_(24 h)两点估算的有限采样法可以用于骨肉瘤患者HD-MTX药物暴露量的估算,方法简便,易于临床开展,可为MTX个体化用药提供参考。

1例骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤化疗致肝功能损伤的药学监护

临床药师参与1例骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤化疗导致严重肝功能损伤治疗,借助治疗药物监测及个体化用药相关基因检测技术,对化疗方案和肝损伤原因进行分析,协助制定护肝治疗方案并对后续化疗方案进行优化。通过临床药师的介入,患者的肝功能逐渐恢复正常,下一周期化疗顺利按时进行。临床药师基于个体化用药技术,积极参与骨肉瘤患者的临床治疗,有助于提高抗肿瘤药物治疗的安全性及有效性。

个体化给药辅助系统JPKD预测肾移植患者他克莫司血药浓度的准确性评估及影响因素分析

目的评估个体化给药辅助决策系统Java PK^(®)for Desktop(JPKD)在肾移植患者中预测他克莫司血药浓度的准确性,并分析预测准确性的影响因素。方法采用回顾性调查分析方法,收集南京大学医学院附属金陵医院2019年9月—2020年1月肾移植术后使用他克莫司抗排斥治疗的病例,使用JPKD预测他克莫司剂量调整后的血药谷浓度,计算实测浓度与预测浓度之间的绝对权重偏差和相对预测误差,评估JPKD的预测能力。采用单因素和多因素Logistic回归分析筛选JPKD预测准确性的影响因素。结果共收集31例患者101例次血药浓度数据,他克莫司血药浓度平均预测值为(6.91±2.65)μg·L^(-1)(2.39~15.18μg·L^(-1)),平均实测值为(8.99±4.13)μg·L^(-1)(2.70~22.00μg·L^(-1)),平均绝对权重偏差为28.46%,平均相对预测误差为-15.87%。预测值的绝对权重偏差<30%的占57.14%。单因素分析显示性别、身高、红细胞比容、CYP3A5基因型、合并使用泊沙康唑与预测结果不准确有关。多因素Logistic回归分析显示CYP3A5基因型、合并使用泊沙康唑是预测不准确的主要危险因素。结论JPKD系统对他克莫司的血药浓度具有一定的预测能力,在临床应用时需与CYP3A5基因型和合并用药相结合来制定个体化给药方案。