灯盏乙素通过STAT3信号对激活的BV-2小胶质细胞M2型极化的影响

目的探究灯盏乙素(Scutellarin)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)作用下M2型小胶质细胞极化的作用及信号转导和转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的调控机制。方法BV-2小胶质细胞分为对照组(Con组)、STAT3抑制剂α-氰基-(3,4-二羟基)-N-苄基霉素-烟酰胺组(AG490组)、LPS组、LPS+AG490组、LPS+灯盏乙素预处理组(LPS+S组)、LPS+S+AG490组,共6组。Western blot和免疫荧光染色检测STAT3、磷酸化STAT3(P-STAT3)和M2型小胶质细胞标记物白介素10(IL-10)的表达。结果Western blot结果显示,LPS组的P-STAT3、IL-10表达显著增强,与对照组差异显著(P<0.05);使用灯盏乙素干预后P-STAT3表达明显降低;IL-10表达显著增高;均与LPS组有显著差异(P<0.05)。AG490增强灯盏乙素的作用。此外,STAT3在各组的变化无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色结果显示,灯盏乙素干预后可降低LPS激活的BV-2小胶质细胞P-STAT3的蛋白表达水平;增强IL-10蛋白表达。各组STAT3的蛋白水平无统计学意义。结论灯盏乙素通过抑制STAT3活化促进BV-2小胶质细胞向M2型极化,可能与灯盏乙素减轻神经炎症反应有关。

天麻素通过Notch信号通路调控激活的BV2小胶质细胞的研究

目的探索天麻素通过Notch信号通路调控BV2小胶质细胞激活的机制。方法体外培养BV2细胞,采用Western blot和免疫荧光双标染色检测氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型激活的BV2细胞Notch信号通路中Notch-1及下游的细胞内Notch受体结构域(intracellular Notch receptor domain,NICD)、转移因子发卡和split-1增强子(transcription factor hairy and enhancer of split-1,Hes-1)、重组结合蛋白抑制子(recombining binding protein suppressor of hairless,RBP-JK)的蛋白表达,以及天麻素干预的影响。结果Western blot结果显示,OGD诱导激活BV2细胞Notch信号通路相关蛋白Notch-1、NICD、Hes-1、RBP-JK的蛋白表达升高,天麻素干预降低了上述蛋白的表达。免疫荧光双标染色显示,天麻素可显著降低激活的小胶质细胞Notch-1、NICD、Hes-1和RBP-JK的表达。结论天麻素可通过Notch信号通路调节BV2细胞激活,从而发挥其保护作用。

天麻素对缺血缺氧大鼠星形胶质细胞MCP1表达的影响

目的:通过建立新生大鼠缺血缺氧脑损伤(HIBD)模型和体外星形胶质细胞系TNC1细胞糖氧剥夺(OGD)模型,从体内体外探索天麻素(GAS)对星形胶质细胞缺血缺氧损伤后单核细胞趋化因子1(MCP1)表达的影响。方法:将星形胶质细胞TNC1随机分为对照组(control)、糖氧剥夺组(OGD)、糖氧剥夺+天麻素(OGD+G)。将3 d新生SD大鼠随机分为假手术组(sham)、缺血缺氧脑损伤模型组(HIBD)、HIBD模型+天麻素干预组(HIBD+G)。使用免疫荧光双标染色和Western Blot检测各组细胞及大鼠左侧损伤皮质半暗区MCP1的表达变化。结果:体外免疫荧光染色和Western Blot结果显示,与control组相比,OGD组TNC1细胞MCP1表达明显增加(P<0.05),GAS可减轻OGD损伤后MCP1的表达(P<0.05);体内免疫荧光双标染色和Western Blot结果也显示:GAS干预显著降低了HIBD后星形胶质细胞MCP1的表达(P<0.05)。结论:GAS可以通过降低星形胶质细胞MCP1的表达对HIBD发挥保护作用。

天麻素对少突胶质前体细胞糖氧剥夺损伤的保护作用

目的:探索天麻素对少突胶质前体细胞系OLN93细胞糖氧剥夺(OGD)损伤后血管紧张素受体1(AT1)、NADPH氧化酶2(NOX2)和组织沉默调节蛋白3(Sirt3)表达的影响。方法:将OLN93细胞随机分为对照组(control)、糖氧剥夺组(OGD)和天麻素预处理组(OGD+G),通过CCK-8观察天麻素对细胞活力的影响;免疫荧光双标染色与Western Blot检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及AT1/NOX2/Sirt3的表达变化。结果:CCK8-kit结果显示:与control相比,OGD组OLN93细胞活力明显下降(P<0.05);GAS组OLN93细胞糖氧剥夺损伤后细胞活力明显有所提高(P<0.05)。Western Blot结果显示:与control相比,OGD组OLN93细胞TNF-α、AT1、NOX2蛋白表达明显增加(P<0.05);GAS明显降低OLN93细胞OGD损伤后TNF-α、AT1、NOX2蛋白表达,进一步促进Sirt3蛋白表达(P<0.05)。免疫荧光双重染色结果显示:GAS预处理显著降低OLN93细胞OGD损伤后TNF-α、AT1、NOX2表达,进一步增强Sirt3表达(P<0.05)。结论:GAS可通过调节AT1/NOX2/Sirt3对少突胶质前体细胞系OLN93细胞糖氧剥夺损伤发挥保护作用。

犬颅脑创伤后局部脑代谢的微透析监测

目的建立犬的颅脑外伤模型,运用微透析技术研究脑创伤后局部脑代谢的变化.方法取家犬9只,随机分为轻度创伤组(n=3),重度创伤组(n=3)和对照组(n=3).以自由落体硬膜外撞击方法制作轻度和重度脑损伤模型,应用微透析技术动态收集脑损伤局部的脑组织细胞外液(extracellular fluid,ECF),检测颅脑创伤状态下葡萄糖(Glucose,Glu)、乳酸(Lactic Acid,Lac)、甘油(Glycerol,Gly)含量及其动态变化.结果犬脑损伤后Glu含量降低,伤后5.5 h,6 h变化最显著(P<0.01),之后缓慢上升;Lac含量在伤后出现与Glu相反的变化,伤后5.5 h上升至最高值(P<0.05);重度组尤为甚.Gly在伤后6 h缓慢上升,但其变化不明显(P>0.05).结论微透析技术监测脑损伤后ECF中Glu和Lac含量的变化,可以作为判断伤情和预后的重要生化指标.

天麻素对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤后星形胶质细胞Notch信号通路的影响

星形细胞激活并反应性增生是新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)中重要病理变化之一,其过度增生将诱发炎性因子和趋化因子释放,抑制轴突的再生,加重轴突及少突胶质细胞的损伤,在新生儿HIBD中发挥重要作用。因此抑制星形胶质细胞反应性增生被认为是治疗HIBD的一项重要策略。本实验研究天麻素是否能通过Notch信号通路调节HIBD后反应性星形胶质细胞的病理生理活动。

天麻素对M1型小胶质细胞中TNF-α和CD86表达的影响

目的:研究天麻素(Gastrodin)对脂多糖(LPS)诱导激活的M1型小胶质细胞标记物肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和CD86表达的影响。方法:将BV2小胶质细胞随机分为对照组(control)、脂多糖组(LPS)和脂多糖+天麻素组(LPS+G),利用LPS诱导BV2细胞激活并向M1型转化,使用免疫荧光双标染色和Western Blot检测各组细胞M1型标记物TNF-α和CD86的表达变化。结果:免疫荧光双标染色和Western Blot结果均显示,相比于control组,LPS组TNF-α和CD86表达水平明显升高(P<0.05);与LPS组相比,LPS+G组中TNF-α和CD86表达明显下降(P<0.05)。结论:天麻素可能是通过抑制M1型小胶质细胞TNF-α和CD86的表达从而发挥其神经保护作用。

天麻素对LPS激活的小胶质细胞M2型极化的影响

小胶质细胞是中枢神经系统(CNS)的主要免疫细胞,其介导的炎性反应在CNS多种疾病中有重要的作用,抑制由小胶质细胞介导的过度炎性反应被认为是治疗CNS多种疾病的重要策略。激活的小胶质细胞可极化为M1和M22种表型,M1型与促炎因子过多释放有关,致使CNS发生炎性损害;M2型释放抗炎因子和分泌神经营养修复因子等,促进损伤的神经组织修复。本实验采用脂多糖(LPS)激活BV-2小胶质细胞,探索天麻素能否通过促进小胶质细胞向M2型极化从而发挥抗炎作用分为对照组、LPS激活组,LPS+天麻素组。用蛋白印迹法及免疫荧光双标染色检测M2型小胶质细胞的标记物CD206、IL-10、Arg1、YM1+2的表达变化以及天麻素干预后的影响.

天麻素对脂多糖激活的小胶质细胞M2型极化的影响

目的:研究天麻素对脂多糖(LPS)激活的小胶质细胞M2型极化的影响。方法:小鼠小胶质细胞来源的BV2细胞分为对照组(control)、LPS激活组(LPS)和LPS+天麻素预处理组(LPS+G)。免疫荧光双标染色和Western Blot检测M2型小胶质细胞标记物IL-10、Arg-1和Ym1/2的表达变化。结果:Western Blot结果显示:LPS组的IL-10、Arg-1和Ym1/2表达水平明显增高,与对照组相比有显著性差异(P <0.05);使用天麻素干预后IL-10、Arg-1和Ym1/2的表达显著增高,与LPS组相比有显著性差异(P <0.05)。免疫荧光双标染色结果显示:天麻素预处理增加了LPS激活的M2型小胶质细胞标记物IL-10、Arg-1和Ym1/2的荧光表达。结论:天麻素能促进活化的BV2小胶质细胞向M2型极化,可能与天麻素的抗炎作用有关。

灯盏乙素对小胶质细胞介导激活的星形胶质细胞极化和JAK2/STAT3信号通路的影响

本研究旨在探索灯盏乙素对小胶质细胞介导的星形胶质细胞极化的影响和JAK2/STAT3信号通路的调控机制。用激活的BV-2小胶质细胞培养基(称为小胶质细胞条件培养基,CM)培养TNC1星形胶质细胞,灯盏乙素干预后,分为对照组、条件培养基(CM)组、条件培养基+灯盏乙素干预组(CM+S)组,利用Western blotting技术检测A1型星形胶质细胞的相关蛋白:S100Ca^(2+)结合蛋白B(S100B)、蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导因子和转录激活因子3(STAT3)以及p-JAK2和p-STAT3在小胶质细胞介导激活的星形胶质细胞中的表达情况。

脊髓电刺激在疼痛科应用的研究进展

脊髓电刺激(SCS)是将刺激电极植入人体的脊柱椎管内,借助于脉冲电流作用到脊髓后角感觉神经传导束,达到阻断疼痛信号传导的功能,最初用来抑制慢性顽固性的疼痛,之后研究集中在运动功能恢复以及神经系统疾病的诊断等领域。简要介绍脊髓电刺激在疼痛科的应用及其研究进展。