回收式自体血回输对行剖宫产术患者免疫功能及炎症反应的影响

目的:探讨回收式自体血回输对行剖宫产术患者免疫功能及炎症反应的影响。方法:90例高危出血(中央型前置胎盘、瘢痕子宫等)行剖宫产术患者按自体血回输量分为3组,每组各30例。对照组未进行自体血回输、回输量0~400mL组回输自体血量0~400 mL、回输量400~800mL组回输自体血量400~800 mL。检测各组患者术前(T_(0))、术后即刻(T_(1))、术后24 h(T_(2))、术后48 h(T_(3))血液中HB、RBC、HCT、WBC、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平,计算CD4^(+)/CD8^(+)比值,测定血清IL-2、IL-6浓度,记录患者平均动脉压、心率、血氧饱和度及术后发热、住院时间等情况。结果:组内比较,相较T_(0),3组术后各时点CD3^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比值、IL-2水平、平均动脉压、心率、血氧饱和度等变化相近(P>0.05),回输量0~400 mL组、回输量400~800 mL组的CD4^(+)在T_(2)时点高于T_(0)(P<0.05),3组IL-6、WBC术后各时点较T_(0)均升高(P<0.05)。对照组HB、RBC、HCT水平在T_(1)时点出现下降,回输量0~400 mL组、回输量400~800 mL组HB、RBC、HCT水平在T_(2)时点出现下降(P<0.05)。组间比较:3组术后同一时间点CD3^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比值、IL-2、IL-6、HB、RBC、HCT、WBC、平均动脉压、心率、血氧饱和度、术后发热、住院时间等组间比较变化相近(P>0.05);回输量0~400 mL组、回输量400~800 mL组CD4^(+)浓度在T_(2)时点比对照组升高(P<0.05)。结论:自体血回输不会抑制免疫功能,甚至可短期内改善免疫功能,不会加重机体炎症反应,是安全可用的。

CXCR5+ CD8+ T细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的反应特点及临床价值

目的:本研究旨在探讨C-X-C趋化因子受体5型(CXCR5) CD8+ T细胞在儿童EBV相关传染性单核细胞增多症(IM)中的反应特点及临床价值。方法:采用流式细胞术及EB病毒(EBV)病原学检查分析入组儿童的外周血,同时收集临床资料进行统计分析。结果:EBV感染急性期CXCR5+ CD8+ T细胞绝对值计数显著增加,CXCR5+ CD8+ T/CD8+ T细胞比值、CD19+ B细胞的绝对值计数及CD19+ B细胞/LYM比值显著降低。CXCR5+ CD8+ T细胞绝对值计数与EBV DNA病毒载量、CD19+ B细胞绝对值计数呈负相关与肝损伤指标呈正相关。将EBV相关性IM急性期患儿以CXCR5+ CD8+ T细胞绝对值计数中位值分为高、低表达两组,高表达组中出现淋巴结肿大、肝脾肿大的几率明显高于低表达组。ROC曲线分析显示CXCR5+ CD8+ T细胞对儿童IM具有诊断价值,对于EBV相关肝损伤具有预测价值。结论:CXCR5+ CD8+ T细胞在EBV的急性感染中发挥了抗病毒作用,而其过度反应可能导致组织器官损伤。此外,CXCR5+ CD8+ T细胞可作为EBV相关IM诊断的诊断指标及EBV相关性肝损伤的预测指标。

帕金森病病因蛋白质:α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶活性的影响

目的:α-突触核蛋白是帕金森病的病因蛋白质之一,α-突触核蛋白与酪氨酸羟化酶具有相互作用。制备一个基因重组酪氨酸羟化酶,探讨α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶活性的影响。方法:实验于2004-05/11在北京老年医学研究所神经生物研究室完成。将携带人酪氨酸羟化酶cDNA的基因重组质粒pGEX-TH转化BL21(DE3)细菌使其表达谷胱甘肽S转移酶-TH为标签的融合蛋白质,用谷胱甘肽-琼脂糖4B亲和层析法纯化基因重组酪氨酸羟化酶,用高压液相色谱(HPLC)法分析酪氨酸羟化酶活性,将α-突触核蛋白添加至酪氨酸羟化酶的酶促反应体系中。观察基因重组型酪氨酸羟化酶制备生成物特点,以及α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶活性的作用。结果:①基因重组酪氨酸羟化酶约占菌体可溶性蛋白组分的1%,纯化的酪氨酸羟化酶在SDS-PAGE上表现为单一条带,可催化L-酪氨酸发生羟化反应生成L-多巴。②随α-突触核蛋白浓度递增,酪氨酸羟化酶活性有不同程度的下降。结论:原核表达方法可制备纯化度较高的人基因酪氨酸羟化酶,α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶活性具有抑制作用。

CD200在急性髓系白血病中的表达特点及其临床意义

本研究探讨急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia,AML)中CD200的表达率与临床特征的关系,分析CD200在AML预后判断中的价值。应用流式细胞术检测CD200及免疫表型,用R显带技术分析染色体核型,FISH技术检测AM L1/ETO、PM L/RARa和inv(16),PCR方法检测AM L1/ETO和PM L/RARa融合基因。结果表明:在54例初诊患者中CD200抗原表达阳性率为57.41%(31/54);CD200抗原表达在性别与年龄方面差异无统计学意义(P>0.05);CD200抗原表达在CD34和CD117之间具有显著的统计学意义(P<0.05);CD200抗原表达在染色体核型差异方面无统计学意义(P>0.05);核心结合因子(core binding factor,CBF)阴性的AML中CD200抗原表达在CD34和CD117表达方面均具有显著的统计学意义(P<0.05)。结论:CD200的表达与AML预后不良相关。

酪氨酸羟化酶与帕金森病

酪氨酸羟化酶(tyrosine bydroxylase，TH)是多巴胺(dopamine，DA)生物合成途径的关键酶，帕金森病(Parkinson's disease，PD)是由于黑质纹状体DA严重不足导致的一种神经变性疾病。综述TH主导的DA代谢调节与PD发生的相互关系，主要介绍TH结构、DA代谢的调节以及TH在PD发生发展和治疗中的作用。

缬沙坦对心力衰竭家兔心肌细胞肌浆网兰尼碱受体的影响

目的:探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌细胞肌浆网兰尼碱受体(Ry R2)表达及其释钙功能的改变以及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦长期干预的意义。方法:27只家兔随机分为三组:假手术组(n=9)、心衰组(n=9)和缬沙坦组(n=9),通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及心肌细胞肌浆网Ry R2的表达和功能的改变。结果:与假手术组比较,心衰组左心室重量指数、左心室舒张末压显著升高(P<0.05),左心室短轴缩短率及左心室射血分数明显降低(P<0.05);与心衰组比较,缬沙坦组左心室重量指数、左心室舒张末期压力显著降低(P<0.05),左心室短轴缩短率及左心室射血分数明显升高(P<0.05);心衰组心肌细胞肌浆网Ry R2表达和其释钙功能显著低于假手术组(P<0.05);缬沙坦组心肌细胞肌浆网RyR2表达和其释钙功能显著高于心衰组(P<0.05)。结论:长期应用缬沙坦能够改善心脏舒缩功能,可能与其增加心肌细胞肌浆网RyR2表达和其释钙功能有关。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞毒作用研究

目的:研究狗舌草提取物对266细胞的细胞毒作用。方法:U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,用CCK-8试剂检测细胞毒作用。结果:狗舌草提取物对266细胞有细胞毒作用,半数抑制(质量)浓度约为3.2mg.L-1。结论:狗舌草提取物对266细胞有体外细胞毒作用。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞凋亡的研究

目的:研究狗舌草提取物对U266细胞的细胞凋亡作用及其机制。方法:U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,电镜观察细胞凋亡形态,DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡条带。用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率。结果:狗舌草提取物作用U266细胞,电镜观察到细胞凋亡,DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡条带,狗舌草提取物影响U266细胞周期,G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡细胞增加,用Annexin V/PI染色流式细胞仪检测,均显示细胞凋亡与狗舌草提取物有剂量依赖关系。结论:体外实验证实,狗舌草提取物对266细胞有细胞凋亡作用,存在剂量依赖关系。

心力衰竭家兔心肌细胞核及肌浆网钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的变化

目的:探讨家兔慢性心力衰竭(心衰)时心肌细胞核、肌浆网钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)蛋白表达及活性的改变。方法:16只家兔随机分为两组,假手术组、心衰组各8只,通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型,于术后7周观察左心室结构、血液动力学的变化及心肌细胞核、肌浆网CaMKⅡ的表达和活性的改变。结果:与假手术组比较,心衰组左心室重量指数[(132±0.06)g/kg vs(3.61±0.09)g/kg]、左心室舒张末压[(-1.50±0.50)mmHg vs(23.00±2.37)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)]显著升高(P均<0.05),左心室短轴缩短率(37.83%±3.58%vs 17.38%±3.13%)及左心室射血分数(71.92%±4.56%vs 38.50%±6.07%)明显降低(P均<0.05);心衰组心肌细胞核和肌浆网的CaMKⅡ蛋白表达及活性均显著高于假手术组(P均<0.05)。结论:心肌细胞核及肌浆网CaMKⅡ蛋白表达及活性增加可能是心衰发生的机制之一。

404例慢性粒细胞白血病的染色体核型研究

目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)不同时期骨髓细胞染色体核型的变化特点及临床意义。方法采用短期培养法制备骨髓细胞染色体标本,应用R显带技术对该院404例CML患者的骨髓染色体核型进行回顾性分析。结果 404例患者中Ph染色体阳性376例(93.1%),Ph染色体阴性但bcr/abl阳性28例(6.9%)。376例Ph染色体阳性患者中,具有典型Ph易位者360例,具有变异易位者16例(复杂变异易位14例,简单变异易位2例)。16例变异易位患者慢性期10例,急变期6例。伴额外染色体异常者80例(19.8%),其中慢性期32例,占CML慢性期患者(304例)的10.5%,以-Y、+8为主;急变期48例,占急变期患者(100例)的48%,以i(17)、+8、+Ph最多见。CML急变期伴额外染色体异常的比例高于慢性期(P<0.01)。结论 Ph染色体是CML的细胞遗传学标志,Ph染色体可表现为典型易位和变异易位,变异易位在慢性期和急变期都可出现。CML急变期伴额外染色体异常的比例高于慢性期,CML病程出现额外染色体异常预示病程进入加速或急变期。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞周期的作用

中药狗舌草在世界范围内广泛分布,除了具有解痉、抗溃疡作用之外,对白血病细胞、恶性网状细胞肉瘤及皮肤癌有较强的抑制作用。其化学成分为生物碱。此前对狗舌草生物碱成分分析,对狗舌草化学成分及其抗淋巴性白血病效果进行试验,

地塞米松对特发性血小板减少性紫癜树突状细胞免疫活性的影响

目的:研究地塞米松对特发性血小板减少性紫癜(ITP)树突状细胞(DC)免疫活性的影响。方法:36例初诊ITP患者口服地塞米松40 mg/d,连用4 d;分离21例治疗有效患者治疗前后及正常对照外周血单个核细胞,加入细胞因子rhGM-CSF及rhIL-4培养诱导DC,用流式细胞技术检测DC表型;酶联免疫吸附法检测DC培养上清液中IL-12 p70。结果:①ITP患者DC的CD80和CD86阳性表达率分别为(51.60±13.47)%和(61.50±15.93)%,明显高于正常对照的(36.03±15.43)%和(40.28±11.49)%(P<0.05);治疗后ITP患者CD80和CD86表达率分别降为(36.48±15.19)%和(44.05±17.70)%,与治疗前相比,均差异有统计学意义(均P<0.05),但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②治疗前ITP患者组IL-12 p70为(67.52±14.43)pg/ml,明显高于正常对照的(39.78±10.03)pg/ml(P<0.05);治疗后ITP组IL-12 p70的表达降至(43.90±8.49)pg/ml,与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05),与正常对照相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DC及其分泌的细胞因子在ITP发病中起重要作用,地塞米松可能通过抑制DC的免疫活性而达到治疗目的。

缬沙坦对心力衰竭家兔心肌细胞核及肌浆网钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的影响

目的探讨家兔慢性心力衰竭（心衰）时心肌细胞核及肌浆网钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKII）蛋白表达和活性的改变，以及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦长期干预的意义。方法24只家兔随机分为3组，假手术组、心衰组和缬沙坦组，各8只。通过超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型，于术后7周观察左心室结构、血流动力学的变化及CaMKⅡ的表达和活性的改变。结果与假手术组比较，心衰组左心室重量指数（LVMI）[（3．61±0．09）g／kg比（1．32±0．06）g／kg，P〈0．05]、左心室舒张末压（LVEDP）[（23．00±2．37）mmHg比（-1．50±0．50）mmHg，P〈0．05]显著升高，左心室缩短率（LVFS）[（17．38±3．13）％比（37．83±3．58）％，P〈0．05]及左室射血分数（LVEF）[（38．50±6．07）％比（71．92±4．56）％，P〈0．05]明显降低。与心衰组比较，缬沙坦组LVMI[（2．07±0．14）g／kg比（3．61±0．09）g／kg，P〈0．05]和LVEDP[（2．17±0．72）mmHg比（23．00±2．37）mmHg，P〈0．05]显著降低，LVFS[（33．83±2．85）％比（17．38±3．13）％，P〈0．05]和LVEF[（64．45±3．66）％比（38．50±6．07）％，P〈0．05]明显升高。心衰组细胞核及肌浆网CaMKⅡ蛋白表达（1．42±0．11比0．86±0．04，1．39±0．14比0．80±0．06，P〈0．05）及活性（3．43±0．15比2．14±0．13，3．38±0．11比2．09±0．11，P〈0．05）显著高于假手术组；缬沙坦组细胞核及肌浆网CaMKⅡ蛋白表达（1．18±0．11比1．42±0．11，1．10±0．11比1．39±0．14，P〈0．05）及活性（2．72±0．13比3．43±0．15，2．69±0．12比3．38±0．11，P〈0．05）显著低于心衰组。结论缬沙坦长期干预心力衰竭，能够改善心脏舒缩功能，可能与其降低细胞核及肌浆网CaMKⅡ蛋白表达及活性有关。

核酸序列依赖性扩增、Real-time PCR及GM试验诊断侵袭性曲霉菌感染的临床应用评价

目的核酸序列依赖性扩增（nucleic acid sequence-based amplification,NASBA）、Real-time PCR及GM试验在侵袭性曲霉菌感染中的诊断价值。方法收集2013年11月~2014年6月临床上曲霉菌感染高危病患的血液标本80例,并根据EORTC/MSG诊断标准分为确诊组8例,拟诊组26例,非感染组46例,分别利用NASBA、real-time PCR及GM试验进行检测,计算3种方法的诊断指标并分析评价。结果 NASBA、real-time PCR及GM试验3种方法的灵敏度分别为76.47%、67.65%、52.94%,特异度分别为80.43%、89.13%、80.43%。联合诊断结果显示,NASBA与real-time PCR串联方案有最好的特异度（100%）及阳性预测值（100%）;NASBA与real-time PCR并联方案则最为灵敏（94.12%）。结论 NASBA用于诊断IA最为敏感,而real-time PCR则最为特异,GM试验的表现差于前两者。联合应用的诊断策略,在特定情况下提高临床早期诊断IA的准确性。

过氧化物酶体增殖体激活型受体γ基因多态性与高血压性左心室肥厚的相关性研究

目的探讨过氧化物酶体增殖体激活型受体γ(PPARγ)C161-T变异与高血压性左心室肥厚的关系。方法采用病例-对照设计,选择81例高血压性左心室肥厚(LVH)患者(LVH组)和79例高血压无左心室肥厚的患者(无LVH组)作为研究对象,采用聚合酶链式反应-限制性长度多态性方法测定PPARγ基因多态性。结果LVH组与无LVH组PPARγ基因型的分布频率符合Hardy-Weinberg平衡,LVH组与无LVH组PPARγCC基因型频率分别为84.0%和67.0%,CT基因型频率分别为13.6%和29.1%,TT基因型频率分别为2.4%和3.8%,LVH组PPARγCT基因型频率(13.6%)低于无LVH组(29.1%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论PPARγCT基因型的多态性与高血压性左心室肥厚相关。

革兰氏阴性菌脓毒血症患者早期CD4阳性淋巴细胞和NK细胞的临床研究

目的:明确革兰氏阴性菌脓毒血症患者淋巴细胞和NK细胞的早期变化以及血清可溶性粒细胞靶受体(sTREM-1)的水平,探讨脓毒血症患者早期的免疫状况。方法:脓毒血症发生后12h内,采集39例高度怀疑革兰氏阴性菌感染患者的外周血;同样采集16个健康人的血样品。应用单克隆抗体在流式细胞仪上分析淋巴细胞及NK细胞;血清sTREM-1的浓度用ELISA法测定。结果:与对照相比,脓毒血症患者CD3/CD4细胞明显减少(P<0.01);而NK细胞明显增高(P<0.01)。患者ANNEXIN-V/CD4/CD3阳性细胞、ANNEXIN-V/CD8/CD3阳性细胞以及ANNEXIN-V/CD14阳性细胞比例(中位数±标准差)分别是(7.53±2.25)%、(7.59±3.39)%和(1.96±4.17)%。脓毒血症患者血清sTREM-1水平较对照明显增高(P<0.01)。结论:研究结果首次证实革兰氏阴性菌脓毒血症患者早期出现CD4淋巴细胞减少、NK细胞增加和血清sTREM-1水平增高的免疫特征。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞周期调控通路蛋白cyclinE和cdk2,p27的影响

目的研究狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞周期调控通路蛋白cyclinE和cdk2,p27等的影响。方法体外培养人多发性骨髓瘤U266细胞,加入终质量浓度为10.0,5.0,2.5mg/L的狗舌草提取物诱导48h,Western蛋白质印迹法检测cdk2和cyclinE蛋白的表达。结果Western印迹检测结果显示,10.0,5.0,2.5mg/L狗舌草提取物分别作用于U266细胞48h后,与正常对照组比较,cdk2和cyclinE蛋白表达上调,cdk2/β-Actin,cyclinE/β-Actin比值升高,p27蛋白表达下调,P27/B-Actin比值下降。结论狗舌草提取物诱导U266细胞凋亡的过程中,可能存在cdk2和cyclinE蛋白表达上调,p27蛋白表达下调参与。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞周期调控通路蛋白cyclin A,cyclin B和cdk 1等的影响

目的研究狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞周期调控通路蛋白cyclinA,cyclinB和cdk1等影响。方法体外培养人多发性骨髓瘤U266细胞,加入终浓度为10,5,2.5mg/L的狗舌草提取物诱导48h,Western蛋白质印迹法检测cyclinA,cyclinB和cdk1蛋白表达。结果Western印迹检测结果显示,10,5,2.5mg/L的狗舌草提取物分别作用于U266细胞48h后,与正常对照组比较,蛋白cyclinB和cdk1的表达下调,cyclinA蛋白表达上调。结论狗舌草提取物诱导U266细胞凋亡的过程中,可能存在cyclinB和cdk1蛋白的表达下调、cyclinA蛋白表达上调参与。

酪氨酸羟化酶与帕金森病的关系研究

酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)是多巴胺(Dopamine,DA)生物合成途径的关键酶,帕金森病(Parkinson's disease, PD)是由于黑质纹状体DA严重不足导致的一种神经变性疾病.研究了TH主导的DA代谢调节与PD发生的相互关系,TH结构、DA代谢的调节以及TH在PD发生发展和治疗中的作用.