犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染的小鼠肺组织及大鼠肺微血管内皮细胞ICAM-1和VCAM-1表达的影响

目的:研究中医经典合方犀角地黄汤合银翘散(XDY)对流感病毒性肺炎小鼠肺组织及对流感病毒感染的大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)中细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达的影响,探讨其治疗病毒性肺炎的机制。方法:54只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组和XDY组,每组18只,后2组以流感病毒滴鼻感染,XDY组灌胃给予XDY;在感染后的2、4和6 d分别取材,免疫组化法观察肺组织中ICAM-1和VCAM-1表达。从雄性Wistar大鼠中分离并原代培养RPMVECs,设置正常组、病毒组、病毒+XDY含药血清组、肿瘤坏死因子α(TNF-α)组和TNF-α+XDY含药血清组;刺激因素作用24 h后,real-time PCR检测ICAM-1和VCAM-1 mRNA水平,流式细胞术检测ICAM-1和VCAM-1蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组肺组织中ICAM-1和VCAM-1表达持续增多(P<0.01),而XDY组的表达均低于模型组(P<0.01);与正常组比较,流感病毒和TNF-α作用的RPMVECs中ICAM-1和VCAM-1 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01),XDY能下调ICAM-1和VCAM-1 mRNA及蛋白表达(P<0.01)。结论:抑制流感病毒感染导致的RPMVECs黏附分子的表达从而抑制机体的炎症级联反应可能是XDY治疗流感病毒性肺炎的作用机制之一。

肝脏上皮样血管内皮瘤的影像特点及临床诊治体会

背景与目的：肝脏上皮样血管内皮瘤（hepatic epithelioid haemangioendothelioma,HEHE）是一种极为罕见的血管源性肿瘤,临床及影像诊断很容易误诊。本研究通过总结HEHE的临床及影像特点,为今后HEHE的临床诊治提供重要参考。方法：回顾分析复旦大学附属肿瘤医院中西医结合科住院的5例经病理证实的HEHE患者的临床表现、影像特征、病理特点及临床治疗的疗效。结果：5例患者中,男性2例,女性3例,年龄范围26-65岁,平均45.6岁,2例肝内多中心发生,3例全身多组织、多中心发生。B超为等低回声,病灶内无明显血流信号。CT平扫为等低密度,MR平扫为低T1高T2信号,内密度及信号不均匀,CT/MR增强扫描时病灶呈“慢进慢出”式明显、环状强化特点。PET/CT为明显高FDG摄取,且呈延迟显像的特点。DSA造影下见肿瘤血管纤细,肝动脉化疗栓塞（transcatheter arterial chemoembolization,TACE）术后病灶碘油沉积不理想。显微镜下肿瘤细胞呈上皮样分化并出现细胞质内血管腔形成,免疫组织化学法检测5例均呈CD31和CD34阳性。5例患者均存活,其中2例经TACE联合高强度聚焦超声（high intensity focused ultrasound,HIFU）和（或）射频消融（radiofrequency ablation,RFA）肿瘤局部控制效果显著。结论：HEHE具有特征性的临床表现及影像学特征,目前对于全身多组织、多中心发生的晚期患者,TACE联合HIFU和（或）RFA可能是最有效的方法。

靶向ezrin、radixin、moesin的siRNA慢病毒感染原代肺微血管内皮细胞促进流感病毒的复制

目的构建分别靶向ezrin(E)、radixin(R)、moesin(M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响。方法根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒表达质粒GV248,构建分别靶向E、R、M基因的慢病毒siRNA载体Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA,同时构建靶向无关序列的Lenti-control-siRNA;组织块法分离培养大鼠原代肺微血管内皮细胞(PMVEC);Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA转染原代大鼠PMVEC后,荧光定量PCR检测E、R、M的mRNA的表达,Western blot法检测ERM蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测ERM蛋白的分布;FM1流感病毒鼠肺适应株感染慢病毒转染的PMVEC后,荧光定量PCR检测慢病毒载体对流感病毒复制的影响。结果重组质粒经测序鉴定,Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-MsiRNA、Lenti-control-siRNA构建成功。慢病毒载体转染大鼠PMVEC,感染复数(MOI)为10时感染率达80%以上。Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA明显抑制PMVEC中E、R、M的转录及表达。流感病毒感染PMVEC中,慢病毒空载体及Lenti-control-siRNA抑制流感病毒的复制,而Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA增加PMVEC中流感病毒的mRNA水平。结论成功构建靶向ERM基因的慢病毒载体,证实其可稳定转染PMVEC特异高效地抑制E、R、M基因表达;慢病毒载体本身能抑制PMVEC中流感病毒复制,而靶向E、R、M的慢病毒siRNA却促进流感病毒的复制。

功能基因组学方法筛选蟾毒灵抗肝癌细胞的潜在凋亡靶点

目的:筛选中药单体蟾毒灵促进人肝癌细胞凋亡的潜在分子靶点。方法:以人肝癌细胞株PLC/PRF/5为体外模型,观察中药单体蟾毒灵对人肝癌细胞凋亡以及相关基因表达的影响。以不同浓度的蟾毒灵分别作用于PLC/PRF/5细胞24 h、48 h、72 h,检测其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。通过高通量Illumina RNA测序,筛选蟾毒灵作用人肝癌细胞后基因表达的变化,并进行生物信息学分析。结果:中药单体蟾毒灵可抑制人肝癌细胞增殖并诱导其凋亡;中药单体蟾毒灵可诱导不同基因的表达;基因本体(GO)富集分析表明,中药单体蟾毒灵可以影响细胞周期、凋亡等通路的变化;京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析凋亡通路表明,钙离子诱导的细胞死亡途径中的钙蛋白酶表达明显上调。结论:中药单体蟾毒灵具有明显的抗肝癌细胞凋亡作用,并可通过作用相关信号通路中的多靶点参与此过程。

蟾毒灵抑制肝癌干细胞lncRNAs分子筛选研究

目的观察蟾毒灵对肝癌干细胞的影响,并探讨其相关机制。方法利用无血清悬浮培养技术富集肝癌干细胞球,分子生物实验检测肿瘤干细胞标记物CD133、CD44和上皮特异性抗原(ESA)表达,测序技术筛选蟾毒灵干预肝癌干细胞后lncRNAs分子的差异表达。结果通过无血清悬浮培养方法成功富集肝癌干细胞球,进一步发现蟾毒灵可抑制肝癌干细胞球的形成;蟾毒灵能显著抑制肝癌干细胞标记物CD133、CD44和ESA表达;测序结果显示,蟾毒灵可引起肝癌干细胞lncRNAs分子的差异表达。结论蟾毒灵具有抑制肝癌干细胞的作用,其机制可能与调控lncRNAs分子有关。

太阳能与废气循环混合加热式沥青搅拌装置

为解决高原寒区道路养护问题,设计了一种太阳能与废气循环混合加热式沥青搅拌装置。该装置采用新型热管式太阳能集热器吸收太阳辐射能对沥青进行预加热,同时通过回收汽车排放的废气,流经燃烧室实现辅助加热。温控箱对搅拌桶内温度进行实时显示和控制,以保证沥青在高原最佳施工温度范围内。

ERM蛋白在微血管内皮细胞通透性调控中的研究进展

埃兹蛋白(Ezrin)/根蛋白(Radixin)/膜突蛋白(Moesin)(ERM)是细胞膜与胞内骨架的连接蛋白,具有高度同源性。细胞外刺激因子可通过多种信号通路磷酸化ERM蛋白,使细胞骨架重构,从而调控微血管内皮细胞通透性,在感染、炎症、代谢异常等病理过程中发挥作用。ERM功能调节的一个重要环节就是其羧基末端苏氨酸残基磷酸化后引起ERM构象的改变,暴露的羧基末端尾部的肌动蛋白(actin)-细胞骨架结合位点;故通过ERM的桥接作用,可将肌动蛋白微丝与细胞膜相连,使血管内皮细胞屏障功能发生变化。目前已知能使ERM磷酸化的激酶有蛋白激酶C(PKC)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、Rho相关激酶(ROCK),分别通过p38-MAPK、Rho/ROCK、PKC信号通路参与微血管内皮屏障功能的调控。本文旨在阐述ERM及其相关信号通路在微血管内皮细胞通透性调控中发挥的作用。

妙用配凑法解难题

《中学生数学》在2004年11月上期刊登了《抓住问题的关键》。我对作者介绍的例2中的方法十分欣赏,但仔细思考后,认为例2中所用方法不仅来自灵感,还可以通过计算来配凑。题目已知a,b,c均为正数,求y=(ab+2bc)/(a^2+b^2+c^2)的最大值。分析此题很难用均值不等式,则思考应用消元法。可如何消元呢?则又需用配凑法。y=(ab+2bc)/(a^2+b^2+c^2)分子中有“ab、bc”,则拆分母中的b^2。解 y=(ab+2bc)/(a^2+b^2+c^2) =(ab+2bc)/(a^2+kb^2+(1-k)b^2+c^2)(设k满足：0＜k＜1)(为下面使用均值不等式所需“一正、二定、三相等作铺垫”) 上式若要消元,则需满足(?)=1/2,解得k=1/5,符合0＜k＜1。

怀念爸爸陶勇

今年1月21日,是海军东海舰队原司令员陶勇诞生100周年纪念日。我们特地选登陶勇子女在多年前撰写的一篇回忆文章,以纪念这位功勋卓著的战将。

火针点刺放血联合血府逐瘀汤治疗下肢静脉曲张的临床疗效研究

评估火针点刺放血联合血府逐瘀汤治疗下肢静脉曲张(LEVV)的临床疗效。方法 选取我院2022年9月-2023年9月期间接诊的90例LEVV患者,随机分为A组(接受火针点刺放血+血府逐瘀汤治疗)和B组(接受常规针刺治疗),各45例。治疗结束后,观察两组评估指标的变化。结果 A组VCSS评分、VDS评分明显低于B组(p<0.05),CIVIQ评分也显示A组的生活质量显著优于B组(p<0.05)。此外,临床症状和体征改善时间方面,A组相比B组更早出现改善(p<0.05)。结论 火针点刺放血联合血府逐瘀汤的疗效显著,可改善LEVV患者的临床症状和功能障碍,提高其生活质量。因此,在临床实践中可作为治疗LEVV的一种有效方案。