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阳离子脂质体——病毒增强质粒复合物在肝细胞癌基因治疗中的应用 被引量:3
1
作者 张景迎 陈诗书 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期385-388,共4页
目的建立一种简便有效的非病毒基因治疗方法。方法用构建的含人IL┐2基因的腺相关病毒(AAV)增强质粒(pAI┐hIL┐2)与新型阳离子脂质体(Dosper)以适当比例混合形成复合物(Dosper┐pAI┐hIL┐2)... 目的建立一种简便有效的非病毒基因治疗方法。方法用构建的含人IL┐2基因的腺相关病毒(AAV)增强质粒(pAI┐hIL┐2)与新型阳离子脂质体(Dosper)以适当比例混合形成复合物(Dosper┐pAI┐hIL┐2)。体外转染小鼠肝癌细胞系MM45T.Li┐2,评估了人IL┐2基因表达情况。应用直接瘤体内注射方法评估了此方法介导IL┐2基因的抗肿瘤作用。结果应用Dosper┐pAI┐hIL┐2复合物体外转染MM45T·Li,其IL┐2表达水平每毫升可达175U/48小时,最高表达时间在转染后第4天(225U/ml),第12天仍可表达30U/ml。瘤体内直接注射Dosper┐pAI┐hIL┐2复合物后,瘤组织内可检出IL┐2mRNA,治疗组肿瘤生长明显减慢,小鼠生存率(转染后30天)明显提高(P<0.01)。结论Dosper┐AAV增强质粒复合物能有效介导IL┐2基因表达,产生较好的抗瘤效应,此方法简便。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 肝肿瘤 基因疗法 病毒增强质粒
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白介素-2受体及其介导的信号转导 被引量:4
2
作者 张景迎 陈诗书 《生命的化学》 CAS CSCD 1999年第3期127-129,共3页
白介素2(IL-2)是一种重要的调控免疫系统细胞增殖和分化的细胞因子。其生物活性的发挥是通过与细胞表面白介素-2受体(IL-2R)结合,继而激活胞质内多种非受体型蛋白质酪氨酸激酶(PTK),进一步启动3种主要信号转导... 白介素2(IL-2)是一种重要的调控免疫系统细胞增殖和分化的细胞因子。其生物活性的发挥是通过与细胞表面白介素-2受体(IL-2R)结合,继而激活胞质内多种非受体型蛋白质酪氨酸激酶(PTK),进一步启动3种主要信号转导途径:控制基因转录的Jak-STA... 展开更多
关键词 白介素-2 白介素2受体 信号转导
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脂质体介导IFNγ基因治疗小鼠肝癌的研究 被引量:2
3
作者 张景迎 陈诗书 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期167-169,共3页
以大肠杆菌β-gal基因为报告基因,优化了3种阳离子脂质体的转染条件,评估了其转染效率。用构建的含腺相关病毒反向末端重复序列(AAV-ITRs)的质粒表达载体,经Dosper介导将小鼠IFNγ基因导入MM45T.Li... 以大肠杆菌β-gal基因为报告基因,优化了3种阳离子脂质体的转染条件,评估了其转染效率。用构建的含腺相关病毒反向末端重复序列(AAV-ITRs)的质粒表达载体,经Dosper介导将小鼠IFNγ基因导入MM45T.Li细胞,体外有效地表达IFNγ。瘤体内注射Dosper-pAI-mIFNγ复合物可明显抑制肿瘤生长,荷瘤小鼠生存期延长。此简便、有效的非病毒转基因方法有望用于肿瘤基因治疗。 展开更多
关键词 脂质体 干扰素-Γ 肝肿瘤 基因治疗
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去除百日咳菌抗原溶液中内毒素的简易方法 被引量:1
4
作者 张景迎 刘德铮 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1992年第3期127-128,共2页
本文通过层析条件的选择,建立了一种新的去除百日咳菌抗原溶液中内毒素(ET)的简易方法——DE_(62)离子交换柱层析。此法的ET去除率为99.9%,蛋白回收率>90%,DE_(62)的最大ET结合能力>6.5mg/ml膨胀胶。此外。DE_(62)具有交换容量... 本文通过层析条件的选择,建立了一种新的去除百日咳菌抗原溶液中内毒素(ET)的简易方法——DE_(62)离子交换柱层析。此法的ET去除率为99.9%,蛋白回收率>90%,DE_(62)的最大ET结合能力>6.5mg/ml膨胀胶。此外。DE_(62)具有交换容量大、流速快及再生效果好等优点。 展开更多
关键词 Whatman DE52 内毒素 血凝素
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肿瘤基因治疗的靶向性研究 被引量:1
5
作者 张景迎 陈诗书 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期120-123,共4页
理想的肿瘤基因治疗方案须具备有效性和安全性,这就需要有效治疗基因在靶细胞内精确地表达。为了实现此目标,除了寻找有效治疗基因外,人们在基因靶向性精确表达方面做了大量研究。基因治疗靶向性有三层含义:首先是转移靶向性,通过... 理想的肿瘤基因治疗方案须具备有效性和安全性,这就需要有效治疗基因在靶细胞内精确地表达。为了实现此目标,除了寻找有效治疗基因外,人们在基因靶向性精确表达方面做了大量研究。基因治疗靶向性有三层含义:首先是转移靶向性,通过靶向递送技术将治疗基因尽可能多地导... 展开更多
关键词 肿瘤 基因治疗 靶向性研究
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恶性肿瘤的联合基因治疗 被引量:1
6
作者 张景迎 陈诗书 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期483-485,共3页
恶性肿瘤的联合基因治疗张景迎陈诗书恶性肿瘤基因治疗是指将某些有意义目的基因,通过适宜的基因转移方法导入受体细胞(主要是肿瘤细胞)中,借其表达的产物达到治疗恶性肿瘤的目的。近10年来,人们在这方面进行了大量动物实验研究... 恶性肿瘤的联合基因治疗张景迎陈诗书恶性肿瘤基因治疗是指将某些有意义目的基因,通过适宜的基因转移方法导入受体细胞(主要是肿瘤细胞)中,借其表达的产物达到治疗恶性肿瘤的目的。近10年来,人们在这方面进行了大量动物实验研究,并且开展了一些Ⅰ期或Ⅱ期临床试验... 展开更多
关键词 肿瘤 基因疗法
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脂质体介导含IL-2及IFN-γ cDNA腺相关病毒质粒的转基因及抗肿瘤作用 被引量:1
7
作者 张景迎 陈诗书 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第2期244-248,共5页
h IL- 2基因和 m IFN- γ基因经 IRES连接后克隆入腺相关病毒质粒表达载体 p AC中 ,构建得双基因质粒表达载体 p AC- FRI.体外经阳离子脂质体 Dosper介导转染小鼠肝癌细胞 MM45T.Li,Northern印迹及生物活性检测分别从 RNA水平和蛋白质... h IL- 2基因和 m IFN- γ基因经 IRES连接后克隆入腺相关病毒质粒表达载体 p AC中 ,构建得双基因质粒表达载体 p AC- FRI.体外经阳离子脂质体 Dosper介导转染小鼠肝癌细胞 MM45T.Li,Northern印迹及生物活性检测分别从 RNA水平和蛋白质水平证明了 2个基因的表达 .直接瘤内注射 Dosper- DNA复合物后 ,与对照组 ( Lac Z)相比 ,双基因组及 IL- 2或 IFN-γ单基因组均产生了较明显的抗瘤作用 ,并诱发了较高的特异 CTL活性 . 展开更多
关键词 IL-2 IFN-Γ 腺相关病毒 脂质体 肿瘤 基因治疗
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阳离子脂质体用作基因转移载体的研究进展 被引量:4
8
作者 张景迎 夏爱娣 《国外医学(预防.诊断.治疗用生物制品分册)》 1997年第4期156-159,共4页
鉴于阳离子脂质体制备简便、安全无毒、无免疫原性,近年来在基因转移方面得到了广泛应用.为了更好地适用于体内基因治疗,目前正致力于研制高效、稳定、靶向的阳离子脂质体.
关键词 阳离子脂质体 基因转移 基因治疗
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肝细胞癌基因治疗的实验性研究进展 被引量:1
9
作者 张景迎 《医学综述》 1998年第1期1-3,共3页
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是东南亚地区最常见恶性肿瘤之一,位于我国6大常见恶性肿瘤之列,占原发性肝癌的90%以上.目前HCC的治疗主要是采用以手术、放疗、化疗和局部治疗为主的综合疗法,尽管多种治疗方案已用于HCC,但HCC... 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是东南亚地区最常见恶性肿瘤之一,位于我国6大常见恶性肿瘤之列,占原发性肝癌的90%以上.目前HCC的治疗主要是采用以手术、放疗、化疗和局部治疗为主的综合疗法,尽管多种治疗方案已用于HCC,但HCC仍是最难治愈的恶性肿瘤之一,尤其是伴有多发病灶或远处转移时.因此探索新型治疗方法势在必行.分子生物学的进展已了解到大量控制细胞生长和分化的机制,用基因治疗靶向这些途径正迅速成为继肿瘤手术、放疗、化疗和免疫治疗后的第五条途径.HCC是基因治疗最感兴趣的恶性肿瘤之一.近年来对此付诸了较多的研究,取得了一些有意义的结果. 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 基因治疗 实验
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四环素可调控基因表达系统的研究进展 被引量:1
10
作者 张景迎 《国外医学(生理病理科学与临床分册)》 1999年第1期65-67,共3页
近年来对人工合成可调控基因表达系统的研究较多,其中四环素调控表达系尤为突出,此系统已在基因功能研究、基因选择性表达分析方面得到了较好地应用。基因治疗是当前研究的热点之一,如何保证有效目的基因在体内适时、适量地表达是实... 近年来对人工合成可调控基因表达系统的研究较多,其中四环素调控表达系尤为突出,此系统已在基因功能研究、基因选择性表达分析方面得到了较好地应用。基因治疗是当前研究的热点之一,如何保证有效目的基因在体内适时、适量地表达是实现安全、有效的基因治疗的保障。因此,对此系统的改进及应用。 展开更多
关键词 四环素 基因表达调控 基因疗法 应用
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肿瘤基因治疗中基因转移方法的研究
11
作者 张景迎 王运坤 《国外医学(肿瘤学分册)》 北大核心 1995年第5期280-283,共4页
基因转移方法是肿瘤基因治疗成功的关键因素之一。本文综述了肿瘤基因治疗中常用的几种基因转移方法,如逆转录病毒介导法、腺病毒介导法、脂质体介导法、直接注射裸DNA及定向导入法等。通过选择适宜的基因转移方法,达到提高肿瘤基因治... 基因转移方法是肿瘤基因治疗成功的关键因素之一。本文综述了肿瘤基因治疗中常用的几种基因转移方法,如逆转录病毒介导法、腺病毒介导法、脂质体介导法、直接注射裸DNA及定向导入法等。通过选择适宜的基因转移方法,达到提高肿瘤基因治疗效果的目的。 展开更多
关键词 肿瘤 基因疗法 基因转移方法
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PCR技术在丙肝诊断中的应用进展
12
作者 张景迎 王译平 《预防医学论坛》 1995年第2期477-479,共3页
目前用于HCV感染的特异实验诊断方法主要有两类,即检测抗—HCV和HCV RNA。在感染过程中,抗体出现较晚,且抗—HCV阳性只表明有过HCV感染,而不能说明血清是否有传染性。然而,基因诊断技术能够检测HCV基因组,阳性结果即表明HCV的存在,说明... 目前用于HCV感染的特异实验诊断方法主要有两类,即检测抗—HCV和HCV RNA。在感染过程中,抗体出现较晚,且抗—HCV阳性只表明有过HCV感染,而不能说明血清是否有传染性。然而,基因诊断技术能够检测HCV基因组,阳性结果即表明HCV的存在,说明该受检者具有传染性,这在献血员筛选及HCV早期诊断和预防中具有十分重要的意义。HCV感染者血清HCV数量极低,常规分子杂交技术难以检出HCV—RNA,而且检测过程繁琐。 展开更多
关键词 PCR技术 突变型 单核细胞 扩增产物 引物 分子杂交技术 外周血 逆转录一聚合酶链反应 实验诊断 传染性
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转基因治疗肿瘤的研究进展
13
作者 张景迎 张凤珍 《预防医学论坛》 1995年第2期413-415,共3页
随着基因转移技术的发展和肿瘤发病机理研究的不断深入,肿瘤基因治疗的应用取得了惊人的进展。由于恶性肿瘤的发生、发展涉及多种因素,肿瘤基因治疗途径也不只一种。归纳起来主要包括:向肿瘤细胞转导外源基因改变其恶性表型;增强机体对... 随着基因转移技术的发展和肿瘤发病机理研究的不断深入,肿瘤基因治疗的应用取得了惊人的进展。由于恶性肿瘤的发生、发展涉及多种因素,肿瘤基因治疗途径也不只一种。归纳起来主要包括:向肿瘤细胞转导外源基因改变其恶性表型;增强机体对肿瘤细胞的杀伤能力;提高肿瘤对化疗药物的敏感性;提高机体对大剂量化疗的耐受力。本文就肿瘤基因治疗途径的研究进展作一概述。 改变肿瘤细胞的恶性表型 1、阻断癌基因的表达:许多肿瘤细胞癌基因表达过度,可通过抑制癌基因的表达来治疗肿瘤。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 转基因 治疗肿瘤 恶性表型 反义核酸 基因导入 免疫原性 肿瘤基因治疗 癌基因 免疫效应细胞
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蛋白质溶液中内毒素污染去除方法研究进展
14
作者 张景迎 刘德铮 《泰山医学院学报》 1994年第4期324-326,共3页
蛋白质溶液中内毒素污染去除方法研究进展张景迎,刘德铮(生物化学教研室北京卫生部生物制品研究所)细菌内毒素(ET)是G-菌细胞壁内的、性质非常稳定的:具有生物学活性的脂质-糖复合物(LPS)。ET广泛存在于化学制剂、生... 蛋白质溶液中内毒素污染去除方法研究进展张景迎,刘德铮(生物化学教研室北京卫生部生物制品研究所)细菌内毒素(ET)是G-菌细胞壁内的、性质非常稳定的:具有生物学活性的脂质-糖复合物(LPS)。ET广泛存在于化学制剂、生物制剂和药物,甚至DNA重组产物中... 展开更多
关键词 蛋白质溶液 内毒素 污染 去除法
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无细胞百日咳菌苗的简易制备方法及其检定
15
作者 张景迎 刘德铮 《泰山医学院学报》 1993年第4期265-267,共3页
报道一种简易制备无细胞百日咳菌苗(APV)的方法。SDS—PAGE证实抗原纯度高;免疫小鼠血清ELISA滴度高。此外,小鼠毒性、家兔热原及效力试验显示制得菌苗均符合规程要求。本方法是一种可行的候选方法。
关键词 百日咳 丝状血凝素 疫苗 制备
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阳离子脂质体介导细胞因子基因对小鼠肝癌抑制的作用 被引量:4
16
作者 王克敏 赵宇 +2 位作者 张景迎 夏爱娣 陈诗书 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第6期504-507,共4页
目的观察阳离子脂质体介导细胞因子TNF-a及IL-2基因对小鼠肝癌的抑制作用。方法构建含细胞因子TNF-a及IL-2的质粒载体,用阳离子脂质体LipofectAMINE或DOSPER介导的含细胞因子TNF-a及IL-... 目的观察阳离子脂质体介导细胞因子TNF-a及IL-2基因对小鼠肝癌的抑制作用。方法构建含细胞因子TNF-a及IL-2的质粒载体,用阳离子脂质体LipofectAMINE或DOSPER介导的含细胞因子TNF-a及IL-2的质粒DNA分别体外转染小鼠肝癌细胞株MM45T.Li,并在荷瘤小鼠体内分别直接注射上述阳离子脂质体-DNA复合物,观察瘤体大小及小鼠生存期。结果两种阳离子脂质体介导的细胞因子转染后都具有生物学活性,转染效率为10%左右,瘤内注射后均能延长荷瘤小鼠的生存期。DOSPER介导细胞因子的治疗效果较佳。结论LipofectAMINE或DOSPER介导细胞因子TNF-a及IL-2基因均具有抑制小鼠肝癌生长、延长荷瘤小鼠生存期的作用,DOSPER的效果较好。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 细胞因子 肝癌 基因转移 基因治疗
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P53病毒增强型质粒-脂质体复合物对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用 被引量:2
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作者 梁宏立 朱洪生 +2 位作者 张景迎 黄忠耀 陈诗书 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2001年第1期1-4,共4页
目的 :研究腺相关病毒增强型质粒载体介导的 p5 3基因对血管平滑肌细胞 ( VSMC)的作用 ,探讨其用于防治冠状动脉旁路术后移植血管再狭窄等心血管内外科疾病的可能性。方法 :构建了野生型 p5 3基因的腺相关病毒增强型质粒表达载体 ,通过... 目的 :研究腺相关病毒增强型质粒载体介导的 p5 3基因对血管平滑肌细胞 ( VSMC)的作用 ,探讨其用于防治冠状动脉旁路术后移植血管再狭窄等心血管内外科疾病的可能性。方法 :构建了野生型 p5 3基因的腺相关病毒增强型质粒表达载体 ,通过阳离子脂质体 Dosper介导 ,体外转染VSMC。聚合酶链技术检测外源基因表达。应用细胞计数及 DNA合成分析技术 ,测定 p5 3基因对VSMC增殖的抑制效应。结果 :外源性 p5 3基因可有效导入 VSMC并表达 ;p5 3基因导入可显著抑制细胞生长 ,DNA合成减少。结论 :野生型 p5 3基因腺相关病毒增强型质粒载体转染 展开更多
关键词 腺相关病毒质粒载体 P53基因 脂质体 血管平滑肌细胞 细胞增殖 基因治疗
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激光角膜光学切除术后兔角膜上皮细胞凋亡的研究 被引量:1
18
作者 钟一声 张景迎 +3 位作者 王康孙 周颍明 廉井才 叶纹 《眼科新进展》 CAS 2000年第2期110-111,共2页
Objective To evaluate the level of apoptosis in the corneal epithelium after photorefractive keratectomy(PRK).Methods Six rabbits were anesthetized systemically with sodium pentobarbital.PRK was then performed and the... Objective To evaluate the level of apoptosis in the corneal epithelium after photorefractive keratectomy(PRK).Methods Six rabbits were anesthetized systemically with sodium pentobarbital.PRK was then performed and the central 5.6mm area of the cornea was ablated to a depth of 156μm(-8.0D).Rabbits were killed 1 month and 3 months after the performance respectivelly,and the cornea were prepared for frozen tissue sections.The apoptosis of the corneal epithelium was evaluated by TUNEL method.Results The normal corneal epithelium exhibited a limited level of apoptosis,primarily in the superficial epithelium.The entire epithelial layer was found to be apoptotic 1 month after PRK.The apoptosis of the corneal epithelium 3 months after PRK was the same as the normal corneal epithelium.Conclusion The apoptosis of corneal epithelium exist in wound healing process after PRK.The findings suggest that apoptosis plays an important role in the corneal wound healing process. 展开更多
关键词 角膜光学切除术 角膜上皮 近视 PRK 细胞凋亡
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内含子增强脂质体介导的转基因表达 被引量:4
19
作者 王泽平 张景迎 庞呈义 《泰山医学院学报》 2000年第2期92-94,共3页
:目的 观察内含子对脂质体介导的转基因表达的影响。方法 首先构建含内含子intronA、IL 2基因、IFN γ基因的质粒表达载体 ,然后经阳离子脂质体LipofectAMINE介导转染小鼠成纤维细胞NIH3T3。生物活性法检测IL 2基因或IFN γ基因表达... :目的 观察内含子对脂质体介导的转基因表达的影响。方法 首先构建含内含子intronA、IL 2基因、IFN γ基因的质粒表达载体 ,然后经阳离子脂质体LipofectAMINE介导转染小鼠成纤维细胞NIH3T3。生物活性法检测IL 2基因或IFN γ基因表达水平。结果 含内含子的载体其IL 2或IFN γ表达水平高于不含内含子的载体(P <0 0 5 )。 展开更多
关键词 内含子 脂质体 白细胞介素2 Γ-干扰素 基因表达
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兔自体移植静脉基因转移模型的建立 被引量:1
20
作者 梁宏立 朱洪生 +3 位作者 黄忠耀 崔世涛 张景迎 陈诗书 《上海实验动物科学》 2000年第1期3-6,共4页
兔颈动脉颈静脉旁路手术后 ,将阳离子脂质体 DOSPER介导的 p5 3腺相关病毒增强型质粒表达载体 ,经腔内加压灌注转染移植静脉。 RT PCR和免疫组化检测证明 ,外源性 p5 3基因在移植血管中表达出相应的 m RNA及 p5 3蛋白。结果提示
关键词 移植静脉 基因转移 CABG 腔内加压灌注法 P53
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