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重组小纤溶酶的制备及其生物学活性
被引量:
2
1
作者
张晴妮
徐骥
+3 位作者
李飞
芮康宁
贾世香
杨子义
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2008年第8期701-704,共4页
目的制备重组小纤溶酶,并检测其生物学活性。方法将重组质粒pET11a-miniPlg转化E.coli BL21(DE3),进行诱导表达。收获菌体,提取包涵体,经复性、层析纯化、尿激酶激活,制备小纤溶酶。进行初步理化鉴定后,采用生色底物法测定其体外活性,...
目的制备重组小纤溶酶,并检测其生物学活性。方法将重组质粒pET11a-miniPlg转化E.coli BL21(DE3),进行诱导表达。收获菌体,提取包涵体,经复性、层析纯化、尿激酶激活,制备小纤溶酶。进行初步理化鉴定后,采用生色底物法测定其体外活性,采用动物模型进行体内溶栓试验,并与重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)进行比较。结果小纤溶酶的表达量约占菌体总蛋白的30%~35%,纯化收率约为15%,得率为4.93mg/g菌体湿重,相对分子质量为38527,N-、C-端氨基酸序列与理论值一致。制备的小纤溶酶比活性为115IU/mg,动物模型溶栓试验中表现出良好的溶栓效果,对纤溶系统和凝血系统影响轻微。结论所制备的重组小纤溶酶具有良好的生物学活性,溶栓效果及安全性均优于rt-PA。
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关键词
小纤溶酶
生物学活性
溶栓
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职称材料
突变型干扰素-τ的表达、纯化及其抗乙型肝炎病毒作用
2
作者
张晴妮
徐骥
+2 位作者
芮康宁
罗鹏
杨子义
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2008年第11期988-991,共4页
目的在毕赤酵母中表达突变型干扰素-τ(IFN-τ),并检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用。方法将绵羊IFN-τ序列中6个氨基酸突变为人IFN-α相应的氨基酸,将合成的基因克隆至pPICZα质粒,构建突变型IFN-τ表达质粒pPICZα-IFN-τ,转化...
目的在毕赤酵母中表达突变型干扰素-τ(IFN-τ),并检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用。方法将绵羊IFN-τ序列中6个氨基酸突变为人IFN-α相应的氨基酸,将合成的基因克隆至pPICZα质粒,构建突变型IFN-τ表达质粒pPICZα-IFN-τ,转化巴斯德毕赤酵母中进行高密度发酵。发酵上清液经超滤浓缩、离子交换层析和分子筛层析纯化后,检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用,并与市售IFN-α2a进行比较。结果发酵上清液中突变型IFN-τ的表达量为400~500mg/L,占上清总蛋白的40%以上;纯化收率达31.4%,纯度约为95%;比活为2.1×107IU/mg;对乙型肝炎病毒的抑制作用与IFN-α2a相当,但细胞毒性显著低于后者。结论已在毕赤酵母中高效表达了突变型IFN-τ,表达的蛋白具有较高的生物学活性,对乙型肝炎病毒有良好的抑制作用,且细胞毒性较低。
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关键词
干扰素-τ
突变型
毕赤酵母
抗病毒作用
乙型肝炎病毒
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职称材料
纤溶酶溶栓新药的研究进展
被引量:
3
3
作者
张晴妮
杨子义
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2009年第5期518-521,共4页
纤维蛋白溶酶(纤溶酶)与传统的纤溶酶原激活剂相比,具有更为理想的溶栓效果和安全性。本文对纤溶酶、微纤溶酶及小纤溶酶作为溶栓新药的研究进展作一综述。
关键词
纤溶酶
微纤溶酶
小纤溶酶
溶栓
原文传递
心内膜心肌活检在儿童心肌疾病诊断中的应用价值与安全性
被引量:
2
4
作者
产文秀
傅立军
+4 位作者
郭颖
陈轶维
朱荻绮
徐欣怡
张晴妮
《中华实用儿科临床杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期89-93,共5页
目的探讨心内膜心肌活检(EMB)在儿童心肌疾病诊断中的应用价值与安全性。方法收集2016年1月至2020年8月在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心进行EMB的全部患儿的人口统计学资料、临床资料及病理资料,回顾性分析其病理诊断结果及...
目的探讨心内膜心肌活检(EMB)在儿童心肌疾病诊断中的应用价值与安全性。方法收集2016年1月至2020年8月在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心进行EMB的全部患儿的人口统计学资料、临床资料及病理资料,回顾性分析其病理诊断结果及手术相关并发症发生率。结果共纳入进行EMB的患儿22例,年龄为(10.2±3.1)岁,其中13例(59.1%)行右心室EMB,5例(22.7%)行左心室EMB,4例(18.2%)行双心室EMB。在12例临床疑诊为心肌炎或原因不明的心力衰竭患儿中,4例确诊为淋巴细胞性心肌炎,2例确诊为扩张型心肌病,1例确诊为炎症性心肌病;7例表现为心室舒张功能障碍的患儿中,6例确诊为限制型心肌病,1例诊断为缩窄性心包炎;3例合并预激综合征的肥厚型心肌病患儿中,2例确诊为糖原贮积性心肌病。所有患儿的手术过程顺利,无患儿死亡,无手术相关并发症发生。结论EMB有助于某些儿童心肌疾病的诊断与治疗选择。在有条件的儿童心血管病诊疗中心由经验丰富的介入专家操作的情况下,EMB的并发症少见,安全性高。
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关键词
心内膜心肌活检
心肌炎
心肌病
并发症
儿童
原文传递
破骨细胞抑制因子生物活性定量测定方法的建立
5
作者
杨子义
张晴妮
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2009年第10期1026-1028,1035,共4页
目的以破骨细胞为模型,建立抑制破骨细胞功能药物的生物活性定量测定方法。方法将小鼠RAW264.7和SP2/0细胞在含地塞米松和1,25(OH)2VitD3的破骨细胞诱导分化液中混合培养,通过TRAP染色鉴定破骨细胞的成熟。加入不同浓度的rhOPG-Fc,检测...
目的以破骨细胞为模型,建立抑制破骨细胞功能药物的生物活性定量测定方法。方法将小鼠RAW264.7和SP2/0细胞在含地塞米松和1,25(OH)2VitD3的破骨细胞诱导分化液中混合培养,通过TRAP染色鉴定破骨细胞的成熟。加入不同浓度的rhOPG-Fc,检测其对RAW264.7细胞增殖、分化和成熟破骨细胞活性的抑制作用,计算药物的IC50,并定量计算活性单位。结果rhOPG-Fc对RAW264.7细胞增殖抑制的IC50为0.02mg/L,其生物活性为50U/mg;对RAW264.7细胞分化抑制的IC50为0.02mg/L,其生物活性为50U/mg;对成熟破骨细胞活性抑制的IC50为0.18mg/L,其生物活性为5.5U/mg。结论以破骨细胞抑制因子为候选药物所建立的细胞学模型,可方便快速地定量测定破骨细胞抑制类药物的生物活性,且能协助判断药物的作用机理。
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关键词
破骨细胞
抑制因子
生物活性
定量测定
原文传递
题名
重组小纤溶酶的制备及其生物学活性
被引量:
2
1
作者
张晴妮
徐骥
李飞
芮康宁
贾世香
杨子义
机构
上海富纯中南生物技术有限公司
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2008年第8期701-704,共4页
文摘
目的制备重组小纤溶酶,并检测其生物学活性。方法将重组质粒pET11a-miniPlg转化E.coli BL21(DE3),进行诱导表达。收获菌体,提取包涵体,经复性、层析纯化、尿激酶激活,制备小纤溶酶。进行初步理化鉴定后,采用生色底物法测定其体外活性,采用动物模型进行体内溶栓试验,并与重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)进行比较。结果小纤溶酶的表达量约占菌体总蛋白的30%~35%,纯化收率约为15%,得率为4.93mg/g菌体湿重,相对分子质量为38527,N-、C-端氨基酸序列与理论值一致。制备的小纤溶酶比活性为115IU/mg,动物模型溶栓试验中表现出良好的溶栓效果,对纤溶系统和凝血系统影响轻微。结论所制备的重组小纤溶酶具有良好的生物学活性,溶栓效果及安全性均优于rt-PA。
关键词
小纤溶酶
生物学活性
溶栓
Keywords
Mini-plasmin
Biological activity
Thrombolysis
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
R392-3 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
突变型干扰素-τ的表达、纯化及其抗乙型肝炎病毒作用
2
作者
张晴妮
徐骥
芮康宁
罗鹏
杨子义
机构
上海富纯中南生物技术有限公司
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2008年第11期988-991,共4页
基金
浦东新区科技专项基金项目(PKJ2004-76)
文摘
目的在毕赤酵母中表达突变型干扰素-τ(IFN-τ),并检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用。方法将绵羊IFN-τ序列中6个氨基酸突变为人IFN-α相应的氨基酸,将合成的基因克隆至pPICZα质粒,构建突变型IFN-τ表达质粒pPICZα-IFN-τ,转化巴斯德毕赤酵母中进行高密度发酵。发酵上清液经超滤浓缩、离子交换层析和分子筛层析纯化后,检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用,并与市售IFN-α2a进行比较。结果发酵上清液中突变型IFN-τ的表达量为400~500mg/L,占上清总蛋白的40%以上;纯化收率达31.4%,纯度约为95%;比活为2.1×107IU/mg;对乙型肝炎病毒的抑制作用与IFN-α2a相当,但细胞毒性显著低于后者。结论已在毕赤酵母中高效表达了突变型IFN-τ,表达的蛋白具有较高的生物学活性,对乙型肝炎病毒有良好的抑制作用,且细胞毒性较低。
关键词
干扰素-τ
突变型
毕赤酵母
抗病毒作用
乙型肝炎病毒
Keywords
Interferon-τ
Mutant
Pichia pastoris,
Antiviral effect
Hepatitis B virus
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
Q978.7 [生物学]
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职称材料
题名
纤溶酶溶栓新药的研究进展
被引量:
3
3
作者
张晴妮
杨子义
机构
上海富纯中南生物技术有限公司
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2009年第5期518-521,共4页
文摘
纤维蛋白溶酶(纤溶酶)与传统的纤溶酶原激活剂相比,具有更为理想的溶栓效果和安全性。本文对纤溶酶、微纤溶酶及小纤溶酶作为溶栓新药的研究进展作一综述。
关键词
纤溶酶
微纤溶酶
小纤溶酶
溶栓
Keywords
Plasmin
Microplasmin
Miniplasmin
Thrombolysis
分类号
R972 [医药卫生—药品]
原文传递
题名
心内膜心肌活检在儿童心肌疾病诊断中的应用价值与安全性
被引量:
2
4
作者
产文秀
傅立军
郭颖
陈轶维
朱荻绮
徐欣怡
张晴妮
机构
上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心心血管内科
出处
《中华实用儿科临床杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期89-93,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(81770380,81974029)。
文摘
目的探讨心内膜心肌活检(EMB)在儿童心肌疾病诊断中的应用价值与安全性。方法收集2016年1月至2020年8月在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心进行EMB的全部患儿的人口统计学资料、临床资料及病理资料,回顾性分析其病理诊断结果及手术相关并发症发生率。结果共纳入进行EMB的患儿22例,年龄为(10.2±3.1)岁,其中13例(59.1%)行右心室EMB,5例(22.7%)行左心室EMB,4例(18.2%)行双心室EMB。在12例临床疑诊为心肌炎或原因不明的心力衰竭患儿中,4例确诊为淋巴细胞性心肌炎,2例确诊为扩张型心肌病,1例确诊为炎症性心肌病;7例表现为心室舒张功能障碍的患儿中,6例确诊为限制型心肌病,1例诊断为缩窄性心包炎;3例合并预激综合征的肥厚型心肌病患儿中,2例确诊为糖原贮积性心肌病。所有患儿的手术过程顺利,无患儿死亡,无手术相关并发症发生。结论EMB有助于某些儿童心肌疾病的诊断与治疗选择。在有条件的儿童心血管病诊疗中心由经验丰富的介入专家操作的情况下,EMB的并发症少见,安全性高。
关键词
心内膜心肌活检
心肌炎
心肌病
并发症
儿童
Keywords
Endomyocardial biopsy
Cardiomyopathy
Myocarditis
Complications
Child
分类号
R725.4 [医药卫生—儿科]
原文传递
题名
破骨细胞抑制因子生物活性定量测定方法的建立
5
作者
杨子义
张晴妮
机构
杰华生物技术(北京)有限公司
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2009年第10期1026-1028,1035,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2002AA214081)
文摘
目的以破骨细胞为模型,建立抑制破骨细胞功能药物的生物活性定量测定方法。方法将小鼠RAW264.7和SP2/0细胞在含地塞米松和1,25(OH)2VitD3的破骨细胞诱导分化液中混合培养,通过TRAP染色鉴定破骨细胞的成熟。加入不同浓度的rhOPG-Fc,检测其对RAW264.7细胞增殖、分化和成熟破骨细胞活性的抑制作用,计算药物的IC50,并定量计算活性单位。结果rhOPG-Fc对RAW264.7细胞增殖抑制的IC50为0.02mg/L,其生物活性为50U/mg;对RAW264.7细胞分化抑制的IC50为0.02mg/L,其生物活性为50U/mg;对成熟破骨细胞活性抑制的IC50为0.18mg/L,其生物活性为5.5U/mg。结论以破骨细胞抑制因子为候选药物所建立的细胞学模型,可方便快速地定量测定破骨细胞抑制类药物的生物活性,且能协助判断药物的作用机理。
关键词
破骨细胞
抑制因子
生物活性
定量测定
Keywords
Osteoclast
Suppressor
Biological activity
Quantitative determination
分类号
Q-33 [生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组小纤溶酶的制备及其生物学活性
张晴妮
徐骥
李飞
芮康宁
贾世香
杨子义
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2008
2
下载PDF
职称材料
2
突变型干扰素-τ的表达、纯化及其抗乙型肝炎病毒作用
张晴妮
徐骥
芮康宁
罗鹏
杨子义
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2008
0
下载PDF
职称材料
3
纤溶酶溶栓新药的研究进展
张晴妮
杨子义
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2009
3
原文传递
4
心内膜心肌活检在儿童心肌疾病诊断中的应用价值与安全性
产文秀
傅立军
郭颖
陈轶维
朱荻绮
徐欣怡
张晴妮
《中华实用儿科临床杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
原文传递
5
破骨细胞抑制因子生物活性定量测定方法的建立
杨子义
张晴妮
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2009
0
原文传递
已选择
0
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