枳椇果梗多糖的提取工艺优化及其抗氧化性

为获得枳椇果梗多糖,并进一步评价其自由基清除及抑制生物大分子(蛋白质、脂质、DNA)氧化的能力。以枳椇果梗为试验材料,在单因素实验的基础上,结合正交试验及方差分析优化枳椇果梗多糖热水提取工艺条件;对所提多糖清除DPPH、ABTS+自由基能力进行测定;并利用Cu^(2+)/H_(2)O_(2)、FeSO_(4)、APPH分别诱导牛血清蛋白、亚油酸、鲱鱼精子DNA氧化,构建体外蛋白质、脂质、DNA氧化模型,对所提多糖体外抑制生物大分子氧化能力进行评价。结果表明:醇沉体积分数对枳椇果梗多糖的得率有显著性(P<0.05)的影响,最佳的热水提取工艺条件为:料液比1:25 g/mL,提取温度85℃,提取时间1 h,醇沉体积分数80%,此时多糖得率为3.06%±0.181%;且随着浓度的增大,所提多糖对自由基的清除和生物大分子的氧化抑制效果也逐渐提高,对DPPH自由基、ABTS+自由基清除IC_(50)分别为1.687、1.824 mg/mL,对牛血清蛋白羰基化、亚油酸过氧化和鲱鱼精子DNA氧化抑制IC_(50)分别为:13.84、10.88、74.70 mg/mL。研究结果可为枳椇果梗多糖的提取及在功能性食品中的应用提供参考。

学生视角下高校线上线下混合式教学模式的优势及实施策略---以“食品毒理学”课程为例

进行线上线下混合式教学已成为现阶段高校教学模式改革的必然趋势,对传统课堂教学产生了一定的冲击。如何有效地进行线上线下衔接,提升和完善混合式教学各环节的教学效果是亟待解决的问题。作为整个教学过程的主要参与者之一,切实了解学生对于混合式教学的认识和需求,对于有效推进教学改革则尤为重要。以“食品毒理学”课程为例,从学生的视角出发,对线上线下混合式教学模式的优势进行阐述,并对如何提升教学效果提出实施策略,为教学实施者有效推进线上下线混合式教学模式改革提供参考。

PM_(2.5)与甲醛联合暴露对出生早期大鼠自闭症样病变的影响

为探究典型室外、室内空气污染物PM_(2.5)和甲醛(FA)联合暴露对出生早期大鼠自闭症(ASD)样病变的影响及作用机制。以出生7 d的SD大鼠为受试动物,设置空白对照组、PM_(2.5)暴露组(0.1351 mg·kg^(-1)·d^(-1))、FA暴露组(0.1085 mg·kg^(-1)·d^(-1))、联合暴露组(0.1351 mg·kg^(-1)·d^(-1)PM_(2.5)+0.1085 mg·kg^(-1)·d^(-1))对其进行连续14 d的鼻腔内暴露。通过三箱社交试验、埋珠试验、旷场试验和Morris水迷宫试验对小鼠行为学变化进行检测,观察小鼠脑组织病理变化及胶质细胞激活情况。对小鼠脑组织中氧化应激、炎症因子表达水平和MAPK信号通路关键分子P38、JNK磷酸化情况进行检测。结果显示,PM_(2.5)和FA联合暴露后小鼠出现社交障碍、重复刻板行为、认知和探索能力下降等典型ASD样行为变化,脑组织中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平上升;谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶活性(SOD)下降;促炎症因子(IL-2、MCP-1、IL-6、IL-17、INF-γ、sTNFRI、TNF-α、MCP-5)表达量增加;P38和JNK磷酸化水平升高。研究表明,0.1351 mg·kg^(-1)·d^(-1)PM_(2.5)、0.1085 mg·kg^(-1)·d^(-1)FA暴露并未对出生早期大鼠产生显著影响,但二者联合暴露会导致大鼠出现ASD样病变,MAPK信号通路激活、脑组织氧化应激和神经炎症水平的升高参与了联合暴露的致损伤过程。

增塑剂乙酰柠檬酸三丁酯暴露对学习记忆能力的影响及V_(E)保护作用

为探究增塑剂乙酰柠檬酸三丁酯(Acetyl Tributyl Citrate, ATBC)暴露对学习记忆能力的影响以及维生素E(Vitmain E,V_(E))的保护作用。采用灌胃暴露的方式对C57BL/6小鼠进行连续90 d的ATBC暴露(200 mg/kg·day),另设V_(E)保护组,在ATBC暴露同时进行50 mg/kg·day V_(E)灌胃。通过Morris水迷宫实验和跳台实验检测各组小鼠的学习记忆能力,观察小鼠脑组织损伤程度,检测小鼠脑组织氧化应激和炎症反应水平进行检测。结果显示,在该实验条件下ATBC暴露会导致小鼠学习记忆障碍;脑海马组织和大脑皮层结构异常;脑组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯酸(4-hydroxynoneal,4-HNE)含量显著性上升(P<0.05),而还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性出现下降;小鼠脑组织核转录因子(Nuclear transcription,NF-κB)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)水平显著上升(P<0.05)。而同时进行V_(E)灌胃后,保护组小鼠学习记忆能力显著性提高(P<0.05),脑海马组织和大脑皮层结构异常有所改善,脑组织ROS、MDA、4-HNE、NF-κB、TNF-α、IL-1β含量显著性下降(P<0.05),GSH含量和SOD活性出现显著性上升(P<0.05)。本研究说明200 mg/kg·day ATBC连续90 d的灌胃暴露会引起小鼠学习记忆障碍和脑组织损伤,而V_(E)可以通过下调脑组氧化应激和炎症水平对小鼠脑组织进行保护,学习记忆障碍有显著改善。

低剂量酒精摄入对不同性别2型糖尿病小鼠的影响

为探究低剂量酒精摄入对不同性别2型糖尿病(T2DM)小鼠影响的差异性及可能机制,采用链脲佐菌素(STZ)处理高脂高糖饲料喂养的小鼠构建T2DM模型,以灌胃200 mg/(kg·d)二甲双胍的T2DM小鼠为阳性对照,连续灌胃低剂量酒精(0.033 mL/d)30 d后,测定不同性别小鼠的糖脂代谢相关指标和胰腺组织氧化应激水平,并观察胰腺组织中胰岛的损伤、测定胰岛素的表达情况。结果表明,连续30 d摄入低剂量酒精可加重T2DM雄性小鼠糖脂代谢紊乱及胰腺组织中胰岛损伤,降低胰岛素表达量,上调T2DM雄性小鼠胰腺组织氧化应激水平,但并未对T2DM雌性小鼠产生显著影响,推测胰腺组织氧化应激水平的差异性影响可能是低剂量酒精对不同性别T2DM小鼠产生差异影响的主要机制之一。

枳椇果梗黄酮的提取及其抗氧化性

为获得枳椇(Hovenia dulcis)果梗黄酮并对所得黄酮的抗氧化性进行评价,以枳椇果梗为原料,采用单因素结合响应面优化得到枳椇果梗黄酮的提取条件;经AB-8树脂分离纯化、真空旋转蒸发浓缩、冷冻干燥后得到枳椇果梗黄酮;并对该黄酮的自由基清除能力进行测定,同时以牛血清蛋白、亚油酸和鲱鱼精子DNA为对象构建体外蛋白质、脂质、DNA的氧化体系,测定其对生物大分子氧化的抑制效果。结果表明:枳椇果梗黄酮的最佳提取条件为料液比1:30(g/mL)、温度30℃、时间60 min、乙醇体积分数80%,在该条件下黄酮的得率为(3.17±0.03)%,纯度为66.67%;该黄酮对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除的IC_(50)分别为(191.6±15.37)、(176.5±17.25)μg/mL,且对牛血清蛋白羰基化、亚油酸和鲱鱼精子DNA氧化均有较好的抑制作用,说明所得黄酮具有良好的抗氧化性。研究结果可为枳椇果梗黄酮的提取及抗氧化性研究提供一定的参考。

邻苯二甲酸二戊酯半抗原的合成及酶联免疫分析法的建立

邻苯二甲酸二戊酯(DAP)是一种常见的邻苯二甲酸酯类增塑剂,使用范围广泛。为构建一种DAP简便、准确的检测方法,首先进行DAP半抗原的合成,得到半抗原4-氨基邻苯二甲酸二戊酯(DPAP);采用重氮法将DPAP与蛋白质进行偶联得到DAP完全人工抗原,对免疫BALB/c小鼠进行免疫;免疫后取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合,筛选得到一株可产生DAP单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。随后对DPA的间接竞争酶联免疫检测法进行构建,对检测条件进行优化确定最佳检测方法。所制备的DAP MAb特异性强,与DAP结构类似物产生交叉反应的反应率低。所构建的检测法最低检测限IC_(10)为0.51 ng/mL,半数抑制率IC_(50)为17.83 ng/mL,水样中加标回收率为95.36%~104.5%,可用于实际样品中DAP含量的检测,具有良好的应用前景。