别嘌醇下调尿酸介导的大鼠血管平滑肌细胞赖安酰氧化酶的表达

目的研究别嘌醇对尿酸介导的大鼠血管平滑肌细胞赖安酰氧化酶(LOX)和磷酸化p-38(P-p38)表达的影响。方法大鼠血管平滑肌细胞分为三组:空白对照组;尿酸组(尿酸40 mg/L干预48 h);别嘌醇组(尿酸40 mg/L及别嘌醇0.3 mmol/L干预48 h)。共聚焦显微镜观察细胞内活性氧情况。提取大鼠血管平滑肌细胞RNA和蛋白,实时荧光定量PCR和Western Blot测定LOX、p-38及P-p38mRNA和蛋白表达。结果尿酸组血管平滑肌细胞增殖量、细胞内活性氧、LOX及P-p38的mRNA和蛋白水平明显高于对照组;别嘌醇组血管平滑肌细胞增殖量、细胞内活性氧、LOX及P-p38的mRNA和蛋白表达水平明显下调(P<0.01)。结论别嘌醇可抑制尿酸介导的大鼠血管平滑肌细胞LOX和P-p38表达。

经导管主动脉瓣置换术后“自杀左室”现象研究进展

经导管主动脉瓣置换术(TAVR)是通过患者的动静脉系统或左心室心尖,利用介入导管将人工心脏瓣膜输送至主动脉瓣区后释放,替代原有主动脉瓣实现正常的生理功能。“自杀左室”现象是指TAVR后解除主动脉瓣狭窄的固定瓣膜阻塞后,由于左心室肥厚和收缩亢进等机制导致动态左心室梗阻的发生,进而出现的自相矛盾的血流动力学崩溃现象,临床表现为术中或术后数小时内发生的对正性肌力药物无效的反常持续低血压。随着经导管主动脉瓣手术适应证涵盖低中高危重度主动脉瓣狭窄患者,手术相关并发症报道逐渐增多,“自杀左室”这种致命的潜在并发症值得研究和探索。本文主要从“自杀左室”的概述、病理机制、风险相关指标、预防策略及治疗方法4个方面进行综述,以期对可能有“自杀左室”风险的主动脉瓣狭窄患者高度警惕并做好相应应急预案,从而最大限度地降低围术期死亡率。

阿托伐他汀预处理对缺氧复氧后乳鼠心肌细胞的保护作用及其机制

目的探讨阿托伐他汀预处理对缺氧复氧后乳鼠心肌细胞的保护作用是否与线粒体ATP敏感的钾通道(mitoKATPC)和线粒体膜通透性转换孔(MPTP)有关。方法将原代培养的C57BL/6乳鼠心肌细胞随机分为五组,control组常规培养,H/R组、Ator组、5-HD+Ator组和LND+Ator组均进行缺氧复氧处理(缺氧12 h、复氧6 h);Ator组缺氧复氧前给予1μmol/L阿托伐他汀预处理3 h,5-HD+Ator组缺氧复氧前给予100μmol/L mitoK_(ATP)C通道阻断剂5-羟基葵酸+1μmol/L阿托伐他汀干预3 h,LND+Ator组缺氧复氧前给予1μmol/L阿托伐他汀干预3 h+30μmol/L MPTP开放剂氯尼达明干预20 min。采用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞内钙离子浓度、线粒体膜电位、MPTP开放情况和活性氧(ROS)含量。结果与control组比较,H/R组、Ator组、5-HD+Ator组、LND+Ator组细胞存活率均降低、钙离子浓度均升高,H/R组、5-HD+Ator组、LND+Ator组线粒体膜电位均降低、MPTP开放程度及ROS含量均升高(P均<0.05)。与H/R组、5-HD+Ator组、LND+Ator组比较,Ator组细胞存活率、线粒体膜电位均升高,钙离子浓度、MPTP开放程度及ROS含量均降低(P均<0.05)。结论阿托伐他汀对缺氧复氧后的乳鼠心肌细胞具有保护作用,其机制可能与开放mitoK_(ATP)C和关闭MPTP从而抑制ROS生成有关。

D型钠尿肽对豚鼠胃窦环形肌细胞钙敏感钾电流的影响及其作用机制

[目的]记录D型钠尿肽(DNP)对豚鼠胃窦环形肌钙敏感钾电流[IK(Ca)]的影响以探讨DNP抑制胃动力的离子通道机制。[方法]用全细胞式膜片钳技术观察DNP对豚鼠胃窦环形肌细胞IK(Ca)和瞬间外向钾电流(STOCs)的影响。[结果]DNP明显增加豚鼠胃窦环形肌IK(Ca)和STOCs,并显示剂量依赖关系。0.1、1、10和100nmol/L的DNP能增加IK(Ca)的幅度,分别为(16.7±1.12)%、(26.5±2.3)%、(46.2±3.3)%和(58.3±3.7)%。细胞外液用无钙液或Rynodine受体的阻断剂均不能阻断此效应,但IP3受体的阻断剂肝素或鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583能抑制这种效应。另外,cGMP敏感的磷酸酯酶抑制剂Zaparinast可明显增强DNP对STOCs的增加作用。[结论]DNP通过增加cGMP的产生和激活IP3受体使豚鼠胃窦环形肌细胞上IK(Ca)增加,细胞超极化,从而实现对胃窦环形肌的舒张作用。

D型钠尿肽对豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动的影响及机制探讨

目的观察豚鼠胃内是否存在钠尿肽受体(NPR)并观察D型钠尿肽(DNP)对豚鼠胃动力的影响及其机制的研究。方法 NPR在胃内的分布用放射自显影技术检测;胃平滑肌的自发性收缩活动用四道生理记录仪器记录;用膜片钳技术的全细胞技术记录钙敏感钾电流[IK(Ca)]。结果钠尿肽受体存在于豚鼠胃底、胃体和胃窦。并在胃窦部密度最大。DNP抑制胃窦环形肌自发性收缩活动并呈现剂量依赖关系。DNP的这种抑制效应被鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583所减弱而被cGMP敏感的磷酸酯酶抑制剂所增强。非选择性钾通道抑制剂TEA明显抑制DNP对豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动的抑制作用。10nM的DNP增加豚鼠胃窦环形肌上钙敏感钾通道。结论钠尿肽受体存在于豚鼠胃内并在胃窦部位分布密度最大,DNP明显抑制豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动。这种抑制效应可能通过cGMP途径实现并且钙敏感钾通道可能也参与此过程。

cGMP信号传导通路及钙敏感钾通道在D型钠尿肽抑制豚鼠胃动力中的作用

目的观察豚鼠胃内是否存在钠尿肽(NP)受体,并观察cGMP信号传导通路及钙敏感钾通道在D型钠尿肽(DNP)抑制豚鼠胃动力中的作用。方法用放射自显影技术检测NP受体在胃内的分布,用四道生理记录仪记录胃平滑肌的自发性收缩活动,用膜片钳技术的全细胞技术记录钙敏感钾电流。结果 NP受体存在于豚鼠胃底、胃体和胃窦,并在胃窦部密度最大。DNP抑制胃窦环形肌自发性收缩活动并呈现剂量依赖关系,DNP的这种抑制效应被鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583所减弱而被cGMP敏感的磷酸酯酶抑制剂所增强。非选择性钾通道抑制剂四乙胺明显抑制DNP对豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动的抑制作用。10 nmol/L的DNP增加豚鼠胃窦环形肌上钙敏感钾通道。结论 NP受体存在于豚鼠胃内并在胃窦部位分布密度最大,DNP明显抑制豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动,这种抑制效应可能通过cGMP途径实现,并且钙敏感钾通道可能也参与此过程。

钠尿肽系统与胃肠功能障碍性疾病的研究

钠尿肽(natriuretic peptides,NP)是具有生物活性的多聚肽类,以激素或神经递质形式发挥生理作用。自从在胃肠道内发现钠尿肽的免疫反应物质,钠尿肽系统与胃肠功能障碍性疾病的研究越来越受到重视,本文就钠尿肽系统在胃肠道内存在形式、作用机制及胃肠功能障碍性疾病中的作用做一综述。

赖氨酰氧化酶在动脉粥样硬化中的作用

赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)是一种铜依赖性氨基氧化酶,在多个组织器官中均有表达,能参与催化细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中胶原和弹性纤维的赖氨酸残基交联,以维持细胞外基质的结构和功能正常。新近研究发现LOX与动脉粥样硬化亦有紧密关系。本文就LOX在动脉粥样硬化发生、发展过程中的联系作一综述。

川崎病中IgM-AECA通过JNK、p38及NF-κB诱导内皮细胞ICAM-1的表达

目的川崎病(Kawasaki Disease,KD)大部分病人血清中存在抗内皮细胞受体抗体-IgM(IgM An-ti-endothelial cell antibodies,IgM-AECA)。该研究旨在探讨抗内皮细胞受体抗体(AECA)通过何种途径诱导内皮细胞细胞内吸附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达以激活血管内皮细胞。方法检测30名KD患儿血清IgM-AECA浓度,并从17名AECA阳性KD患儿血清中提纯IgM-AECA,用IgM-AECA直接刺激人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAEC)后,通过R T-PCR及ELISA方法检测ICAM-1 mR NA及蛋白的表达,同时应用了PD98059,SB203580,dimethylaminopurine(DMAP)和parthenolide,4种蛋白激酶阻断剂观察IgM-AECA通过何种途径激活HCAEC。结果 KD病人血清中的IgM-AECA可使HCAEC的ICAM-1 mRNA及蛋白表达明显增加,SB203580(p38阻断剂)、DMAP(JNK阻断剂)及parthenolide(NF-κB阻断剂)明显抑制ICAM-1的表达(均P<0.01),而PD98059(ERK1/2阻断剂)不能抑制ICAM-1的表达(P>0.05)。结论 KD病人血清中的IgM-AECA通过增强ICAM-1的表达来激活内皮细胞,IgM-AECA通过p38、JNK MAPK及NF-κB通路诱导ICAM-1的表达,IgM-AECA可能在KD冠状动脉病变的发生中发挥重要作用。

阿托伐他汀对慢性心力衰竭小鼠心肌组织赖氨酰氧化酶表达的影响

目的研究阿托伐他汀对慢性心力衰竭(CHF)小鼠心肌组织赖氨酰氧化酶(LOX)表达的影响及机制。方法选取C57BL/6小鼠复制CHF小鼠模型,再随机分为CHF组10只、阿托伐他汀组11只[阿托伐他汀3 mg/(kg.d)灌胃]和β氨基丙组10只[β氨基丙100mg/(kg.d)灌胃]。另设对照组9只。在4周末将小鼠处死,提取心肌组织RNA及蛋白质,RT-PCR法测定心肌组织LOX、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及NF-κB的mRNA表达水平,Western blot测定心肌组织LOX、磷酸化p38及p38蛋白表达水平。结果 CHF组小鼠心肌组织LOX、MMP-9、NF-κB mRNA表达明显高于对照组(P<0.01);阿托伐他汀组心肌组织LOX、MMP-9、NF-κB mRNA表达较CHF组明显下调(P<0.01)。CHF组心肌组织LOX及磷酸化p38蛋白表达明显高于对照组(P<0.01);与CHF组比较,阿托伐他汀组及β氨基丙组心肌组织LOX及磷酸化p38蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论阿托伐他汀可逆转CHF小鼠心肌组织LOX的表达,LOX可通过调节CHF小鼠心肌组织MMP-9表达,从而抑制心脏重构,这可能是延缓CHF进展的重要机制。

冠状动脉分叉病变的主动球囊保护技术:球囊支架对吻术

冠状动脉分叉病变占总的经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的15％～20％，探索新的有效的冠状动脉分叉病变治疗技术仍然是一条很漫长的路。分叉病变的介入治疗是介入治疗领域的一个难点，其成功率低，主要不良心脏事件［包括围术期心肌梗死（MI）、靶病变血运重建（TLR）、支架内血栓］发生率高[3-5]。因此，分叉病变介入治疗技术的关键是同时保护主支和边支，降低围术期并发症的发生率及减少TLR。

替罗非班在急性心肌梗死患者PCI术中的应用评价

目的:评价替罗非班在急性心肌梗死患者进行PCI术中应用的疗效及安全性。方法:选取急性心肌梗死患者290例,随机分为研究组和对照组各145例。对照组行常规治疗,研究组患者在常规治疗基础上加用替罗非班,对比两组患者的疗效、不良反应及术后并发症等情况。结果:术后TIMI血流分级Ⅲ级方面比较,研究组90.34%,对照组81.38%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。术后7d时左心射血分数上比较,研究组(60.44±5.98)%高于对照组(52.35±6.01)%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。研究组出血26例(17.93%),对照组28例(19.31%),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。研究组30d内主要不良心脏事件10例(6.90%),对照组25例(17.93%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者均未发生血小板减少症。结论:在对急性心肌梗死介入治疗中加入替罗非班,可有效改善患者术后冠状动脉的血流灌注,提高左心室射血的功能,降低30d内主要不良心脏事件的发生率。

老年2型糖尿病肾病合并高血压应用厄贝沙坦联合钙离子拮抗剂治疗的疗效

目的评价厄贝沙坦联合钙离子拮抗剂治疗老年2型糖尿病肾病合并高血压疗效。方法 116例老年2型糖尿病肾病合并高血压患者,随机分为对照组、观察组,各58例,在糖尿病基础治疗基础上,对照组给予苯磺酸氨氯地平,观察组联合厄贝沙坦、苯磺酸氨氯地平,对比降压、血压控制效果与相关指标变化。结果观察组降压显效率、血压控制理想率高于对照组,降压无效率、血压控制差率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组、对照组尿微量白蛋白水平低于治疗前,观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在控制血糖基础上,以厄贝沙坦联合钙离子拮抗剂治疗老年2型糖尿病肾病合并高血压,降压效果较好,还有助于减轻肾肾损伤,对于抑制肾病进展具有重要意义。

尿酸对大鼠血管平滑肌细胞赖氨酰氧化酶和基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的:研究尿酸对大鼠血管平滑肌细胞赖安酰氧化酶(LOX)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法:人工传代培养大鼠血管平滑肌细胞,分为对照组、尿酸组(20、40、60 mg/L尿酸干预48 h;40 mg/L尿酸干预24、48、72 h)、β氨基丙腈组(40 mg/L尿酸干预48 h后加入LOX的特异性抑制剂β氨基丙腈10 mg/ml孵育24 h)。用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧情况。提取大鼠血管平滑肌细胞RNA和蛋白,用逆转录聚合酶链式反应和免疫印迹法测定LOX及MMP-2信使核糖核酸(mRNA)和蛋白的表达水平。结果:尿酸组大鼠血管平滑肌细胞增殖量、细胞内活性氧、LOX及MMP-2的m RNA和蛋白水平均明显高于对照组;与尿酸组相比,β氨基丙腈组大鼠血管平滑肌细胞LOX及MMP-2 mRNA和蛋白表达均明显下调,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论:尿酸可上调大鼠血管平滑肌细胞LOX及MMP-2表达。

血清脂肪细胞因子水平与血管内皮功能及硬化程度的关系

目的分析动脉粥样硬化(AS)患者血清脂肪因子与血管内皮功能和血管硬化程度的相关性,为动脉粥样硬化患者病情评估提供新思路。方法选择2015年2月至2016年2月大连大学附属中山医院收治的90例动脉粥样硬化患者作为研究对象,所有患者均检测血清脂肪细胞因子(血清脂联素、瘦素、抵抗素)、血管内皮功能指标[踝臂血压指数(ABI)、肱脉血流介导的血管舒张功能(FMD)、外周动脉张(PAT)]、血管硬化程度指标[颈总动脉中膜厚度(IMT)、脉搏波传导速度(PWV)]以及颈动脉造影。根据颈动脉造影结果将患者血管硬化狭窄程度分为轻度(33例)、中度(28例)和重度(29例)硬化狭窄。比较三组患者血清脂肪细胞因子水平的差异,同时分别分析血清脂肪细胞因子脂联素、瘦素、抵抗素与血管内皮功能指标、颈总动脉血管硬化程度指标之间的相关性。结果重度患者血清脂联素明显低于轻度和中度组,瘦素和抵抗素明显高于轻度和中度组,而中度组患者血清脂联素明显低于轻度组,瘦素和抵抗素明显高于轻度组,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);血清脂联素与ABI、FMD、PAT、IMT、PWV均呈负相关(r=-0.750、-0.693、-0.802、-0.765、-0.699,P<0.05),血清瘦素与ABI、FMD、PAT、IMT、PWV均呈正相关(r=0.694、0.704、0.721、0.759、0.687,P<0.05),血清抵抗素与ABI、FMD、PAT、IMT、PWV均呈正相关(r=0.705、0.684、0.649、0.731、0.695,P<0.05)。结论血清脂肪细胞因子水平可反映血管内皮功能障碍程度和血管硬化狭窄程度,为AS的病情诊断及治疗监控提供新思路。

冠心病患者PCI后应用氯吡格雷治疗发生出血事件的相关因素研究

目的探讨冠心病患者实施经皮冠状动脉介入术(PCI)后长期应用氯吡格雷治疗发生出血事件的危险因素。方法选取2014年1月至2016年3月大连大学附属中山医院循环二科实施PCI治疗的冠心病患者224例,所有患者术后均常规服用氯吡格雷治疗,对患者均进行了6个月的追踪观察,按照患者是否发生出血事件分为出血组47例、非出血组177例,比较两组各项临床资料。结果冠心病患者PCI术后服用氯吡格雷发生出血事件的独立危险因素为合并高血压、饮酒、消化道溃疡病史、入院诊断为急性冠状动脉综合征(ACS)(OR值分别为1.527、1.908、2.246、1.803,P<0.05)。结论冠心病患者实施PCI后长期应用氯吡格雷治疗发生出血事件的危险因素合并高血压、饮酒、消化道溃疡病史、入院诊断为ACS。

赖氨酰氧化酶与心血管疾病的关系

赖氨酰氧化酶（lysyl oxidase,LOX）是一种铜依赖性氨基氧化酶,相对分子质量为32 000,能参与催化细胞外基质中胶原和弹性纤维的赖氨酸残基交联,以维持细胞外基质的结构和正常功能.近年发现,LOX参与冠心病等心血管疾病的发生和发展,现就其与心血管疾病关系的研究进展做一综述.

α-硫辛酸对半胱氨酸诱导的血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的探讨以同型半胱氨酸(Hcy)预处理血管内皮细胞的损伤作用及不同剂量α-硫辛酸(ALA)对其保护作用。方法将HUVEC-12细胞株进行人工传代培养,并随机分为三组,空白对照组、Hcy组(0.2 mmol/L)、ALA组(0.2 mmol/L Hcy+0.5 mmol/L ALA)。干预24 h后应用MTT法观察其对内皮细胞存活的影响、激光显微镜直接观察其对对内皮细胞内活性氧的影响。结果细胞经Hcy处理后,细胞明显受抑制,且Hcy能诱导内皮细胞产生氧自由基(ROS),而ALA可拮抗Hcy的氧化应激作用,差异具统计学意义(P<0.01)。结论 Hcy可通过增加细胞胞内ROS生成引起内皮细胞氧化损伤,而α-硫辛酸可通过抑制氧化应激保护受损内皮细胞。

赖氨酰氧化酶在半胱氨酸诱导静脉内皮细胞损伤后的表达调节

目的探讨以同型半胱氨酸(Hcy)预处理血管内皮细胞的损伤后赖氨酰氧化酶的表达调节。方法将HUVEC-12细胞株进行人工传代培养,并随机分为四组,空白对照组、低浓度组(Hcy0.05 mmol/L)、中浓度组(Hcy0.2mmol/L)及高浓度组(Hcy0.4mmol/L),干预24h后提取细胞RNA,RT-PCR后以MMP-2、LOX与β-actin的mRNA比值进行半定量分析。结果 Hcy呈浓度依赖性下调内皮细胞LOX表达及上调MMP-2mRNA表达。RT-PCR结果提示予不同浓度Hcy处理后LOX mRNA表达明显减少,呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.01)。MMP-2mRNA表达随Hcy浓度增加而升高。应用LOX抑制剂BAPN后,MMP-2mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Hcy引起内皮细胞MMP-2表达增加,可能是通过Hcy下调细胞LOX表达来实现的。提示Hcy可通过抑制细胞LOX表达引起MMP-2表达异常,促使ECM降解、改变血管壁弹性,从而导致内皮功能障碍。

血清新喋呤对射血分数保留的心力衰竭的辅助诊断意义

目的观察射血分数保留的心力衰竭(HFp EF)患者血清新喋呤的水平,探讨血清新喋呤对HFp EF的辅助诊断意义。方法连续入选2016年10月~2017年8月于大连大学附属中山医院心脏中心住院心功能(NYHA分级)Ⅱ~Ⅳ级HFp EF患者共90例(HEp EF组),另选取同期入院基本临床资料相匹配的非心力衰竭患者80例作为对照组(非HFp EF组)。采集入选者临床资料并分析血清新喋呤与N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)、心脏超声有关参数的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血清新喋呤对HFp EF的辅助诊断意义。结果 HFp EF组中血清新喋呤、NT-pro BNP、肌酐水平均高于非HFp EF组(P<0.05),随着NYHA心功能分级的增加,NT-pro BNP与血清新喋呤逐渐升高(P<0.05);Spearman相关性分析显示,新喋呤与NT-pro BNP、E/E’、左房内径(LAD)、室间隔厚度(IVSD)呈显著正相关,而与LVEF、LVDD未见明显相关性;血清新喋呤诊断HFp EF的ROC曲线下面积(AUC)为0.720(95%CI:0.600~0.830,P<0.05),NT-pro BNP为0.928(95%CI:0.863~0.994,P<0.05),二者联合为0.932(95%CI:0.866~0.998,P<0.05)。结论 HFp EF患者血清新喋呤明显增高,且与心力衰竭的严重程度相关。