玫瑰多糖的酶法提取及柱前衍生HPLC分析

通过酶法提取玫瑰多糖,用柱前衍生高效液相色谱法分析含量。结果表明,非酶法对干花和玫瑰花渣的多糖提取率分别为9.865、5.087 g/100 g;酶法对其的多糖提取率为12.487、7.599 g/100 g。用柱前衍生高效液相色谱法分析玫瑰多糖,发现该多糖是由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖6种单糖组成的,其物质量比为0.934 4∶0.981 8∶1.156 6∶0.976 3∶0.974 0∶0.974 5。酶法提取和不加酶提取的玫瑰多糖一级结构的糖组成相同。

纤维素酶法提取玫瑰花渣多糖工艺研究

采用单因素实验和L9(34)正交试验,研究纤维素酶酶解时间、酶解温度、酶解pH、酶加量对多糖得率的影响。利用还原糖测定仪测定经酸水解的多糖。结果表明,酶的反应温度和酶解pH值是提取玫瑰多糖的主要因素。最佳工艺方案为:酶反应温度50℃,酶反应pH值为4.6,酶反应时间150 min,酶加量为4.5%。酶反应完后以料液比1∶30在100℃下提取5 h,在此工艺条件下,提取液中玫瑰多糖的得率为11.1%,可溶性多糖提取率为4.49%。

高效液相色谱法检测奶糖中海藻糖等糖含量的研究

用高效液相色谱法（HPLC）检测奶糖食品中的海藻糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖。色谱柱为Xbridge-NH2,检测柱温定为35℃,流动相为乙腈∶水=4∶1,按0.1%的量加氨水,检测流速为1.0m L/min,检测器为示差检测器,此条件下,葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和海藻糖能完全的分开,其精密度实验RSD分别为1.6%、1.7%、1%、2.1%;其质量浓度在0~4g/100m L范围内的峰面积与质量浓度成良好线性关系,相关系数R2在0.9997~0.9999之间,回收率在98.4%~99.9%之间。使用该方法测定喔喔奶糖中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和海藻糖的质量分数分别为1.0%、23.0%、15.1%和2.64%。

HPLC法检测海藻糖的研究

建立了一种利用高效液相色谱法检测葡萄糖、麦芽糖和海藻糖混合溶液中海藻糖的方法。采用Xbridge-NH2色谱柱,流动相为乙腈/水=4∶1加0.1%的氨水,流速1.0 mL/min,柱温35℃,该条件下葡萄糖、麦芽糖、海藻糖能完全分开,葡萄糖、麦芽糖、海藻糖的质量浓度在0.1-4.0g/100mL范围与峰面积呈良好线性关系,相关系数R2为0.9998-0.9999,相对标准偏差为1.60%,回收率为98.2%-99.4%。

大肠杆菌产海藻糖合成酶发酵条件优化

采用单因素试验和正交试验,研究海藻糖合成酶发酵过程中加诱导剂时菌浓OD600 nm、诱导温度、诱导时间、海藻糖合成酶转化海藻糖时间4个因素对转化率的影响,确定大肠杆菌产海藻糖合成酶转化海藻糖的最优条件组合。结果表明,转化时间和诱导温度对转化率的影响较大,在大肠杆菌生长到菌浓OD600 nm值为0.8时加诱导剂,诱导温度26℃保持8 h,在转化过程中反应14 h为最佳搭配。在此最佳条件下,海藻糖的转化率可达69.29%。

产海藻糖合酶菌株的筛选及发酵条件的优化

从土壤中分离筛选得到一株能合成海藻糖的菌株,经生物转化途径验证,该菌株含有特异性地将麦芽糖转化为海藻糖的海藻糖合酶,以海藻糖转化率为评价指标,对其进行摇瓶发酵条件的优化。结果表明,其发酵最适条件为:碳源为2%麦芽糖,氮源为0.5%酵母粉和1%蛋白胨,发酵初始pH值为7.0,接种量4%,发酵温度35℃,发酵时间48 h,在此优化条件下,海藻糖的转化率为50%。

基于DO-stat流加培养控制的海藻糖合成酶发酵条件研究

溶氧浓度对重组大肠杆菌的生长和外源蛋白的高效表达影响较大,为进一步增加菌体量和重组蛋白表达量,该研究采用DO-stat流加培养进行控制,分别研究了溶氧浓度20%、30%、35%和40%条件下大肠杆菌的生长情况以及海藻糖合成酶的表达情况。结果表明,当发酵罐中溶氧浓度控制在30%时,发酵40 h,菌体干质量可达53.9 g/L,是分批发酵时的6倍,海藻糖转化率达到80.9%,是分批发酵时的2.25倍。

不同pH对凝胶多糖发酵试验影响的研究

拟采用一种动态控制p H的试验方法,设计p H梯度5.5、6.0、6.5,控制p H从最初菌体生长阶段的中性环境动态变化到多糖合成的微酸性环境。发酵结束得到凝胶多糖产量分别为33.26,44.22,42.03 g/L,多糖纯度(以葡萄糖计)分别为88.18%、91.36%、90.68%。

海藻糖转化条件优化的研究

用海藻糖转化酶转化麦芽糖为海藻糖,采用单因素试验和正交试验研究海藻糖合酶作用时温度,pH,时间和摇床转速对转化率的影响,利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定转化率。结果显示温度和pH是主要的影响因子。选择的条件为:转化温度53℃,转化pH7.8,转化时间20h,摇床的转速150r/min。在此条件下麦芽糖转化为海藻糖的转化率为59.8%。

表面活性剂对葡萄糖酸钠发酵的影响

研究了表面活性剂对黑曲霉发酵产葡萄糖酸钠的影响。结果表明,吐温80对菌种生长有一定的促进作用;Trition X-100对菌种生长影响也较小;低浓度的十二烷基磺酸钠（SDS）对菌种生长影响较小,当SDS的浓度过高时抑制了菌体的生长。最优的表面活性剂是吐温80,特别是在发酵24～36 h对数生长期时加入5 g/L时对葡萄糖酸钠产量的促进作用最明显,产量达到了最大值251 g/L,比对照组提高了29.2%。