汉防己乙素衍生物LYY-47对三阴性乳腺癌细胞及其多倍体巨瘤细胞增殖、凋亡的作用和机制

目的探讨汉防己乙素衍生物LYY-47对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞及其多倍体巨瘤细胞(PGCCs)增殖、凋亡的作用和机制。方法取TNBC MDA-MB-231细胞和MDA-MB-436细胞培养至对数生长期,诱导形成PGCCs,培养35 d,采用苏木素-伊红(H&E)染色观察不同培养时间时2种细胞的PGCCs形态学特征并进行计数;收集MDA-MB-231细胞、PGCCs及其子代细胞,采用流式细胞仪检测分析细胞周期,采用Western blot检测周期相关蛋白[细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)和细胞周期蛋白B1(CyclinB1)]、干性相关蛋白[乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)、白细胞分化抗原44(CD44)及白细胞分化抗原133(CD133)]、DNA损伤修复相关蛋白[布卢姆(BLM)、Rad51及乳腺癌易感基因1(BRCA1)]及凋亡相关蛋白[BCL2-相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤蛋白-2(Bcl-2)、裂解凋亡蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)及裂解凋亡蛋白酶-8(cleaved Caspase-8)]的表达,采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成实验检测细胞活力和细胞集落数,采用细胞免疫荧光实验检测磷酸化组蛋白2AX(γ-H2AX)的表达;采用荧光偏振实验检测BLM DNA解旋酶的活性;收集对数生长期MDA-MB-231细胞,分为对照组(同等体积的完全培养基)、紫杉醇(PTX)组(500 nmol/L PTX)、3-CF 3,4-F-苯基类似物(ML216)组(3μmol/L ML216)及ML216+PTX组(500 nmol/L PTX和3μmol/L ML216),采用Image J软件计数各组细胞数;收集对数生长期MDA-MB-231细胞及其PGCCs子代细胞,分为对照组(0.00μmol/L)、LYY-47给药组(2.50μmol/L、5.00μmol/L及6.50μmol/L),采用流式细胞仪检测上述各组细胞的凋亡情况;6周龄雌性无特定病原体(SPF)级无胸腺BALB/c裸鼠12只,皮下分别注射5×10^(6)个MDA-MB-231细胞及其PGCCs子代细胞,每隔3天测量1次肿瘤体积,连续29 d,处死裸鼠剥离肿瘤、称重,取肿瘤组织制作切片,采用H&E染色和免疫组织化学染色观察细胞形态和检测BLM、Ki-67的表达。结果与TNBC MDA-MB-231和MDA-MB-436细胞相比,PTX诱导的PGCCs出现增大的细胞核和细胞质区域,通过不对称分裂产生子代细胞;与MDA-MB-231细胞相比,PGCCs中S期和G2/M期细胞增加、CDK1和CyclinB1蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01),其子代细胞中S期细胞增加、G2/M期细胞减少且CDK1、CyclinB1蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01),PGCCs及其子代细胞中ALDH1A1、CD44及CD133蛋白表达上调(P<0.05),PGCCs子代细胞的增殖和克隆形成能力增强(P<0.05),γ-H2AX、BLM、BRCA1及Rad51蛋白表达上调(P<0.05);与PTX组相比,ML216+PTX组PGCCs形成的数量明显减少(P<0.01);PGCCs子代细胞体内成瘤的生长速度、肿瘤的体积和重量均大于MDA-MB-231细胞(P<0.01),瘤体中BLM与Ki-67均呈高表达(P<0.01);与对照组相比,LYY-47给药组BLM 642-1290 DNA解旋酶的ATPase、dsDNA解链活性以及DNA结合活性均下调(P<0.05),MDA-MB-231细胞及其PGCCs子代细胞中BLM、Rad51及BRCA1蛋白表达也均下调(P<0.05);与对照组相比,LYY-47给药组和ML216给药组MDA-MB-231及其PGCCs子代细胞增殖和克隆形成能力降低(P<0.05),LYY-47给药组能够引起MDA-MB-231及其PGCCs子代细胞G2/M期细胞增加(P<0.05)、S期细胞减少(P<0.05)、细胞内周期相关蛋白CDK1与CyclinB1的表达下调(P<0.05),ML216给药组MDA-MB-231及其PGCCs子代细胞G1期细胞增多、S期细胞减少(P<0.05);与对照组比较,LYY-47给药组MDA-MB-231细胞及其PGCCs子代细胞的总凋亡比例增加、Bcl-2表达下调及Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-8蛋白表达上调(P<0.05)。结论LYY-47和ML216可影响TNBC及其PGCCs子代细胞的增殖,其机制可能与抑制BLM DNA解旋酶诱导细胞凋亡和阻滞细胞周期有关。

水平井油藏内三维势分布及精确产能公式

过去常利用保角变换、等值渗流阻力以及Ｊｏｓｈｉ等人的方法研究水平井的产能公式。由于简化和回避了油藏中水平井的三维渗流本质，这些方法缺乏严格可信的理论基础。提出以三维渗流为前提的水平井产能评价研究方法，并给出它的一些应用。首先建立均质、各向异性油藏中线源水平井速度势方程，然后利用Ｇｒｅｅｎ函数方法分别导出水平无限大和底水驱油藏中水平井的三维势分布。在此基础上建立了一组新的水平井产能公式，这些公式的精度明显高于一些对三维流动简化后所得到的近似公式，后者往往低估了水平井的产能。此外，讨论了水平无限大油藏中势分布的某些重要特征，从理论上证实了水平井适应于垂向渗透性好的薄油层的开采。

存在局部连通断层的复合油藏不稳定试井分析及典型曲线拟合方法

很多油藏由断层分割所形成,断层可能封闭也可能泄漏(局部连通)。此外,断层两边的油藏式许具有不同的性质。本文考虑存在一条线性局部连通断层的复合油藏渗流问题,研究其不稳定试井的压力及压力导数特征。通过引入偏移函数,并建立一组理论图版,给出断层的距离和连通程度、渗透率变化的线性不连续边界的距离以及变化程度的典型曲线拟合方法。

含局部不渗透区的油藏不稳定压力分析——边界元方法

油藏中大范围局部不渗透区除了限制流体的流动外,还占有一定的油层体积。这些区域可能是天然的页岩透镜体,也可能是在EOR方法中注入聚合物人为所致。本文考虑这种复合油藏的渗流问题并提出边界元(BEM)分析方法。利用BEM方法研究局部不渗透区外的生产井不稳定压力及其压力导效响应特征,从而可以借助于不稳定试井资料,分析和测试大范围不渗透区的存在。

L域中求解试井模型的Green函数方法

Ｌａｐｌａｃｅ变换域（Ｌ域）中的试井模型具有诸多优点：如容易处理并筒储集效应；多层和双重介质油藏的渗流模型与 单层均质之间不存在本质差异等。因此在试井分析中常常是先求解Ｌ域中的试井模型，然后利用Ｓｔｅｈｆｅｓｔ数值反演计算 井底不稳定压力响应。为给Ｌ域中试井模型的求解提供最一般化的手段，本文引入Ｇｒｅｅｎ函放方法并建立求解试井模型 的通用积分公式。Ｇｒｅｅｎ函数只依赖于渗流区域的形状以及边界类型，与视为源汇的井筒边界条件无关。通过导出一些典 型区域的Ｇｒｅｅｎ函数，重点研究了局部打开井、垂直及水平压裂井、水平井等各种复杂井筒边界模型下的均匀流量压力 解。文中的Ｇｒｅｅｎ函数方法较好地解决了现代试井分析中所遇到的复杂试井模型和复杂井筒边界模型下的求解问题。

曲线自动拟合法在多井试井分析中的应用

本文从渗流方程的反问题出发,提出一种用于多井试井解释的通用方法——曲线自动拟合法。该方法通过一个非线性最小二乘参数估计,使实测数据与油藏数学模型的理论曲线自动拟合。为了判断各井之间地层明显异性的情况,文中提出了一种新的多井试井方法(即多井激动、一井观察试井法),并研制了相应的多井试井软件。矿场实测和虚拟测试的分析结果表明,这种新方法既可以一次性地解释同一油藏中各激动井与观测井之间的不同渗透率,又节省了测试时间和少用了测试仪器。

汉防己甲素衍生物HL-22对BLM解旋酶生物学特性的影响

目的:探讨汉防己甲素衍生物HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法:采用荧光偏振法检测HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性和解链活性的影响,用孔雀绿-磷钼酸铵比色法检测HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的影响,采用紫外吸收光谱法检测HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶构象的影响。结果:33.34μmol/L的HL-22对BLM解旋酶复性后双链DNA(ds DNA)结合活性的抑制率为49.07%、单链(ss DNA)结合活性的抑制率为50.00%,50μmol/L的HL-22对BLM解旋酶DNA解链活性的抑制率为93.58%,100μmol/L的HL-22对BLM解旋酶ATPase活性的抑制率为90.3%。结论:HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶的DNA结合活性、解链活性和ATPase活性均有抑制作用。

医学检验专业实习生教学改革探索

医学实习生教育关乎未来医学的发展和前进方向,对医学实习生自身来说也极其重要。本文针对当前本科室面临的实习生教育问题,通过客观分析和对医学教育改革的思索,探寻有针对性的医学检验实习生教育改革的前进方向,旨在对医学检验专业实习生教学改革有所帮助。

汉防己甲素衍生物HL-27对BLM解旋酶生物学特性的影响

目的研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法利用荧光偏振技术研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性、解链活性的影响;利用孔雀绿-磷钼酸铵比色法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的影响;利用紫外吸收光谱法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶构象的影响。结果当HL-27浓度达到33.34μmol·L^(-1)时,其对dsDNA或ssDNA与BLM^(642-1290)解旋酶结合活性的抑制率分别为41.35%、59.54%;当HL-27浓度达到50 μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶解链活性的抑制率为78.68%;当HL-27的浓度为100μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的抑制率为43.8%。结论汉防己甲素衍生物HL-27可以抑制BLM^(642-1290)解旋酶的DNA结合活性、解链活性与ATPase活性。

直线不渗透边界的距离和方向计算机自动模拟

在均质油藏中考虑用多井试井探测直线不渗透边界的距离和方向,提出一种用于探边解释的计算机自动模拟方法。这种方法使用了带约束的非线性最小二乘回归技术,使得实测数据与带有可变参数一距离和方向的油藏模型拟合。从矿场实际出发,还考虑了用干扰试井进行探边测试,并虚拟一个测试表明计算机自动模拟方法的应用。

关于一类拟微分算子的奇性Cauchy问题解的非唯一性和唯一性

证明奇性方程的Cauchy问题解的唯一性是一个十分困难的问题,唯一性对于不同的解空间会得到不同的结论。如果B(t,x,D_x)为光滑依赖于t∈[0,T]的二阶椭圆型拟微分算子,则称L(u)=t(?)_1u+B(t,x,D_x)u=0 (1)为奇性抛物型。文献[3]对始值在超平面t=s>0上构造了它的拟基本解,但很明显。

一类一阶和二阶Fuchs型拟微分算子Cauchy问题K-flat解的唯一性

考虑下面的一类一阶和二阶Fuchs型拟微分算子的Cauchy问题其中ε_1,ε_2=0,1,P_1∈OPS_((t,0))~1(Ω_δ),A∈OPS_((t,x))~1(M),P_2∈OPS_((t))~2(Ω_δ),P_1,A,P_2均具正算符。对L_1,L_2建立相应的Carleman型估计,从而得到K-flat解的唯一性。

确定泄油区面积和平均地层压力的一种新方法

本文提出一种新的用于有界油藏内拟稳态流动时压力恢复试井的导数曲线分析方法。该法通过反推井底压降线性下降趋势确定泄油区的面积和平均地层压力，从而消除了MBH法、MDH法、Dietz法对于泄油区面积预先估计的盲目性，提高了计算平均地层压力的精度。

缝洞型油藏复合介质模型及流体流动数学模型

缝洞型油藏储集空间类型多样，尺度差异大，流体流动形式复杂。根据流体流动特征和研究方法的不同，将缝洞型油藏流体流动形式划分为基岩、微裂缝发育带的孔隙流和大型裂缝、溶洞中的“空腔流”。对应于两种类型的表征单元体：多孔介质表征单元体和“流体质点团”。在此研究的基础上提出：缝洞型油藏储集体是一种由多孔介质和“空腔介质”组成的复合介质。不同的介质具有不同的流体流动形式和表征单元体。最后，分别建立多孔介质和“空腔介质”中的流动方程，并以其耦合形式作为缝洞型油藏流体流动的数学模型。这对于该类油藏下～步高效开发技术的研究具有一定的现实意义。

濮城油田的整体开发调整

濮城油田整体处在特高含水开发阶段,产量自然递减高达20％以上。井网损坏严重、合注合采井多、地质基础研究薄弱、剩余油分布的定量认识程度不够是影响开发效果的主要因素。利用指数递减模型预测,在目前开发方式下,2006年油田产量将降至80×104t以下,含水率上升至96％。针对这些问题,提出了下步的挖潜措施:(1)重建、优化注采井网,提高水驱效果;(2)细划流动单元,弄清剩余油分布;(3)由分注合采向分注分采过渡;(4)评价难采储量,尽快形成接替。

非均质油藏中多井试井非线性回归分析方法

现有的多井试井(脉冲试井,干扰试井)的分析技术是建立在均质油藏基础上的,而对非均质情况的研究则只局限于具有解析解的渗流模型。针对各向同性的径向非均质油藏,提出了非线性回归分析方法使用有限差分解和连续函数逼近理论,根据试井获取的压力—时间数据,利用受约束的非线性最小二乘回归技术拟合观察井的实测压力与计算压力,从而确定井间流动系数的分布,并进而对平面非均质性进行描述。虚拟测试和现场实例测试表明,所提出的分析方法是可行的,且试井次数较少。

复合油藏试井的半对数分析法

针对在试井分析中经常遇到的储层径向不连续性情况，考虑带有井筒储存效应的径向复合油藏渗流问题，研究了压降曲线分别在早、中、晚期的反应特征，用半对数分析方法导出复合区半径较大时远井区半径的计算公式。

用边界元方法进行探边试井分析

探边试井分析技术尤其是不规则边界形状的分析研究一直未取得实质性进展。本文简述了探边试井解释软件(JLTWTC)中的边界元方法(BEM)及其应用。与有限元及有限差分方法相比,BEM更适合不规则形状油藏内外渗流问题的研究。

贵阳地区健康体检人群珠蛋白生成障碍性贫血的筛查及基因型分析

目的了解贵阳地区健康体检人群中珠蛋白生成障碍性贫血的携带率及基因突变型。方法选择在该院进行常规健康体检的人员共3 561例为研究对象,经血常规检查方法获得对珠蛋白生成障碍性贫血疑似病例后,采用Gap-PCR及反向斑点杂交(RDB)进行α-、β-珠蛋白生成障碍性贫血基因分析。结果血常规检查获得196例珠蛋白生成障碍性贫血疑似病例,进一步的基因分析共检出珠蛋白生成障碍性贫血131例,珠蛋白生成障碍性贫血携带率为3.68%(131/3 561);其中α-珠蛋白生成障碍性贫血65例,携带率为1.83%(65/3 561),以--^(SEA)/αα为主;β-珠蛋白生成障碍性贫血60例,携带率为1.68%(60/3 561),以β^(CD41-42)及β^(CD17)为主;αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血6例,携带率为0.17%(6/3 561)。结论贵阳地区健康体检人群珠蛋白生成障碍性贫血携带率为3.68%,基因突变类型与以往报道一致。以常规健康体检人群为调查对象,能较为真实地反映贵阳地区珠蛋白生成障碍性贫血人群携带率,将有助于该地的婚育指导及珠蛋白生成障碍性贫血防控策略的制定。

化学驱项目的经济评价方法研究

针对国内目前各油田企业在化学驱项目经济评价上常用的总量法和增量法,深入研究了这两种评价方法的特点以及对化学驱项目的适应性问题,最终给出优先推荐增量法评价的理由并进行了理论阐述。同时,就目前化学驱经济评价中存在的争议性问题提出了看法并进行了论证。