应用晚期乳腺癌患者外周血单个核细胞体外增殖诱导新型CIK细胞的实验研究

目的：应用晚期乳腺癌患者外周血来源的单个核细胞体外培养诱导产生新型（ Cytokine in-duced killer cells ，CIK）细胞的可能性，为乳腺癌患者应用自体免疫细胞治疗提供理论基础。方法取8例晚期乳腺癌患者外周血提取单个核细胞，经体外培养诱导增殖，并应用细胞计数法和流式细胞仪检测增殖细胞表面特异性标志CD3、CD16和CD56，应用51Cr release assay 及MTT方法测定其对MCF7及BT20乳腺癌细胞株的杀伤能力。应用ELISA试验方法对诱导得到的新型CIK细胞的培养上清液进行解析。结果经过体外18天培养，平均得到8．2＆#215;108个以上纯度为95．2％～98．1％的CD16＋、CD56＋和CD16＋CD56＋阳性高纯度NK细胞的新型CIK细胞，且对乳腺癌细胞株MCF7及BT20具有明显的抑制作用。结论成功应用晚期乳腺癌外周血单个核细胞选择性扩增诱导高纯度NK细胞的新型CIK细胞，且证明其对MCF7及BT20乳腺癌细胞具有明显抑制作用，为应用自体高纯度NK细胞的新型CIK细胞为基础的过继性免疫细胞治疗乳腺癌提供理论研究基础。

肿瘤生物治疗中自然杀伤细胞的基础研究与临床应用

自然杀伤细胞(NK细胞)在抗病毒感染,抑制肿瘤细胞生长及降低移植后排斥反应等机体免疫应答过程中发挥着重要的作用。NK细胞可以直接杀伤肿瘤细胞和被病毒感染的靶细胞并可以产生大量的免疫活性细胞因子,如IFN-γ等。近年来,随着广大研究者对其深入的研究,应用NK细胞在抗衰老、自身免疫性疾病调节及肿瘤治疗的临床工作逐步展开,文章重点阐述NK细胞在肿瘤治疗方面的基础研究与临床应用的现状与展望。

健康人外周血单个核细胞诱导的NK细胞对脑胶质瘤杀伤作用的探讨

目的对体外培养的NK细胞杀伤脑胶质瘤细胞进行探讨，为脑胶质瘤的免疫细胞疗法提供理论基础。方法从4个健康人外周血提取单个核细胞，在KRA^TM培养环境下，诱导产生NK细胞和LAK细胞。分别用细胞计数法和流式细胞仪检测NK细胞增殖和细胞表面特异性标志CD3／CD16／CD56，并用MTT法检测NK细胞及LAK细胞对脑胶质瘤细胞的杀伤。结果经过体外培养，平均可得到7.93×10^9个以上细胞。和LAK细胞相比，NK细胞对脑胶质瘤细胞LN18、LN229、T98G和U87MG的敏感性更高。结论NK细胞能够对脑胶质瘤细胞产生有效免疫应答，为过继性免疫细胞治疗脑胶质瘤提供可能。

NK细胞转输治疗恶性复发性脑胶质细胞瘤分析

目的利用免疫细胞转输对一例WHO—II级脑胶质瘤术后复发患者的疗效进行报告，为进一步深入探讨过继细胞转输治疗恶性、复发性脑胶质瘤的治疗提供依据。方法从术后11个月复发的脑胶质瘤患者20ml外周血中提取单个核细胞（PBMC），在KRA培养环境下诱导产生NK细胞。用细胞计数法和流式细胞仪检测NK细胞增殖和细胞表面特异性标志CD3^＋、CD16^＋和CD56^＋，在体外得到不少于10亿个NK细胞。每28d一次通过静脉回输给患者，观察疗效及依据脸谱观察判定患者生命质量的改善情况。结果经过5次静脉回输NK细胞治疗，MRI影像学上颅内复发脑胶质瘤消失，并极大地改善了患者的生活质量。结论NK细胞转输对本例恶性复发脑胶质瘤疗效显著。