【目的】探究VvMADS46与葡萄无核性状产生的关系。【方法】采用实时荧光定量PCR分析VvMADS46在葡萄不同组织器官的表达,分析克隆VvMADS46基因序列,构建系统发育树,进行VvMADS46基因的亚细胞定位分析及过量表达番茄性状观察,研究其功能...【目的】探究VvMADS46与葡萄无核性状产生的关系。【方法】采用实时荧光定量PCR分析VvMADS46在葡萄不同组织器官的表达,分析克隆VvMADS46基因序列,构建系统发育树,进行VvMADS46基因的亚细胞定位分析及过量表达番茄性状观察,研究其功能。【结果】VvMADS46在无核白和红地球的根、茎、叶、花序、花、卷须、果实等不同组织中均有表达,在花中的表达量较高,在果实中的表达量次之,而在茎、叶和卷须中的表达量较低;花后33、36、39、42 d 4个时期无核葡萄无核白、火焰无核VvMADS46的表达量都显著高于有核葡萄红地球、巨峰;构建了VvMADS46基因的亚细胞定位载体,通过农杆菌侵染洋葱,发现了VvMADS46定位在细胞核上;克隆了VvMADS46基因,在NCBI数据库进行序列比对,得到其同源基因为AP3基因,筛选得到AtAP3、AeAP3、CmAP3、LjAP3、LrAP3、PhAP3、AcAP3和PtAP3,并构建了系统发育树;构建了VvMADS46基因的植物过量表达载体,采用农杆菌介导法转化模式植物番茄,发现转基因番茄植株明显矮小且种子显著变小。【结论】VvMADS46与葡萄胚珠败育、无核性状发生存在密切联系。展开更多
文摘【目的】探究VvMADS46与葡萄无核性状产生的关系。【方法】采用实时荧光定量PCR分析VvMADS46在葡萄不同组织器官的表达,分析克隆VvMADS46基因序列,构建系统发育树,进行VvMADS46基因的亚细胞定位分析及过量表达番茄性状观察,研究其功能。【结果】VvMADS46在无核白和红地球的根、茎、叶、花序、花、卷须、果实等不同组织中均有表达,在花中的表达量较高,在果实中的表达量次之,而在茎、叶和卷须中的表达量较低;花后33、36、39、42 d 4个时期无核葡萄无核白、火焰无核VvMADS46的表达量都显著高于有核葡萄红地球、巨峰;构建了VvMADS46基因的亚细胞定位载体,通过农杆菌侵染洋葱,发现了VvMADS46定位在细胞核上;克隆了VvMADS46基因,在NCBI数据库进行序列比对,得到其同源基因为AP3基因,筛选得到AtAP3、AeAP3、CmAP3、LjAP3、LrAP3、PhAP3、AcAP3和PtAP3,并构建了系统发育树;构建了VvMADS46基因的植物过量表达载体,采用农杆菌介导法转化模式植物番茄,发现转基因番茄植株明显矮小且种子显著变小。【结论】VvMADS46与葡萄胚珠败育、无核性状发生存在密切联系。