从贫困村落到山居百景图

陶渊明曾遥望着那个他回不去的故乡，感叹道：“云无心以出岫，鸟倦飞而知还。景翳翳以将入，抚孤松而盘桓。”时过千年，诗中那个充满古画意味的山居景象如今还存在吗？

微孔板酶底物检测尿酸酶活性方法的建立及验证

目的建立石英微孔板法酶底物检测尿酸酶活性的方法,并对方法进行验证。方法摸索尿酸浓度与吸光度之间的线性关系,找到合适的范围,并验证方法的专属性、线性、重复性、中间精密度、准确性和耐用性。尿酸酶加入固定浓度尿酸溶液,酶促反应5 min后,通过酶标仪检测A_(292 nm)值变化计算尿酸的含量,根据单位时间内尿酸减少量计算出尿酸酶的活性。结果专属性验证结果显示,空白对照尿酸浓度未检出,25μg/mL尿酸样品的回收率为102.0%,50μg/mL尿酸用等体积的硼酸缓冲液稀释后的样品回收率为103.2%,表明专属性较好。尿酸质量浓度在0~50μg/mL范围内线性关系良好,R^(2)>0.99。该方法重复性验证的RSD为0.6%;中间精密度验证的RSD为1.4%;准确性验证的3个样品回收率分别为101.3%、101.3%、101%,RSD分别为1.1%、1.2%、0.7%;不同温度条件下,耐用性验证的RSD为4.8%。结论本实验建立了微孔板酶底物检测尿酸酶活性的方法,该方法的专属性、线性、重复性、中间精密度、准确性和耐用性良好,可用于尿酸酶活性的定量检测。

一种新型尿酸氧化酶四聚体提取纯化方法的建立

目的建立一种简便、快速的尿酸氧化酶四聚体提取纯化方法,以适应大规模生产需求。方法首先通过基因工程的方法获得可以稳定发酵生产尿酸氧化酶的大肠埃希菌菌株,再通过一步萃取法从破碎菌体沉淀中获得尿酸氧化酶蛋白混合物。通过硫酸铵沉淀、离子交换和分子筛层析,最终获得纯化的活性尿酸氧化酶四聚体。结果通过优化发酵及提取条件,每升发酵液可得到尿酸氧化酶四聚体蛋白约400 mg,其纯度>95%,比活>10 U/mg。结论建立了一种新的尿酸氧化酶四聚体高效提取纯化方法。