表没食子儿茶素没食子酸酯与氟康唑联用抗耐药白色念珠菌的协同作用及机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)与氟康唑(fluconazole,FLC)联用对耐药白色念珠菌(Candida albicans,CA)的协同抗感染效果及作用机制。方法选用6株耐药CA,通过棋盘微量稀释试验,利用部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)评价联合作用的抗耐药CA作用;及利用荧光显微镜观察两药联用对菌丝生长的影响。结果通过FICI评价法,证实了EGCG与氟康唑联用具有协同抗耐药CA作用,且二者的协同作用可能与抑制菌丝生长有关。结论EGCG与FLC联用具有协同抗耐药CA的作用,且协同作用机制可能与抑制菌丝生长有关。

自然感染兔脑炎原虫獭兔肾上皮细胞凋亡的研究

运用透射电镜术、原位末端标记技术(TUNEL)和流式细胞术对11只自然感染兔脑炎原虫獭兔的肾脏进行了细胞凋亡研究,5只健康长耳白兔用作对照。结果表明,凋亡细胞多见于远曲小管和集合管的上皮细胞。用透射电镜观察,初期的凋亡细胞,其细胞核的染色质高度凝集,边缘化,粗面内质网增多、扩张呈泡状;后期的凋亡细胞,其细胞质浓缩,细胞膜起泡,细胞核分裂成块状,最后形成膜包裹的凋亡小体。TUNEL法检测,病变轻微的细胞,胞核微缩,胞膜增厚;病变严重的细胞,其胞核体积明显缩小,胞膜皱缩,最后形成膜包裹的凋亡小体。流式细胞术检测,病兔可呈现明显的亚“G1”峰,凋亡细胞百分比与对照兔相比差异极显著(P=0101),且病兔肾细胞的周期也有所改变。结果表明,3种方法检测的病兔肾上皮细胞凋亡数均高于对照兔。

成年小鼠睾丸间质细胞的分离、鉴定及功能检测

为建立成年小鼠睾丸间质细胞分离纯化方法,并对分离纯化的睾丸间质细胞进行睾酮分泌功能检测,对成年小鼠睾丸组织进行I型胶原酶消化、Percoll分离液密度梯度离心,分离成年小鼠睾丸间质细胞。细胞纯度用3β-羟类固醇脱氢酶(3β-hydroxy-steroid-dehydrogenase,3β-HSD)染色鉴定。将分离纯化的睾丸间质细胞进行体外培养,在基础睾酮和人绒毛膜促性腺激素(hCG)刺激培养条件下,用放射免疫分析法对培养上清中的睾酮含量进行检测。结果显示,通过该方法能获得高纯度成年小鼠睾丸间质细胞(>95%),培养的睾丸间质细胞具有分泌基础睾酮以及对hCG刺激反应的能力。提示采用该方法对成年小鼠睾丸间质细胞进行分离纯化具有高效性、可用性,通过该方法获得的睾丸间质细胞是体外研究药物对睾酮分泌功能影响的良好模型。

牛磺酸对小鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的影响

为研究牛磺酸在小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌上的作用,将培养的成年小鼠睾丸间质细胞和新生3d小鼠睾丸用不同浓度牛磺酸处理,然后放射免疫分析法检测培养上清中的睾酮含量。结果显示,牛磺酸对基础培养和10μg/L人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)刺激培养条件下的成年小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌没有显著影响(P>0.05),但在100μg/L hCG刺激培养条件下,牛磺酸浓度在3mmol/L时对培养3d的小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌有极显著的刺激作用(P<0.01)。提示牛磺酸在新生雄小鼠生殖系统发育等方面可能起一定作用。

扫描及负染电镜在兔脑炎原虫病诊断中的应用

12只临床表现头颈歪斜、昏睡、震颤、局部或全身轻瘫的可疑为兔脑炎原虫病的獭兔 ,对其肾脏皮髓交界和尿沉渣分别进行了扫描电镜和负染电镜观察 ,看到了大小为 1～ 1 .5× 1 .4～ 2 .5μm,形态呈卵圆形和杆状的兔脑炎原虫。阳性检出率为 1 0 0 %。说明扫描及负染电镜术是诊断兔脑炎原虫病的一种较为可靠的技术。

IL-2在自然感染兔脑炎原虫獭兔体内免疫作用的研究

为观察 IL-2在自然感染兔脑炎原虫獭兔体内的免疫作用 ,用双抗体夹心 EL ISA试剂盒对 8只自然感染兔脑炎原虫的獭兔和 4只健康长耳白对照兔的血清及培养 3 d和 4d的脾和淋巴结的细胞培养上清中的 IL-2进行了检测。检测结果为病兔与对照兔 IL -2平均含量差异不显著 (P >0 .0 5) ,但病兔 IL -2平均含量高于对照兔。提示 IL -2对病兔产生了一定的免疫作用 。

兔脑炎原虫病防制研究进展

兔脑炎原虫病是由兔脑炎原虫引起的一种人畜共患的寄生虫病 ,该虫可感染各种动物和人。其中以兔的感染较为严重 ,且多为隐性或慢性感染。因此对兔脑炎原虫病的诊断、预防及治疗显得非常重要。过去对此病的诊断通常采用病理组织学检查法或血清学等方法 ,而且没有有效防治该病的措施。随着近年来国际上对此病研究的深入 ,出现了一些新型的诊断技术如 PCR技术和透射电镜术等 ,并能用一些药物进行防治 ,如阿苯达唑和多胺等。

医学细胞生物学实验教学的实践与体会

医学细胞生物学实验教学在医学院校生物学专业的教学中占据重要地位,为提高教学质量,培养学生的综合素质,就医学细胞生物学实验课教学内容改革、教学方法改进和实验考核改革等几方面的必要性谈几点体会。

半胱亚磺酸脱羧酶和牛磺酸转运体mRNA在成年小鼠睾丸间质细胞的表达

为检测成年小鼠睾丸间质细胞是否存在牛磺酸生物合成关键酶半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)和牛磺酸转运体(TauT)mRNA的表达,通过Percoll分离液分离纯化成年小鼠睾丸间质细胞,运用RT-PCR方法测定睾丸间质细胞中CSD和TauT mRNA表达情况。结果显示,成年小鼠睾丸间质细胞存在CSD和TauT mRNA表达。说明成年小鼠睾丸间质细胞能通过CSD途径合成牛磺酸以及睾丸间质细胞可能存在牛磺酸的转运活动。

临床药师参与肾功能亢进儿童骨感染治疗的病例分析

目的为临床肾功能亢进儿童骨感染诊治提供参考。方法临床药师参与某院收治肾功能亢进葡萄球菌引起的骨感染患儿抗感染治疗。病例1,年龄13岁,男,骨感染疾病类型为右胫骨近端骨髓炎,感染病原菌为猫葡萄球菌,临床药师参与会诊,协助医师制定治疗方案,先后给予注射用头孢唑林钠(1 g,bid)、注射用万古霉素(0.4 g,q6 h)、注射用万古霉素(0.5 g,q6 h)、注射用美罗培南(0.5 g,q8 h)、利奈唑胺葡萄糖注射液(0.6 g,q12 h)、米诺环素胶囊(米诺环素胶囊)+利奈唑胺葡萄糖注射液(0.6 g,q12 h,每次泵入8 h)、利奈唑胺葡萄糖注射液(0.6 g,q12 h,每次泵入8 h)对症治疗。病例2,12岁,男,髋关节滑膜炎,给予注射用阿莫西林克拉维酸钾(1.2 g,q8 h),血培养为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA感染),给予利奈唑胺葡萄糖注射液(0.6 g,q12 h,每次泵入8 h)对症治疗,并密切监测患儿治疗过程中相关指标的变化和不良反应。结果医师采纳临床药师建议,患儿治疗后好转,且住院期间无不良反应发生;出院后随访,患儿无疾病复发症状。结论临床一旦发现类似感染应结合病原菌种类及耐药特征及时给予针对性治疗,以有效控制病情。本文可为类似肾功能亢进葡萄球菌骨感染患儿提供治疗参考。

两个单点突变对昆虫羧酸酯酶降解马拉硫磷的影响

马拉硫磷是一种高效低毒的有机磷杀虫剂,分子量大且结构特殊,广泛用于农业害虫的防治。羧酸酯酶突变是昆虫对有机磷类杀虫剂产生代谢抗性的重要机制之一。本实验室前期已从棉蚜Aphis gossypii、褐飞虱Nilaparvata lugens、斜纹夜蛾Spodoptera litura、家蚕Bombyx mori、异色瓢虫Harmonia axyridis、赤拟谷盗Triboliumcastaneum和西方蜜蜂Apis mellifera中各克隆了一个非特异性羧酸酯酶基因,通过体外定点突变构建了G/A151D和W271L两种突变体,并进行了原核细胞表达和纯化。本实验在体外测定了这7种昆虫野生型和两种突变型羧酸酯酶对马拉硫磷的降解。结果显示:棉蚜、西方蜜蜂、斜纹夜蛾、赤拟谷盗的野生型羧酸酯酶能够降解马拉硫磷,两个突变并不能提高它们的降解活性,而家蚕、异色瓢虫和褐飞虱的野生型羧酸酯酶不能降解马拉硫磷,G/A151D和/或W271L突变能使这些酯酶获得马拉硫磷羧酸酯酶(MCE)的活性,有可能使这些昆虫对马拉硫磷产生抗性。不同物种的MCE活性相差较大,斜纹夜蛾的MCE活性最高,其kcat/Km值为1.8～1.9L/μmol·min,其次是赤拟谷盗,其Kcat/Km值为0.87～0.95L/μmol·min,其他昆虫的MCE活性相对较低,相差可高达10倍。

半胱亚磺酸脱羧酶和牛磺酸转运体mRNA在成年小鼠睾丸间质细胞的表达

为检测成年小鼠睾丸间质细胞是否存在牛磺酸生物合成关键酶半胱亚磺酸脱羧酶（CSD）和牛磺酸转运体（TauT）mRNA的表达，通过Percoll分离液分离纯化成年小鼠睾丸间质细胞，运用RT—PCR方法测定睾丸间质细胞中CSD和TauTmRNA表达情况。结果显示，成年小鼠睾丸间质细胞存在CSD和TauTmRNA表达。说明成年小鼠睾丸间质细胞能通过CSD途径合成牛磺酸以及睾丸间质细胞可能存在牛磺酸的转运活动。

LSD1、NDRG1基因沉默对人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力的影响及两者的关系

目的观察赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)、N-myc下游调节基因1(NDRG1)基因沉默对人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力的影响,并探讨两者的作用关系。方法取人卵巢癌SKOV3细胞株,通过shRNA方法建立诱导型干扰LSD1的SKOV3细胞株(LSD1-shRNA-SKOV3),将其分为对照组、Dox组、转染组和联合组。对照组用水处理,Dox组用100 ng/m L Dox处理,转染组转染NDRG1 siRNA,联合组转染NDRG1 siRNA的同时加入100 ng/m L Dox处理。采用实时荧光定量PCR和Western blotting法分别检测4组LSD1、NDRG1基因mRNA和蛋白表达;染色质免疫沉淀ChIP法和实时荧光定量PCR法分析对照组和Dox组NDRG1基因启动子区组蛋白H3第4位赖氨酸的二甲基化(H3K4me2)程度;Transwell小室测算4组细胞迁移率。结果 Dox组、转染组、联合组、对照组LSD1mRNA表达分别为0.407±0.029、0.936±0.024、0.413±0.018、0.941±0.035,蛋白表达分别为0.306±0.013、0.879±0.036、0.341±0.057、0.893±0.052,Dox组、联合组与对照组相比,P均<0.05。Dox组、转染组、联合组、对照组NDRG1 mRNA表达分别为0.791±0.045、0.107±0.016、0.165±0.021、0.239±0.027,蛋白表达分别为0.907±0.005、0.130±0.006、0.216±0.019、0.358±0.062,Dox组、转染组、联合组与对照组相比,联合组与Dox组、转染组相比,P均<0.05。Dox组、对照组细胞NDRG1基因启动子区H3K4me2水平分别为3.32±0.41、0.83±0.17,两组相比P<0.01。Dox组、转染组、联合组、对照组细胞迁移率分别为21.75%±1.816%、79.13%±2.561%、40.13%±2.039%、68.91%±3.167%,Dox组、转染组、联合组与对照组相比,联合组与Dox组、转染组相比,P均<0.05。结论 LSD1基因沉默人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力降低,NDRG1基因沉默人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力升高;LSD1通过降低NDRG1基因启动子区域H3K4me2水平,抑制NDRG1的表达,从而促进卵巢癌SKOV3细胞转移。

豆状囊尾蚴的头节在相对静止与运动状态时的超微结构变化(英文)

[目的]观察豆状囊尾蚴的头节在相对静止与运动时超微结构的变化.[方法]本研究用扫描电镜对位于囊泡内的头节和经人工培养后从囊泡内翻出头节的超微结构变化进行了比较观察。[结果]处于相对静止状态的头节从正面观察时,带有皮肌柱和齿钩的顶突呈伞状,覆盖于头节的前端。从侧面观察,齿钩具有鹿角样的分支,覆盖头节的齿钩仅有一排。4个吸盘呈洞穴状,位于顶突之后,均等地分布在头节的四周。当头节处于运动状态时,顶突上的皮肌柱收缩,鹿角样的齿钩向周围伸展,吸盘也发生环形和纵行收缩。[结论]豆状囊尾蚴的头节在相对静止与运动时的超微结构有明显的改变,这种变化有利于豆状囊尾蚴对宿主的侵袭。

兔脑炎原虫引起肾上皮凋亡的研究

对 16只具有兔脑炎原虫病的示病症状 ,即出现不同程度的头颈歪邪、震颤、平衡失调和转圈运动等运动障碍症状的獭兔 ,运用原位末端标记技术和基因染色技术 ,着重对病兔肾组织损伤的发生进行了研究。结果表明 :肾远曲小管和集合管是脑炎原虫主要的寄生部位 ,在此常能检出虫体或假囊 ;凋亡的细胞多见于集合小管的上皮细胞。用TUNEL染色 ,不同阶段的凋亡细胞可出现不同的病理形态学变化。初期的凋亡细胞 ,其胞核浓缩 ,胞膜增厚 ,着色较均匀 ;后期的凋亡细胞 ,其胞核的体积明显变小 ,胞浆减少 ,胞膜呈皱襞状 ,紧紧地包绕着皱缩而浓染的细胞核 ,形成典型的凋亡小体。用 P53和 Bcl- 2染色 ,由于基因表达产物的扩散 ,不仅受损细胞的核染色较深 ,而且胞浆染色也较深。研究证明 ,TUNEL 染色是一种检测由脑炎原虫引起肾细胞凋亡的灵敏、可靠的方法 ;P53和 Bcl- 2基因参与了肾细胞的凋亡过程 ;临床上病兔多尿与脱水可能主要与肾远曲小管和集合管的上皮细胞凋亡有关。

PBL教学模式引入留学生医学细胞生物学教学的探讨

针对医学留学生这个特殊的授课群体,探索更有效的教学模式,提高教学质量意义深远。文章探讨了在医学细胞生物学教学中引入基于问题的教学模式(problem-based learning,PBL)的优势、实施过程以及存在问题和对策,以提高教学质量。

兔脑炎原虫病患兔血清中IgG的测定

以临床症状和病理学变化确诊为兔脑炎原虫感染的家兔为研究对象 ,经间接 EL ISA法对其机体体液免疫状况进行研究 ,并与健康家兔进行比较 ,结果表明兔脑炎原虫病兔外周血 Ig G含量明显高于对照组 (P<0 .0 5)。提示兔脑炎原虫入侵兔体后 ,病兔体液免疫功能有所增强。

美罗培南治疗新生儿重症细菌性肺炎的临床疗效观察

目的:探讨美罗培南治疗新生儿重症细菌性肺炎的临床疗效。方法:选取2020年1月—2022年12月单县中心医院收治的重症细菌性肺炎新生儿80例,随机分为对照组和观察组,各40例。对照组采用头孢他啶治疗,观察组采用美罗培南治疗。比较两组临床疗效,临床症状改善时间,治疗前后白细胞(WBC)、中性粒细胞(N)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平及不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P=0.034);观察组咳嗽咳痰缓解时间、体温复常时间、肺部啰音消失时间及住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗7 d,观察组WBC、N、CRP及PCT水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义(P=0.043)。结论:美罗培南治疗新生儿重症细菌性肺炎疗效显著,能有效改善临床症状,降低血WBC、N、CRP、PCT水平,且不良反应发生率低,具有一定的临床应用价值。

兔脑炎微孢子虫病的免疫学研究进展

兔脑炎微孢子虫病是由兔脑炎微孢子虫引起的一种隐性、慢性感染或临床经过的人畜共患的原虫病。近十余年来 ,出现大量有关兔脑炎微孢子虫引起艾滋病患者致死性临床感染的报道 ,此病日益引起医学界的广泛关注和重视。就兔脑炎微孢子虫病的免疫学检测方法、细胞免疫应答、感染兔脑炎微孢子虫后人及动物的免疫学比较的研究状况进行了综述。

医学遗传学教学中学生学习动机激发初探

现从实施启发式教学、激发学习成就感、妥善组织学习竞赛、运用多媒体课件等方面进行阐述，并结合教学实践经验探索激发学生学习动机的有效途径。