Transwell小室环境下兔成骨样细胞与骨髓基质干细胞的共培养及成骨分化

背景:以往在体外采用地塞米松、生长因子或用成骨样细胞与骨髓间充质干细胞按1∶1混合培养诱导成骨均存在种种局限。目的:观察在 Transwell小室环境下成骨样细胞与骨髓基质干细胞体外共培养及成骨样细胞定向诱导骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的可行性。方法:取第 3代乳兔成骨样细胞与第3代兔骨髓基质干细胞接种共培养于Transwell小室内,成骨样细胞接种于培养板底层,骨髓基质干细胞接种于 Transwell膜内膜上作为实验组。以骨髓基质干细胞单独接种于Transwell 小室内,下层为基础培养液作为对照组。结果与结论:实验组共培养骨髓基质干细胞明显向成骨细胞分化,细胞碱性磷酸酶活性显著高于对照组(P < 0.05)。实验组骨髓基质干细胞茜素红染色强阳性,可见呈红色结节,经PT-PCR扩增后,可见成骨启动基因核心结合因子α1的表达;对照组未见矿化结节。说明应用Transwell小室可实现成骨样细胞与骨髓基质干细胞体外共培养,并能定向诱导骨髓基质干细胞向成骨细胞分化。

血清TGF-β1、TIMP-1、TNF-α及IL-17在膝关节骨性关节炎患者血清变化情况及其与病情严重程度的关系

目的探讨血清转化生长因子β1蛋白(Transforming Growth factorβ1 protein,TGF-β1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(Tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 1,TIMP-1)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素-17(Interleukin-17,IL-17)在膝关节骨性关节炎患者血清变化情况及其与病情严重程度的关系。方法本研究入选的100例患者均来自于2018年7月至2021年7月期间锦州市中心医院收治的KOA患者,将其作为研究组;另外,选取同期骨科收治的70例非KOA患者作为对照组。2组患者血清TGF-β1、TNF-α以及IL-17水平均采用酶联免疫吸附试验法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)进行检测,TIMP-1水平则采用ELISA双抗体夹心法进行检测。比较2组患者血清TGF-β1、TIMP-1、TNF-α及IL-17水平;比较KOA患者不同K-L分级血清TGF-β1、TIMP-1、TNF-α、IL-17水平及WOMAC疼痛评分;采用Spearman相关性分析的方法,对KOA患者血清TGF-β1、TIMP-1、TNF-α及IL-17水平、WOMAC疼痛评分与K-L分级之间的相关性进行分析。结果(1)研究组患者血清TGF-β1、TIMP-1水平显著小于对照组(P均<0.05),TNF-α、IL-17水平均显著大于对照组(P均<0.05);(2)随着K-L级别的增大,血清TG-Fβ1、TIMP-1水平随之而显著降低,血清TNF-α、IL-17水平、WOMAC疼痛评分随之而显著升高,不同K-L级患者间差异具有显著的统计学意义(P<0.05);(3)经Spearman相关性分析,KOA患者血清炎性因子水平、WOMAC疼痛评分与K-L分级之间存在极显著的相关性(P均<0.01)。结论血清TGF-β1、TIMP-1、TNF-α及IL-17、WOMAC疼痛评分可作为KOA患者病情严重程度重要的评判指标,为临床尽早防治KOA提供可行的依据。

Padua评分联合血栓弹力图对老年全膝关节置换术后下肢深静脉血栓形成的诊断价值

目的分析Padua评分联合血栓弹力图(TEG)对老年全膝关节置换术(TKA)术后患者下肢深静脉血栓形成(DVT)的诊断价值。方法选取2017年6月至2021年6月锦州市中心医院骨外三科收治的90例行TKA的老年患者,于TKA术后1 d行Padua评分、TEG检查及静脉造影检查。以静脉造影检查结果为金标准,根据患者术后DVT发生情况分为DVT组和无DVT组。比较两组临床一般资料以及术后Padua评分、TEG检查结果,并计算Padua评分、TEG以及两者联合对老年TKA术后DVT的诊断价值。结果90例患者中,共有19例术后发生下肢DVT,发生率21.11%。DVT组术后Padua评分高于无DVT组[(5.22±0.74)分比(2.81±0.62)分](P<0.01)。DVT组术后凝血反应时间、凝固时间低于无DVT组[(10.31±2.46)min比(14.19±3.07)min、(3.55±0.71)min比(5.16±0.84)min](P<0.01),而血栓最大幅度、血栓硬度高于无DVT组[(85.17±6.29)mm比(76.40±6.84)mm、(16.24±2.81)d/s比(14.71±2.55)d/s](P<0.05),两组凝固角、凝血综合指数比较差异无统计学意义(P>0.05)。Padua评分联合TEG诊断老年TKA术后DVT的灵敏度、特异度、准确度高于Padua评分、TEG单项诊断(94.74%比31.58%、68.42%,92.96%比83.10%、88.73%,93.33%比80.0%、76.67%)。结论Padua评分联合TEG对老年TKA术后下肢DVT的诊断价值较高,可能为临床TKA术后下肢DVT的诊断提供参考。

透明质酸钠联合塞来昔布治疗骨性关节炎的效果及对TNF-α、IL-1β、PGE_2的影响

目的探讨透明质酸钠联合塞来昔布治疗骨性关节炎(OA)的疗效及其对肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、前列腺素E_2(PGE_2)的影响。方法选取2013年11月至2014年10月锦州市中心医院收治的90例OA患者作为研究对象。采用抽签法将患者分为联合治疗组、透明质酸钠组和塞来昔布组,每组30例。选择同期来医院进行健康体检的30例健康人作为健康对照组。透明质酸钠组患者行透明质酸钠膝关节腔注射,每次2 mL,每周1次,连续5次;塞来昔布组患者口服塞来昔布片25 mg,每日1次,共治疗5周。联合治疗组患者联合以上两种治疗方法。比较治疗结束后及治疗结束后90 d三组患者的疗效,比较治疗前后四组研究对象体内TNF-α、IL-1β和PGE-2水平的变化,比较不良反应发生情况。结果联合治疗组的近期有效率及优良率、远期有效率和优良率优于透明质酸钠组和塞来昔布组[近期有效率为100.0%(30/30)比80.0%(24/30)比76.6%(23/30);优良率90.0%(27/30)比43.0%(13/30)比36.6%(11/30);远期有效率100.0%(30/30)比76.7%(23/30),76.7%(23/30);优良率为73.3%(23/30)比40.0%(12/30)比36.6%(11/30)](P<0.05),但透明质酸钠组组与塞来昔布组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,联合治疗组、透明质酸钠组和塞来昔布组患者TNF-α、IL-1β及PGE-2[(20.7±3.8)ng/L、(26.4±6.0)ng/L、(25.0±6.3)ng/L),(57.4±7.8)ng/L、(69.3±9.0)ng/L、(74.9±10.4)ng/L,(178.3±28.2)μg/L、(259.1±30.2)μg/L、(273.0±30.9)μg/L]水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05),但仍然显著高于健康对照组[TNF-α(16.3±4.3)ng/L、IL-1β(48.0±8.3)ng/L、PGE_2(134.8±18.0)μg/L)](P<0.05),其中联合治疗组TNF-α、IL-1β及PGE_2水平低于透明质酸钠组和塞来昔布组(P<0.05);联合治疗组的不良反应发生率与塞来昔布组、透明质酸钠组[10.0%(3/30)比6.7%(2/30),6.7%(2/30)]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论透明质酸钠联合塞来昔布能显著降低OA患者体内TNF-α、IL-1β及PGE-2水平,且疗效优于单独用药,因而具有较好的临床应用及推广价值。

膝关节镜治疗退行性膝骨关节炎的临床研究

目的探究退行性膝骨关节炎患者采用膝关节镜治疗的方法和效果。方法选取2014年2月至2015年1月收治的76例退行性膝骨关节炎患者进行治疗,随机分组,实验组41例采取膝关节镜的治疗,对照组35例患者选择常规的药物治疗,对两组患者身体症状的改善以及不良反应进行观察和比较。结果实验组患者治疗优良率为90.24%,不良反应率为2.4%;对照组患者治疗优良率为77.14%,不良反应率为14.3%,差异较大,有统计学意义(P<0.05)。结论退行性膝关节炎患者采用膝关节镜的治疗,能够明显改善疼痛以及运动障碍等身体不适,还可提高生活质量,增强患者的治疗信心,可广泛推荐。

椎体成形术治疗创伤性胸腰椎骨折的效果探究

目的对椎体成形术治疗创伤性胸腰椎骨折的临床效果进行分析。方法选取68例创伤性胸腰椎骨折患者,并随机分为治疗组和对照组,各34例。观察并比较经皮椎弓根螺钉治疗术和椎体成形术治疗的临床效果。结果治疗组患者的手术时间、住院时间显著短于对照组[(44.4±10.2)min、(13.3±2.3)d vs(95.7±12.4)min、(18.4±3.6)d],术中出血量显著少于对照组[(105.8±12.5)m L vs(289.4±23.5)m L],差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者治疗后、治疗后4周、治疗后8周的VAS评分均显著低于对照组,同时治疗组患者的术后情况显著优于对照组(受损椎体高度、Cobb’s角以及活动能力评分),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论椎体成形术治疗创伤性胸腰椎骨折能够取得显著的临床效果,是临床上首选的手术方法之一,值得推广应用。

大鼠睫状神经节神经营养因子真核表达载体转染成肌细胞并促其分化

目的应用DNA重组技术构建大鼠睫状神经节神经营养因子(CNTF)真核表达载体,再稳定转染肌源性干细胞,分析转染的肌源性干细胞能否稳定表达CNTF、并向神经元样细胞分化,为深入研究CNTF的功能及动物体内试验打下理论基础。方法用RT-PCR扩增大鼠带有Xho I和BamH I双酶切位点的CNTF cDNA片段,经双酶切获得的目的片段,再与双酶切过的pEGFP-C3质粒相连接,重组质粒转化E.coli DH5α感受态大肠杆菌,酶切方法鉴定阳性菌落。采用脂质体转染法,参照Lipofectamine2000试剂盒(LF2000I,nvitrogen公司)说明书,采用阳离子脂质体介导两组质粒(pEGFP-C3-CNTF和pEGFP-C3)转染成肌细胞。通过RT-PCR分析CNTF mRNA在成肌细胞中的表达,用神经元特异性蛋白(NES)免疫组化染色法鉴定是否有神经元样细胞分化,并于显微镜下计数阳性细胞占细胞总数的比例。结果通过PCR扩增成功获得了CNTF cDNA目的片段,大鼠CNTF真核表达载体构建成功,并成功转染成肌细胞,被转染的成肌细胞稳定表达CNTF并显著分化为神经元样细胞、实验组显著高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论大鼠CNTF真核表达载体pEGFP-C3-CNTF可以成功构建,并可转染大鼠成肌细胞,经转染的成肌细胞能有效表达大鼠的CNTF,且转染的成肌细胞显著分化为神经元样细胞,为研究大鼠CNTF在神经损伤修复方面的实验奠定了重要基础。

沉默SOCS1基因表达对人口腔癌KB细胞增殖的机制研究

目的:探究小干扰RNA(siRNA)沉默细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)基因对人口腔癌KB细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,旨在为口腔癌患者基因靶向治疗提供参考。方法:将培养好的人口腔癌KB细胞随机分为空白对照组、阴性组、转染组,siRNA沉默SOCSl基因、阴性对照质粒分别转染至转染组、阴性组,而空白对照组不作任何处理,SOCS1基因沉默后,四唑盐法检测三组KB细胞增殖率、流式细胞术检测各组KB细胞凋亡率,同时检测三组细胞侵袭能力。结果:siRNA沉默SOCS1基因在人口腔癌KB细胞中呈阳性表达(细胞膜或细胞质呈棕黄色),转染组基因沉默后24、48、72、96 h人口腔癌KB细胞增殖率明显低于阴性组,比较差异有统计学意义(P<0.05);转染组人口腔癌KB细胞凋亡率高于空白对照组和阴性组,空白对照组人口腔癌KB细胞凋亡率高于阴性组,比较差异有统计学意义(P<0.05);转染组穿膜细胞数低于空白对照组和阴性组,阴性组穿膜细胞数低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:siRNA沉默SOCS1基因可减弱人口腔癌KB细胞的增殖能力,并抑制其侵袭能力,有望为口腔癌患者靶向抗肿瘤药物的研发提供新思路。

口腔溃疡患者应用贝复新凝胶联合肿痛安胶囊治疗的临床研究

目的 分析口腔溃疡患者应用贝复新凝胶联合肿痛安胶囊治疗的临床效果.方法 选取94例口腔溃疡患者作为研究对象,根据治疗方式不同分为对照组和研究组,每组47例.对照组患者采用贝复新凝胶进行治疗,研究组患者在对照组基础上采用肿痛安胶囊进行治疗.观察比较两组患者的临床疗效、疼痛改善情况、疾病复发情况、不良反应发生情况.结果 研究组患者临床治疗总有效率95.74%明显高于对照组的76.60%,差异具有统计学意义(P<0.05).研究组患者的疼痛缓解起效时间(5.59±0.87)min、疼痛缓解维持时间(31.06±1.04)min、疼痛症状消失时间(2.55±0.27)d,均明显短于对照组的(12.52±0.84)min、(41.52±3.53)min、(4.58±0.26)d,差异具有统计学意义(P<0.05).研究组患者的复发率4.26%明显低于对照组的19.15%,差异具有统计学意义(P<0.05).两组患者的不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 用贝复新凝胶、肿痛安胶囊联合法治疗口腔溃疡疾病,可有效改善炎性因子、缓解疼痛感,且不会增加不良反应,安全可靠.

急性化脓性根尖周炎患者给予高压氧技术治疗的临床效果分析

目的研究探讨急性化脓性根尖周炎患者给予高压氧技术治疗的临床效果.方法64例急性化脓性根尖周炎患者,按照随机抽签法分为对照组与观察组,各32例.对照组应用切开脓肿引流治疗,观察组在对照组基础上应用高压氧技术治疗.比较两组临床疗效、脓肿消退时间、治疗满意度.结果观察组治疗总有效率93.75%高于对照组的56.25%,差异有统计学意义(P<0.05).观察组组织脓肿消退时间为(2.37±1.25)d,短于对照组的(4.92±1.76)d,差异有统计学意义(P<0.05).观察组治疗满意度90.63%高于对照组的62.50%,差异有统计学意义(P<0.05).结论急性化脓性根尖周炎患者给予高压氧技术治疗的临床效果比较显著.