苏州市空肠弯曲菌耐药与分子特征分析

目的了解苏州市空肠弯曲菌的耐药情况和分子特征。方法对2018年-2022年苏州市分离的空肠弯曲菌进行全基因组测序分析了解毒力基因、耐药基因、多位点序列分型(Multi-locus sequence typing,MLST)等分子特征,通过琼脂稀释法了解其耐药表型。结果61株空肠弯曲菌被分为42个ST型别,以ST464占比最高(9.8%),包含12个CC群,以CC21占比最高(19.7%)。61株菌共检出18种耐药基因,97种毒力基因。药敏试验耐药率排前3位的抗生素分别是萘啶酸,四环素和环丙沙星,耐药率分别为90.2%,88.5%和73.8%,对红霉素100.0%敏感,多重耐药率达到41.0%。结论苏州市空肠弯曲菌多重耐药率高,携带耐药基因和毒力基因较多,克隆群以CC21为主,但ST型别较为分散,呈现较高的遗传多样性。

肌肽对脂质体的抗氧化作用

采用正交试验法研究了肌肽(β-丙氨酰-组氨酸二肽)对卵磷脂脂质体的抗氧化活性。结果表明,在1000×10-6抗坏血酸存在条件下,各种浓度的肌肽均抑制了铁离子引发的脂质体脂类氧化。肌肽抑制脂质体氧化的最佳组合条件为:温度4℃,pH6.80,肌肽浓度5.0mmol/L。

肌肽对肌肉中脂类氧化的抑制作用

肌肽(β-丙氨酰-L-组氨酸)是天然存在于骨骼肌中的水溶性二肽,具有多功能的抗氧化性质。本文综述了肌肽的抗氧化作用并揭示其在肉和肉制品中用做天然抗氧化剂的潜能。

苏州市酱卤肉制品卫生细菌学调查

目的了解市售酱卤肉制品的卫生质量现状,更好地进行食品卫生工作的监督管理。方法对苏州市饭店、超市、卤菜店制售的酱卤肉制品进行菌落总数、大肠菌群的检验。结果共采集样品69份,合格样品41份,总合格率为59.42%。其中菌落总数合格51份,合格率为73.91%;大肠菌群合格46份,合格率为66.67%。结论该市卫生监督部门应加大酱卤肉卫生质量的监督执法力度,并加强对食品从业人员的培训。

叠氮溴乙锭-环介导等温扩增法快速检测空肠弯曲菌活菌

目的建立叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测空肠弯曲菌活菌的方法。方法以空肠弯曲菌mapA基因为检测靶基因,纯培养物提取模板进行LAMP反应,检测空肠弯曲菌LAMP灵敏度、EMA曝光照射时间试验和使用浓度试验。结果空肠弯曲菌LAMP检测灵敏度为800 CFU/mL;曝光照射时间为5 min;EMA终浓度50μg/mL以下时不会抑制空肠弯曲菌活菌的DNA扩增,终浓度为1μg/mLEMA能有效抑制4×10~4CFU/mL空肠弯曲菌死菌扩增;1%活菌混合体系中EMA-LAMP检测结果为阳性。结论EMA-LAMP方法能有效快速检测空肠弯曲菌活菌。

汉坦病毒与肾综合征出血热

汉坦病毒在世界上分布广泛,肾综合征出血热是由汉坦病毒属的汉滩型、汉城型、Puumala型和Dobrave型病毒引起的流行性疾病,分别由携带有不同型病毒的鼠类感染人。临床症状分五个时期。本文主要对我国流行的汉坦病毒及其引发的肾综合征出血热做一综述。

环介导等温扩增法快速检测感染性腹泻病例标本中的空肠弯曲菌

目的建立环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测感染性腹泻病例标本中的空肠弯曲菌。方法收集2017年苏州市辖区3家医院的感染性腹泻患者的粪便样品326件,用LAMP法对空肠弯曲菌的DNA进行检测,在DNA扩增试剂盒提供的反应体系加入引物和模板进行空肠弯曲菌的LAMP反应,测定LAMP方法检测空肠弯曲菌菌液的灵敏度;同时用滤膜法进行空肠弯曲菌的分离培养,参照GB 4789.9-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》分离鉴定空肠弯曲菌。结果LAMP法检测空肠弯曲菌菌液的灵敏度是2.2 CFU/μL;326件腹泻患者粪便中16件空肠弯曲菌LAMP检测为阳性,阳性率为4.91%。共分离培养出14株空肠弯曲菌,阳性率为4.29%。结论针对感染性腹泻患者的粪便样本的空肠弯曲菌检测项目,可以采用LAMP方法进行等温扩增初筛,初筛阳性的样品再有针对性地进行后续的传统培养。

苏州地区集中空调通风系统军团菌污染状况的初步调查

目的采集苏州市部分公共场所集中空调通风系统的冷凝水、冷却水,进行嗜肺军团菌检测。方法水样过滤后,经不同方法处理,进行嗜肺军团菌的分离培养、鉴定。结果冷凝水中未检出嗜肺军团菌;冷却水中嗜肺军团菌检出率为61%;不同公共场所的空调水中嗜肺军团菌检出率不同,医院的检出率高达100%。结论冷却水中嗜肺军团菌的检出率较高,1型嗜肺军团菌所占的比例较高。集中空调通风系统卫生管理检测工作亟待加强。

汉滩病毒76-118株核蛋白部分基因片段的克隆、表达和抗原活性测定

为了研究汉坦病毒的DNA疫苗,用PCR方法克隆汉滩病毒76-118株S片段部分基因,构建真核细胞表达质粒pEGFP-HTNV-S0.7,并在成纤维细胞L929中进行瞬时表达。成功地得到预期大小约0.7kb的重组基因,并在成纤维细胞中进行了瞬时表达。免疫印迹分析产生的相对分子质量约26000的蛋白质具有抗汉坦病毒的抗原活性。直接免疫荧光分析显示了特异性的绿色荧光。

汉坦病毒M和S片段基因的克隆及在成纤维细胞中的瞬时表达

目的构建汉城病毒M片段和汉滩病毒部分S片段的重组基因pEGFP-M-S,并在成纤维细胞L929中进行瞬时表达。方法用PCR方法克隆分别装在两个模板载体中的部分M片段,连接入pcDNA3·1载体,利用简并密码子得到完整的M片段。将汉城病毒M片段开放阅读框全长3·4kb的基因与装有汉滩病毒S片段5’末端0·7kb基因的载体pEGFP-HTNV-S0·7用酶切位点连接,构成4·1kb的重组基因,并转染成纤维细胞,进行48h、72h表达。结果成功得到预期大小的4·1kb的重组基因,并在成纤维细胞中进行了瞬时表达。结论汉城病毒M片段和汉滩病毒部分S片段基因的重组基因在成纤维细胞中瞬时表达,产生了M片段的约70kD和55kD的两个糖蛋白,并在与S片段拼接处经蛋白酶切割产生了约26kD的核蛋白,免疫印迹分析产生的约26kD的蛋白具有抗汉坦病毒的抗原活性。

汉坦病毒的DNA疫苗研究进展

肾综合征出血热和汉坦病毒肺综合征是由汉坦病毒引起的对人类有致死作用的疾病。基因免疫能克服伴随着汉坦病毒疫苗研制的一些技术障碍。DNA疫苗方法对于研制汉坦病毒多价疫苗很有发展前景。本文汉坦病毒的两种流行性疾病的DNA疫苗研究进展进行综述。

QX型传染性支气管炎病毒病毒样颗粒的制备与初步评价

研究旨在制备一种针对QX型传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的病毒样颗粒(Virus-like particle,VLP)疫苗并对其免疫保护效果进行初步评价。试验首先构建了分别表达QX型IBV S蛋白(QXLS)、M蛋白(QXLM)和E蛋白(QXLE)的三种重组杆状病毒rBacmid-QXLS、rBacmid-QXLM和rBacmid-QXLE,并通过间接免疫荧光试验(IFA)和West-ern blot鉴定目的蛋白的表达;进一步将3种重组杆状病毒通过适当比例共感染Sf9细胞获得VLP,经蔗糖密度梯度离心纯化后使用透射电子显微镜观察鉴定VLP的组装效果;最后将纯化的VLP与氢氧化铝佐剂混合制成疫苗免疫SPF鸡进行免疫保护效果评价。结果显示:S、M和E三种目的蛋白均能成功表达,透射电子显微镜观察可见组装形成的VLP呈现典型的椭圆形病毒样结构,直径为80~120 nm;单独VLP疫苗免疫具有一定的免疫保护效果,QXL87+VLP疫苗联合免疫保护效果较好,可有效减轻临床病变、降低气管和泄殖腔排毒量及组织器官载毒量。研究表明,试验已经成功制备出QX型IBV VLP,且具有良好的免疫原性,为后续进一步研制基于VLP技术的QX型IBV基因工程疫苗奠定了基础。

宰后成熟时间对牛肉品质的影响

研究了牛肉在成熟1、3和7天时其pH值、剪切力值、肌原纤维小片化指数、胶原含量及肌原纤维微观结构的变化。结果表明,宰后成熟时间对牛肉各项理化指标都有较为显著的影响,成熟时间越长,变化越显著。证明要提高牛肉的质量,生产出优质牛肉,宰后成熟是关键环节之一。

蜂胶液体中类黄酮化合物的HPLC测定和抗氧化性能研究

研究了蜂胶液体中类黄酮化合物的含量和蜂胶液体的抗氧化性能。高效液相色谱法(HPLC)分析显示,每100mL蜂胶液体中芦丁、槲皮素、桑黄素、山萘黄素和异鼠李素的含量分别是11.20、4.60、16.00、4.00和6.10mg。芦丁比色法测定显示,蜂胶液体中总类黄酮化合物含量达到30mg/mL。抗氧化试验结果表明,在金属抗坏血酸依赖的卵磷脂脂质体过氧化作用中,蜂胶液体具有一定的抗氧化性质。蜂胶液体对Cu2+、Fe2+和Fe3+催化的氧化体系的抑制率分别为9.17%、34.32%和47.02%;在Cu2+催化的体系中,蜂胶液体的氧化抑制效果与1.0mmol/L肌肽相似,在Fe2+和Fe3+催化的氧化体系中则与10mmol/L肌肽的作用相当。

苏州某市一起肠炎沙门氏菌食物中毒事件调查分析

目的用现场流行病学方法,分析本次食物中毒事件的原因和可疑危险因素,指导临床救治并提出预防措施。方法通过查阅医院就诊记录和医务室门诊记录、考勤记录、员工订餐记录等主动搜索病例,开展病例个案调查和现场卫生学调查,采集相关样品进行实验室检测等,判断引起本次食物中毒事件的可疑餐次和食物。结果通过访谈、个案调查、实验室检查等共搜索到可能病例67人(包括确诊病例27人),临床特征主要为腹泻(83.58%,56/67)、发热(79.10%,53/67)、腹痛(76.12%,51/67)等。可疑食品是3月3日晚餐的回锅肉,59份肛拭子分离到25份肠炎沙门氏菌,其中一株分离自厨师。经脉冲场电泳(pulsed-fieldgel electrophoresis, PFGE)分型, 25株肠炎沙门氏菌同源性为100%。经药敏分析显示, 25株肠炎沙门氏菌对头孢噻肟、头孢他啶具有较好的药物敏感性;对氨苄西林、氯霉素耐药性强。结论食用被肠炎沙门氏菌污染的回锅肉是导致本次事件的主要原因,建议监管部门加强对集体配餐单位的监督管理,提高从业人员食品安全意识,防范类似事件的发生。

一起肠聚集性大肠埃希氏菌引起的食源性疾病暴发调查分析

目的调查处理一起引起学生集体腹泻事件,分析本次事件的原因和可疑危险因素。方法通过查阅学校医务室就诊记录、考勤记录、就餐消费系统刷卡记录和医院就诊记录等主动搜索病例,开展病例个案和现场卫生学调查,采集相关样品进行实验室检测等,运用回顾性队列研究判断本次食源性疾病暴发事件的可疑餐次和食物。结果通过访谈、个案调查、实验室检查等共搜索到病例217人,临床特征主要为腹泻(腹泻次数≥3次/24 h占比62%,135/217)、腹痛(47%,102/217)等;从生物、食物原料和环境样品中共检出肠聚集性大肠埃希氏菌(enteroaggregative Escherichia coli,EAEC)毒力基因阳性样品55份,分离到EAEC菌株28株,其中27株进行脉冲场凝胶电泳分型,共形成A^Q 17个型别,呈高度多态性。可疑食品是5月30日晚餐的凉拌椒麻鸡。结论该起事件是由学校食堂配餐引起的一起肠道聚集性大肠埃希氏菌所致食源性疾病暴发,建议监管部门加强对学校食堂的监督管理,提高食堂从业人员食品安全意识,预防类似事件的发生。

基于CFD的定点风速测定法的分析

为了准确测量巷道风速,针对井巷平均风速定点测风法,通过CFD计算流体力学的相关知识,对梯形、半圆拱形和方形3种巷道内部的风速分布进行了数值模拟分析,验证了平均风速定点测风法的可行性。

改进细菌觅食算法的永磁同步电机参数辨识

应用群智能算法对永磁同步电机(PMSM)进行参数辨识后期容易进入局部最优,从而导致辨识误差大,为此提出一种融合小生境技术的改进细菌觅食算法(MBFA)。通过构建目标追踪函数,利用电机电流、电压和转速等直接测量的信号实现对电机d轴电感、q轴电感、定子电阻和永磁体磁链的快速、准确辨识;辨识过程中通过引入格型准则对目标解空间进行拟蒙特卡罗采样提高算法的全局搜索能力;基于小生境技术进行在线多种群协同搜索策略提高算法的搜索效率和寻优精度;最后通过引入一种种群实时监测和动态更新机制保证了算法在整个寻优过程的鲁棒性。仿真和实验结果表明,所提算法在参数辨识的快速性、准确性、稳定性方面均表现优越,辨识结果能够满足对永磁同步电机进行建模和仿真的精度要求。

偏W形通风系统瓦斯浓度场分布规律研究

为了加强对偏W形通风系统瓦斯浓度场分布规律的研究,以太岳煤矿2201综采面为例,采用数值模拟与现场实测相结合的方法进行研究,从理论和实践两方面得出综采面分别采用2种不同的通风方式时瓦斯浓度场分布情况。通过对比分析得到,两进一回偏W形通风方式更有利于瓦斯集中抽放及预防回风隅角瓦斯超限。