黄芪多糖诱导细胞自噬抑制食管癌EC109细胞增殖的研究

目的研究黄芪多糖(APS)对食管癌EC109细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响及其与细胞自噬的关系。方法体外培养EC109细胞,实验分为以下几组:浓度为0(对照组)、1.0、1.5、2.0 mg·mL^(-1)的黄芪多糖组,5μmol·L^(-1) PIK-Ⅲ(自噬抑制剂)组,2.0 mg·mL^(-1)黄芪多糖联合5μmol·L^(-1) PIK-Ⅲ组。采用MTT法检测各组EC109细胞的增殖活性;吖啶橙染色实验和流式细胞术检测黄芪多糖组细胞的凋亡;扫描电镜观察黄芪多糖组EC109细胞表面结构的变化;Transwell细胞迁移、侵袭实验分别检测黄芪多糖组EC109细胞的迁移和侵袭能力;激光共聚焦显微镜检测黄芪多糖组LC3的荧光表达强度;Western blot检测黄芪多糖组自噬相关蛋白Beclin1、P62和LC3B的表达水平。结果与对照组相比,随着黄芪多糖浓度的升高,EC109细胞增殖抑制率及凋亡率显著增加;细胞表面结构破坏程度增加;细胞迁移和侵袭能力受到显著抑制;LC3荧光表达强度增强(P<0.01);P62蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Beclin1和LC3B表达水平显著增高(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪多糖可浓度依赖性地抑制EC109细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进EC109细胞的凋亡,其机制可能与黄芪多糖诱导EC109细胞自噬有关。