响应面法优化解脂耶罗维亚酵母ypy01淀粉酶发酵条件研究

利用Plackett-Burman(PB)设计和响应面法,对解脂耶罗维亚酵母ypy01淀粉酶生产条件进行了优化。PB设计筛选到3个显著因子,分别为可溶性淀粉浓度、蛋白胨浓度和初始pH。采用响应面法对3个显著因子进一步优化,获得了最佳培养基组成:0.84%可溶性淀粉,2.25%蛋白胨,1%酵母粉,3%NaCl,0.05%MgSO4,0.05%CaCl2,初始pH为6.8,在最优条件下,淀粉酶产量达到2012.50 U/mL。

奥默柯达酵母植酸酶基因phy1在毕赤酵母中的表达

将奥默柯达酵母(Kodamaea ohmeri)植酸酶基因phy1构建到巴斯德毕赤表达载体pPICZαA中,转入到受体菌X-33中,成功实现了奥默柯达酵母植酸酶基因phy1的分泌表达。利用BMMY培养基进行诱导培养,甲醇诱导3 d后,重组酶产量达到最高,为6 290 U/mL,SDS-PAGE显示重组酶的大小约为62 ku。通过对表达产物的酶学性质研究,发现该重组酶具有较好的热稳定性及较广泛的pH适用范围,其最适作用温度为65℃,最适作用pH为5.0。