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醋糟栽培对杏鲍菇胞外酶活性的影响
被引量:
3
1
作者
杨曼曼
侯绍郅
+5 位作者
马帅
初洋
倪新江
董新伟
张正坦
刘伟
《湖北农业科学》
2015年第17期4214-4216,共3页
以醋糟为主料栽培杏鲍菇(Pleurotus eryngii Quei),并在其生长发育的不同阶段测定了8种胞外酶的活性。结果表明,以醋糟为主料栽培杏鲍菇头潮菇生物学效率可达80.8%;其纤维素酶系完整,β-葡萄糖苷酶、HC酶、CMC酶、FP酶、淀粉酶和果胶酶...
以醋糟为主料栽培杏鲍菇(Pleurotus eryngii Quei),并在其生长发育的不同阶段测定了8种胞外酶的活性。结果表明,以醋糟为主料栽培杏鲍菇头潮菇生物学效率可达80.8%;其纤维素酶系完整,β-葡萄糖苷酶、HC酶、CMC酶、FP酶、淀粉酶和果胶酶的活性在子实体生长发育时期较高,在幼菇期均出现峰值;漆酶和过氧化物酶在菌丝满袋期活性出现峰值,随后呈下降趋势,过氧化物酶活性迅速下降,幼菇期和成熟期酶活性消失。
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关键词
醋糟
杏鲍菇(Pleurotus
eryngii
Quei)
生物学效率
胞外酶
下载PDF
职称材料
新型酵母蛋白表位标记和基因敲除质粒系统的构建及可行性验证
被引量:
2
2
作者
唐仕伟
李辉
+2 位作者
崔时媛
张正坦
谢志平
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期939-949,共11页
【目的】构建一套用于酿酒酵母基因功能研究的质粒。该套质粒结合pUG系列和pFA6a系列的优点,同时采用同尾酶实现蛋白表位标签的串联插入。【方法】利用PCR技术分别克隆pUG系列质粒的lox P位点、pFA6a质粒多酶切位点和ADH1终止子模块;通...
【目的】构建一套用于酿酒酵母基因功能研究的质粒。该套质粒结合pUG系列和pFA6a系列的优点,同时采用同尾酶实现蛋白表位标签的串联插入。【方法】利用PCR技术分别克隆pUG系列质粒的lox P位点、pFA6a质粒多酶切位点和ADH1终止子模块;通过重组连接各片段,构建pCLHN-TRP和pCLHN-URA质粒。在此基础上利用同尾酶实现多种蛋白表位标签的单个或串联重复插入,获得一系列蛋白表位标记质粒。最后,以ATG1、COX4和NHX1为例验证本质粒系列的性能。【结果】在本项工作中,我们共构建2种基因敲除用质粒和17种表位标记用质粒(涵盖1-8 FLAG、1-12 V5、3-9 HA、2-8MYC、GFP和m Cherry)。在几个靶基因上的应用证实了本套质粒的实用性。尤其值得指出的是,通过组合采用不同重复度的串联表位标签,在同一张膜上同时检测表达差异极大的不同蛋白而不使高表达蛋白信号饱和成为可能。【结论】本文所构建的pCLHN质粒系列是对现有酵母质粒工具的有益补充。
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关键词
酵母细胞
基因敲除
蛋白标签
同尾酶
表达量
原文传递
酿酒酵母全基因组SNARE蛋白的亚细胞定位研究
3
作者
张正坦
朱婧
谢志平
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期44-57,共14页
在真核细胞中,内质网、高尔基体、质膜等膜结构间的蛋白质运输主要通过囊泡出芽和融合实现。SNARE蛋白家族在介导囊泡与目的膜结构融合过程中发挥关键作用。在模式生物酿酒酵母中,对全基因组SNARE蛋白的系统研究仍有不足。此研究构建了...
在真核细胞中,内质网、高尔基体、质膜等膜结构间的蛋白质运输主要通过囊泡出芽和融合实现。SNARE蛋白家族在介导囊泡与目的膜结构融合过程中发挥关键作用。在模式生物酿酒酵母中,对全基因组SNARE蛋白的系统研究仍有不足。此研究构建了一套用于标记酿酒酵母基因组全部24种SNARE的工具质粒。该系列质粒既能呈现出良好的定位特征,又避免了过度表达造成的定位异常。通过与细胞器标记共定位验证了SNARE蛋白的亚细胞定位。结果发现3种SNARE的定位与之前报道不符:Bos1定位于早高尔基体,Snc1和Bet1定位于晚高尔基体/早内体。另外,Sec9定位于芽尖和芽颈,这是首次观察到Sec9在活酵母细胞中的定位。这项工作首次全面的检验了酵母SNARE家族蛋白的亚细胞定位,为后续SNARE蛋白功能研究提供了新线索,并为相关研究提供了一套工具质粒。
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关键词
SNARE
亚细胞定位
酿酒酵母
共定位
原文传递
题名
醋糟栽培对杏鲍菇胞外酶活性的影响
被引量:
3
1
作者
杨曼曼
侯绍郅
马帅
初洋
倪新江
董新伟
张正坦
刘伟
机构
烟台大学生命科学学院
出处
《湖北农业科学》
2015年第17期4214-4216,共3页
基金
烟台大学大学生科技创新基金项目(131709)
山东省自然科学基金项目(ZR2010CM022)
文摘
以醋糟为主料栽培杏鲍菇(Pleurotus eryngii Quei),并在其生长发育的不同阶段测定了8种胞外酶的活性。结果表明,以醋糟为主料栽培杏鲍菇头潮菇生物学效率可达80.8%;其纤维素酶系完整,β-葡萄糖苷酶、HC酶、CMC酶、FP酶、淀粉酶和果胶酶的活性在子实体生长发育时期较高,在幼菇期均出现峰值;漆酶和过氧化物酶在菌丝满袋期活性出现峰值,随后呈下降趋势,过氧化物酶活性迅速下降,幼菇期和成熟期酶活性消失。
关键词
醋糟
杏鲍菇(Pleurotus
eryngii
Quei)
生物学效率
胞外酶
Keywords
vinegar residue
Pleurotus eryngii Quei
biological efficiency
extracellular enzyme
分类号
S646.1 [农业科学—蔬菜学]
下载PDF
职称材料
题名
新型酵母蛋白表位标记和基因敲除质粒系统的构建及可行性验证
被引量:
2
2
作者
唐仕伟
李辉
崔时媛
张正坦
谢志平
机构
上海交通大学生命科学技术学院
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期939-949,共11页
基金
上海市教育委员会科研创新计划(2017-01-07-00-02-E00035)~~
文摘
【目的】构建一套用于酿酒酵母基因功能研究的质粒。该套质粒结合pUG系列和pFA6a系列的优点,同时采用同尾酶实现蛋白表位标签的串联插入。【方法】利用PCR技术分别克隆pUG系列质粒的lox P位点、pFA6a质粒多酶切位点和ADH1终止子模块;通过重组连接各片段,构建pCLHN-TRP和pCLHN-URA质粒。在此基础上利用同尾酶实现多种蛋白表位标签的单个或串联重复插入,获得一系列蛋白表位标记质粒。最后,以ATG1、COX4和NHX1为例验证本质粒系列的性能。【结果】在本项工作中,我们共构建2种基因敲除用质粒和17种表位标记用质粒(涵盖1-8 FLAG、1-12 V5、3-9 HA、2-8MYC、GFP和m Cherry)。在几个靶基因上的应用证实了本套质粒的实用性。尤其值得指出的是,通过组合采用不同重复度的串联表位标签,在同一张膜上同时检测表达差异极大的不同蛋白而不使高表达蛋白信号饱和成为可能。【结论】本文所构建的pCLHN质粒系列是对现有酵母质粒工具的有益补充。
关键词
酵母细胞
基因敲除
蛋白标签
同尾酶
表达量
Keywords
yeast cells
gene deletion
epitope tagging
isocaudomer
expression level
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
酿酒酵母全基因组SNARE蛋白的亚细胞定位研究
3
作者
张正坦
朱婧
谢志平
机构
上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期44-57,共14页
基金
上海市自然科学基金探索类项目(18ZR1420400)
上海市教育委员会科研创新计划(2017-01-07-00-02-E00035)资助项目
文摘
在真核细胞中,内质网、高尔基体、质膜等膜结构间的蛋白质运输主要通过囊泡出芽和融合实现。SNARE蛋白家族在介导囊泡与目的膜结构融合过程中发挥关键作用。在模式生物酿酒酵母中,对全基因组SNARE蛋白的系统研究仍有不足。此研究构建了一套用于标记酿酒酵母基因组全部24种SNARE的工具质粒。该系列质粒既能呈现出良好的定位特征,又避免了过度表达造成的定位异常。通过与细胞器标记共定位验证了SNARE蛋白的亚细胞定位。结果发现3种SNARE的定位与之前报道不符:Bos1定位于早高尔基体,Snc1和Bet1定位于晚高尔基体/早内体。另外,Sec9定位于芽尖和芽颈,这是首次观察到Sec9在活酵母细胞中的定位。这项工作首次全面的检验了酵母SNARE家族蛋白的亚细胞定位,为后续SNARE蛋白功能研究提供了新线索,并为相关研究提供了一套工具质粒。
关键词
SNARE
亚细胞定位
酿酒酵母
共定位
Keywords
SNARE
Subcellular localization
Saccharomyces cerevisiae
Colocalization
分类号
Q816 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
醋糟栽培对杏鲍菇胞外酶活性的影响
杨曼曼
侯绍郅
马帅
初洋
倪新江
董新伟
张正坦
刘伟
《湖北农业科学》
2015
3
下载PDF
职称材料
2
新型酵母蛋白表位标记和基因敲除质粒系统的构建及可行性验证
唐仕伟
李辉
崔时媛
张正坦
谢志平
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
原文传递
3
酿酒酵母全基因组SNARE蛋白的亚细胞定位研究
张正坦
朱婧
谢志平
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
0
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