MicroRNA在胎盘发育及复发性流产中的研究进展

复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)是女性妊娠期较为常见的并发症之一,其发生率为1%~5%。随着流产次数的增加,RSA复发的风险也逐步上升,既往发生3次以上自然流产的患者再次妊娠后的胚胎丢失率为40%~80%[1]。母体的自身免疫和同种免疫等免疫学因素、夫妇及胚胎的染色体异常、遗传性和获得性易栓因素、内分泌异常、女性生殖系统解剖异常等是RSA已知的主要病因。

妊娠早期人工流产前女性阴道常见病原体感染分析

目的:了解妊娠早期人工流产前女性阴道常见病原体感染状况及临床症状。方法:对2013年在天津医科大学第二医院就诊的2 270例妊娠早期人工流产前妇女取阴道后穹窿分泌物,用细菌性阴道病检测试剂盒及阴道分泌物涂片镜检进行检测,同时询问患者并观察患者外阴、阴道及宫颈情况,记录是否有临床症状。结果:在2 270例患者中,细菌性阴道病阳性897例(39.52%),其中有临床症状者532例(59.31%);外阴阴道假丝酵母菌病122例(5.37%),其中有临床症状者96例(78.69%);滴虫性阴道炎65例(2.86%),有临床症状者47例(72.31%);其中细菌性阴道病合并外阴阴道假丝酵母菌病、细菌性阴道病合并滴虫性阴道炎的检出率分别为4.23%(96/2 270)和2.34%(53/2 270),3种病原体同时检出率为0.93%(21/2 270),合并感染者均有临床症状。结论:部分妊娠早期人工流产前女性阴道感染病原体状态下可能无症状,因此做好人工流产前常见病原体筛查有助于预防术后感染。

X射线辐射远端效应诱发小鼠卵巢储备功能下降的实验研究

目的探讨X射线辐射远端效应(X-ray radiation-induced abscopal effects,X-RIAEs)对小鼠卵巢储备的影响及可能的作用机制。方法16只动情周期规律的6~8周龄雌性C57BL/6J小鼠分为对照组和照射组,8只/组,照射组小鼠麻醉后每日给予胸部局部区域8 Gy X射线照射,连续照射3 d,对照组小鼠仅给予麻醉处理。照射结束21 d后,检测两组小鼠动情周期、血清激素及促炎性因子水平、卵巢组织形态学变化;利用转录组测序技术(ribonucleic acid sequencing,RNA-seq)检测小鼠卵巢组织RNA转录组表达情况,筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)后行基因本体论-生物学过程(gene ontology-biological processes,GO_BP)分析,通过应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)验证测序结果,免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)检测精卵发生特异性碱性螺旋环螺旋蛋白1(spermatogenesis-and oogenesis-specific basic helix-loop-helix-containing protein 1,SOHLH1)和中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)在卵巢组织内表达和定位情况。结果照射组小鼠动情周期紊乱,主要停滞于间期,照射组小鼠始基卵泡数量[10.50(1.25,12.75)]及生长卵泡数量[4.50(2.50,9.00)]均显著少于对照组小鼠[60.00(30.00,90.25),P<0.001;18.50(18.00,20.75),P<0.001],差异均具有统计学意义,而闭锁卵泡数量[56.00(45.25,98.75)]明显多于对照组[12.50(5.25,20.25)],差异具有统计学意义(P<0.001);照射组小鼠血清雌二醇水平[(70.28±5.27)pmol/L]、抗苗勒管激素水平[(104.00±6.98)μg/L]均明显低于对照组小鼠[(97.58±7.25)pmol/L,P=0.016;(129.70±8.39)μg/L,P=0.046],而照射组小鼠卵泡刺激素水平与对照组小鼠相比,差异无统计学意义(P=0.996);与对照组小鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平[(31.61±12.89)μg/L]、白细胞介素(interleukin,IL)-1β水平[(52.75±2.06)μg/L]相比,照射组小鼠血清TNF-α水平[(488.30±36.20)μg/L]和IL-1β水平[(62.37±2.50)μg/L]均明显升高(P<0.001,P=0.018),照射组小鼠血清IL-6水平较对照组小鼠也呈上升趋势,但差异无统计学意义(P=0.301)。GO_BP分析结果显示,X-RIAEs诱导小鼠卵巢组织表达下调的DEGs主要参与卵泡发育过程,表达上调的DEGs主要参与卵巢组织炎症反应过程,RT-qPCR结果与测序结果一致。IHC结果显示,照射组小鼠卵巢组织SOHLH1阳性表达面积[(23.18±4.00)%]显著低于对照组[(65.90±6.28)%,P=0.005],而NE阳性表达面积[(30.73±4.00)%]显著高于对照组[(14.47±2.22)%,P=0.024]。结论X-RIAEs可诱发卵巢组织炎性反应,并抑制小鼠卵巢卵泡生长及发育过程,进而导致卵巢储备功能下降。

抗菌肽LL-37的原核表达纯化及对假丝酵母菌的抑制作用

目的研究抗菌肽LL-37通过促进阴道上皮细胞免疫因子的分泌抑制假丝酵母菌的作用。方法（1）构建LL-37原核表达载体pET—Duet／LL-37并在大肠埃希菌M15中诱导表达。对所表达的LL-37融合蛋白进行纯化及鉴定，并用K-B纸片法初步验证LL-37纯化蛋白的抗真菌活性。（2）纯化的LL-37蛋白加入到与假丝酵母菌共培养的人阴道上皮细胞[即外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）阴道上皮细胞模型]中，并分为实验组与对照组（不加LL-37纯化蛋白），采用葡萄糖消耗法观察抑菌效果[以吸光度（A）值表示]。采用ELISA方法检测不同时间点干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素10（IL-10）水平及IFN-γ／IL-10比值的变化。结果（1）诱导表达的LL-37融合蛋白的浓度为433．92μg／ml，纯度达96％。K-B纸片法初步证实了LL-37纯化蛋白具有一定的抗真菌活性。（2）LL-37重组蛋白可明显抑制假丝酵母菌生长，实验组各时间点A值明显高于对照组（分别为：12h：3．008±0．003、2．967±0．003；24h：2．941±0．003、2．601±0．003；48h：2．893±0．004、2．409±0．003），分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01），并且随时间进展的下降趋势较对照组缓慢。两组IFN-γ、IL-10分泌水平均呈现先升后降的趋势，于24h达高峰[实验组分别为：（104．00±1．07）、（108．4±0．7）pg／ml；对照组分别为：（85．17±0．28）、（151．6±0．6）pg／m1]。各时间点比较，实验组IFN-γ水平于24h时明显高于对照组（P〈0．01）；各时间点的IL-10水平均低于对照组（P〈0．01），且IFN-γ／IL-10比值均高于对照组（P〈0．01）。结论（1）LL-37重组蛋白对假丝酵母菌具有明显的抑制作用。（2）LL-37重组蛋白通过影响IFN-γ、IL-10等免疫因子的分泌，调整阴道上皮细胞局部免疫，增强抵抗假丝酵母菌感染的能力。

女性不孕症患者宫颈解脲尿原体亚群检出情况的研究

目的：比较女性不孕症患者生殖道内不同亚群解脲脲原体（uu）的检出情况。方法：采用PCR方法分别对120例门诊不孕症患者（不孕症组）和同期正常体检女性（对照组）的宫颈分泌物进行UU生物亚群分型检测，并比较其差异；采用ELISA方法检测不同uu亚群感染单核细胞后巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor, MIF）的表达水平。结果：①检出率：不孕症纽UUJ群（UU1）检出率为20．8％（25／120），对照组为18．3％（21／120），组间无统计学差异（X2=0．24，P〉0．05）；不孕症组UU2群（UU2）检出率为45．8％（55／120），对照组为21．7％（26／120），具有显著统计学差异（X^2=15．67，P〈0．011。②MIF表达：UU浓度为104CCU／mL，MIF表达在UU1组、UU2组和对照组间无显著统计学差异（P〉0．05）：UU浓度分别为10^5CCU／mL和10^6CCU／mL时，共培养18h、24h时UU2群MIF均表达增加，与UU1群和对照组比较均有统计学差异俨〈0．05）。结论：UU2群在不孕症患者检出率高于正常女性，且UU2群促单核细胞分泌MIF的能力高于UU1群，UU2群感染可能与女性不孕症具有一定的相关性，其潜在致病机制有待进一步研究。

解脲脲原体感染与女性不孕症的相关性研究

目的探讨不同生物亚群解脲脲原体（Uu）与不孕症的相关性。方法采用PCR方法对120例门诊不孕症患者（不孕症组）的宫颈分泌物进行Uu生物亚群分型检测;以同期健康体检中心120例正常体检女性为对照组。比较不同亚群Uu在不孕症组和对照组感染率的差异。结果不孕症组Uu检出率为55.0%（66/120）,对照组为30.0%（36/120）,两组比较,差异有统计学意义（χ^2=15.35,P〈0.05）;不孕症组Uu生物1群检出率为20.8%（25/120）,对照组为18.3%（21/120）,两组比较,差异无统计学意义（χ^2=0.24,P〉0.05）;不孕症组Uu生物2群检出率为45.8%（55/120）,对照组为21.7%（26/120）,两组比较,差异有统计学意义（χ^2=15.67,P〈0.01）。结论 Uu感染与女性不孕有一定的相关性,Uu1群可能为正常携带,Uu2群可能为致病群,其潜在治病机制有待进一步研究。

育龄妇女孕前TORCH血清学抗体筛查的结果分析

目的探讨TORCH血清学抗体检测在育龄妇女孕前检测的意义。方法回顾性分析2018年1月—2019年12月在天津医科大学第二医院进行孕前TORCH血清学抗体检测的育龄妇女1041例临床资料,对巨细胞病毒(CMV)、弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)和单纯疱疹病毒(HSV)Ⅱ型的IgM和IgG抗体进行检测。分析TORCH检测结果,并比较不同年龄段育龄妇女TORCH血清抗体阳性率。结果1041例进行TORCH血清学抗体筛查中,TOX-IgG、RV-IgG、CMV-IgG和HSV-Ⅱ-IgG阳性率分别为1.83%、87.42%、90.78%和7.88%。TOX-IgM、RV-IgM、CMV-IgM和HSV-Ⅱ-IgM阳性率分别为0.86%、0.38%、1.54%和1.15%。不同年龄段的TORCH血清学IgM和IgG抗体阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对育龄妇女进行孕前TORCH血清学抗体筛查,对存在风险的育龄妇女进行干预,有助于降低因TORCH感染导致的不良妊娠结局和出生缺陷风险,为育龄妇女实现优生优育提供帮助。

硫氧还蛋白系统在硫化氢抗大鼠肝缺血再灌注损伤中的变化

目的观察硫氧还蛋白（Trx）系统在硫化氢（H2S）抗大鼠肝缺血再灌注损伤中的变化。方法以硫化氢钠（NaHS）作为H2S供体，采用随机数字表法将18只SD大鼠随机分为3组：假手术组（Sham组）、肝缺血再灌注组（IR组）、硫化氢钠处理组（NaHS组）。建立70％肝缺血再灌注模型，NaHS组于再灌注前5min腹腔注射NaHS28μmol／kg。各组于再灌注后6h取血，测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）活性；取肝叶HE染色观察其组织形态变化；取肝组织采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法检测硫氧还蛋白酶（Trx）、硫氧还蛋白还原酶（TrxR）活性，免疫印迹（Westernblot）技术检测Trx系统蛋白和硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）表达。结果与IR组比较，NaHS组大鼠血清中ALT、AST水平下降，病理损害明显减轻。与Sham组比较，IR组Th活性下降和Trxl蛋白表达下调，TXNIP蛋白表达上调（P〈0．05）；与IR组比较，NaHS组Trx活性升高和Trxl蛋白表达上调，TXNIP蛋白表达下调（P〈0．05），表明H2S后处理可减少对Trx的抑制提高组织的抗氧化能力。结论Trx系统参与肝缺血再灌注损伤的发生发展，H2S后处理增强了细胞Trx系统的抗氧化损伤能力，发挥保护作用。