5-Aza-CdR增强TRAIL对胃癌细胞的抗瘤活性与caspase-8表达的关系

目的 探讨 5 Aza CdR对凋亡诱导分子TRAIL抗胃癌细胞活性的影响。方法 采用MTT方法检测TRAIL蛋白的抗癌活性 ;采用RT PCR方法检测caspase 8mRNA的表达。结果 TRAIL 2 0 0ng/ml作用 72h对SGc 790 1、Kato 3和AGS胃癌细胞的生长抑制率分别为 9 83 %、11 94%和 4 0 4% ;经 5 Aza CdR处理后 ,对 3株胃癌细胞的抑制率分别提高到3 8 98%、5 2 42 %和 3 0 72 % ;用 5 Aza CdR处理后 3株胃癌细胞caspase 8mRNA表达明显增加。结论 5 Aza CdR能增强胃癌细胞对TRAIL的敏感性 ,其机制可能与caspase 8的表达上调有关。

hTERT干扰真核表达载体的构建及鉴定

目的构建和鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)干扰真核表达载体。方法人工合成hTERT干扰序列并定向克隆到siRNA(small interfereace RNA)真核表达载体pSilencer3.1_H1neo;采用PCR、酶切和测序鉴定。结果成功构建了hTERT干扰真核表达载体。结论hTERT干扰真核表达载体的构建为进一步研究端粒、端粒酶在肿瘤细胞中的生物学作用奠定了基础。

洛阳地区Barrett’s食管的发病情况、内镜和病理学特点

目的探讨洛阳地区一组Barrett’s食管（BE）的发病情况、内镜和病理学特点及其与幽门螺杆菌（H．pylori）感染的关系。方法采用普通胃镜检查结合病理检查结果，对洛阳地区有消化道症状的一组BE患者进行分析，同时采用尿素[^14C]呼气试验药盒检查H·pylori感染对BE发病学的影响。结果2006年8月～2007年4月共有593例接受胃镜检查，有22例诊断为BE，BE发病率为3．71％；以短段、舌型发病率最高，分别占81．81％和77．27％；7例（31．8％）有典型反流症状；伴有低度异型性增生3例（13．64％），重度异型性增生1例（4．55％），并发腺癌1例（4．55％），其中伴有重度异型性增生的1例随访1年后并发腺癌；对其中的10例进行H．pylori检查，阳性率为90％。结论洛阳地区BE发病率较高，以短段、舌型为主，有典型反流症状者较少，伴有异型性增生、腺癌者及并发H．pylori感染者常见。

胃癌细胞对TRAIL的敏感性与caspase-8基因甲基化状态的关系

目的 探讨caspase 8基因启动子区 5′CpG岛甲基化状态与TRAIL抗癌作用的关系。方法 采用甲基化特异PCR方法检测 5种胃癌细胞株caspase 8基因启动子区的甲基化状态 ;采用MTT方法检测TRAIL蛋白的抗癌活性。结果 5种胃癌细胞株对TRAIL的敏感性不尽相同 ,caspase 8基因启动子区均为非甲基化状态 ;5 Aza CdR处理可提高耐药细胞对TRAIL的敏感性 ,但不影响胃癌细胞的甲基化状态。结论 5 Aza CdR可提高多数胃癌细胞对TRAIL的敏感性 ,胃癌细胞对TRAIL的敏感性与caspase

5-Aza-CdR可提高TRAIL对胃癌细胞Kato3的抗瘤活性

目的 探讨 5 Aza CdR对TRAIL抗胃癌细胞活性的影响。方法 采用MTT方法检测TRAIL的抗癌活性 ;采用RT PCR方法检测Caspase 8基因mRNA的表达。结果 未经 5 Aza CdR处理者只有 2 0 %胃癌Kato 3细胞对TRAIL敏感 ,经 5 Aza CdR处理可诱发Caspase 8mRNA的表达 ,提高Kato 3细胞对TRAIL的抗瘤敏感性。 结论 5 Aza CdR可提高TRAIL对胃癌细胞的抗瘤作用 ,其机制可能与诱发Caspase

内镜热极技术联用抑酸剂治疗Barrett’s食管的临床观察

目的探讨内镜热极技术联用抑酸剂治疗Barrett’s食管的疗效。方法2006年8月～2007年8月经内镜和病理组织学检查诊断的Barrett’s食管患者100例，其中95例患者在内镜下采用热极治疗，术后口服抑酸剂巩固治疗，另5例患者仅口服抑酸剂治疗进行对照，两组均进行内镜及临床随访。结果95例患者经过1次热极治疗Barrett’s食管完全消除，术后38例（40％）出现胸骨后隐痛；54例患者半年后随访，总有效率为92．59％；对照组3例患者半年后随访，总有效率为0。结论热极联用抑酸剂治疗Barrett’s食管安全有效、短期疗效好。

巴马小型猪化脓性肝脓肿模型的建立和鉴定

目的建立和鉴定巴马小型猪化脓性肝脓肿模型。方法采用在肝实质内快速注射金葡菌和自体静脉血凝块混合物的方法建立化脓性肝脓肿模型。采用脓液涂片革兰染色、脓液培养和PCR方法鉴定化脓性肝脓肿的致病菌。采用石蜡切片HE染色法评估化脓性肝脓肿的病理分期。结果利用金葡菌ATCC 29213和自体静脉血凝块混合物于肝实质内快速注射的方法建立了化脓性肝脓肿模型。脓液涂片革兰染色、脓液培养和PCR结果表明引起化脓性肝脓肿的致病菌为注入的细菌。脓肿石蜡切片HE染色结果表明造模术后第15天为脓肿前期、第21天为脓肿形成期、第33天为脓肿恢复期。结论首次建立了巴马小型猪化脓性肝脓肿模型。化脓性肝脓肿模型的建立为探讨化脓性肝脓肿的新的治疗模式提供了可能。

人端粒酶逆转录酶RNA干扰对结肠癌细胞生物学行为的影响

目的研究端粒酶逆转录酶(hTERT)RNA干扰对结肠癌HCT116细胞生物学行为的影响。方法将HCT116细胞分为转染组(转染重组质粒真核表达载体)、对照组(转染空载体质粒)和未转染组。PCR方法检测hTERT干扰序列,RT-PCR方法检测hTERT表达,HE染色、生长曲线和流式细胞术方法分别检测细胞形态、细胞增殖和细胞周期,β-半乳糖苷酶染色方法检测细胞衰老,AnnexinⅤ/PI染色流式细胞光度术检测细胞凋亡。结果转染细胞内均存在hTERT干扰序列,hTERT干扰率为21.5%;与未转染细胞相比,转染细胞核质比明显缩小,增殖率显著下降(P<0.05),衰老细胞和G2-M期细胞明显增加(P<0.05)。hTERT干扰显著增加结肠癌细胞凋亡(P<0.05),而对照细胞各指标均无显著变化。结论hTERT干扰显著影响结肠癌细胞的生物学行为。

金葡菌的生长速度和凝固酶活性对巴马小型猪化脓性肝脓肿形成的影响

目的探讨金葡菌的生长速度和外毒素活性对巴马小型猪化脓性肝脓肿形成的影响。方法采用培养时间和菌液OD450吸光度值法描记细菌生长曲线;采用RT-PCR法检测凝固酶(coa)、溶血酶α(hla)和耐热核酸酶A(nuc A)的mRNA表达;采用试管法检测游离凝固酶、溶血法检测游离溶血酶和甲苯胺蓝DNA酶琼脂法检测游离耐热核酸酶的活性。结果金葡菌ATCC29213的生长速度显著快于ATCC 25923。ATCC 29213的凝固酶和耐热核酸酶A mRNA表达量显著高于ATCC 25923,但溶血酶α表达两者无显著性差异。ATCC 29213的游离凝固酶活性显著高于ATCC 25923,但其游离耐热核酸酶和游离溶血酶的活性显著低于ATCC 25923。结论金葡菌ATCC 29213引起巴马小型猪化脓性肝脓肿的机制可能与其生长速度快和游离凝固酶活性高相关。

以反复腹泻为主要临床表现的肠病相关T细胞淋巴瘤1例

非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma,NHL)临床表现复杂,无固定特征,容易造成误诊和漏诊。现报道1例以反复腹泻为主要临床表现的肠病相关T细胞淋巴瘤。

浓盐酸摄入致消化道损伤的实验研究和临床报道

目的探讨腐蚀性液体对消化道损伤的诊断方法。方法利用广范试纸检测腐蚀性液体的p H值,利用硝酸银溶液、氯化钡溶液、铜丝和浓硫酸检测该液体的化学性质;灌注该液体于2只家兔,检测其对消化道损伤的程度;对误服该液体的1例患者进行急诊胃镜检查并救治。结果腐蚀性液体呈微黄色,在空气中发烟,pH<1。该液体稀释1倍后加入硝酸银溶液有白色沉淀,与铜丝和浓硫酸混合后加热无红棕色气体产生。灌注该液体于家兔能够导致其死亡,尸检显示贲门、胃底和部分胃体黏膜层、黏膜下层和肌层出血、坏死。患者误服该液体第17小时胃镜检查主要显示胃大部糜烂,第13天胃镜检查主要显示胃窦和胃角溃疡,第79天胃镜检查显示胃窦瘢痕。经禁食水、抑酸、抗感染等治疗14 d,患者临床表现缓解出院。结论该腐蚀性液体为工业浓盐酸,主要损伤胃黏膜,急诊胃镜检查是可行的。

Caspase-3和hTERT在Barrett’s食管中的表达及其相互关系

目的研究半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)和端粒酶逆转录酶(hTERT)在Barrett’s食管(Barrett’s esophagus,BE)及食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中的表达,探讨其在BE发病中的作用。方法应用免疫组织化学法(LDP)检测22例BE和38例食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中Caspase-3和hTERT的表达,比较两者表达的相关性。结果Caspase-3在BE中的阳性表达率为95.45%,明显高于在食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中的表达(68.42%)(P=0.000);hTERT在BE中的阳性表达率为27.27%,明显低于在食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中的表达(65.79%)(P=0.000)。BE中Caspase-3与hTERT的表达呈强负相关(r=-1,P=0.000)。结论BE中Caspase-3高表达,hTERT低表达。Caspase-3和hTERT在BE发生过程中起重要作用,可能成为预测BE发生的重要参考指标。

OD450值与金黄色葡萄球菌活菌数目的相关性研究

目的探讨OD450值与金黄色葡萄球菌活菌数目的相关性。方法金黄色葡萄球菌单菌落在LB培养基中培养18h,初步稀释后检测菌液的OD450值;取OD450值在0.9-1.0之间的菌液进一步稀释检测OD450值;最后将菌液再稀释5×105倍后取0.5ml涂LB琼脂平板,金黄色葡萄球菌在LB琼脂平板上培养18h后计算菌落数目。结果 OD450值与金黄色葡萄球菌活菌数目呈线性相关,线性回归方程为Y=1.153 92X+0.007 68,OD450值(X),活菌数目(Y×108)/ml。结论用OD450值检测菌液中金黄色葡萄球菌活菌数目具有简便、准确和迅速的特点。

U型反转胃镜法活检能够提高胃底病变的检出率

总结U型反转胃镜方法活检胃底病变的经验,提高胃底病变的诊断水平。采用前视型胃镜,利用U型反转法活检胃底病变。与传统的俯视法相比,U型反转法活检胃底病变具有视野清楚、活检部位准确的优点,并且能够避免活检后出血和穿孔的发生。采用U型反转胃镜方法活检胃底病变能够提高胃底病变的诊断水平。

HSP27、70、90α和105在Barrett’s食管中的表达及其相互关系

目的研究热休克蛋白27、70、90α、105(HSP27、70、90α、105)在Barrett’s食管(Barrett’s esophagus,BE)和食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中的表达及相互关系,探讨其在BE发病中的作用。方法应用免疫组织化学法(LDP)检测22例BE和38例食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中HSP27、70、90α和105的表达,并比较其表达的相关性。结果 HSP70和HSP90α在BE中的阳性表达率分别为31.82%和9.09%,明显低于食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中的表达(47.37%、42.11%)(P=0.001和P=0.000);HSP105在BE中的阳性表达率为100%,明显高于食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中的表达(63.16%)(P=0.000);HSP27在BE中的阳性表达率为77.27%,与食管炎伴贲门腺或胃底腺化生组织中的表达率相比无明显差异(50.00%)(P=0.422)。BE中HSP70和HSP90α的表达存在强正相关(r=1,P=0.000),HSP70、HSP90α的表达均与HSP105的表达存在强负相关(r=-1,P=0.000)。结论 BE上皮中的肠化细胞凋亡和增殖失调,HSP70、HSP90α和HSP105在BE发生过程中起重要作用,可能成为预测BE发生的重要指标。

对TRAIL耐药的肝癌细胞caspase-8基因甲基化状态及其mRNA表达

目的研究肝癌细胞株HepG2和SMMC 7721对肿瘤坏死因子相关与凋亡诱配体(tumor necrosis factor-relat-ed apoptosis-induc ing ligand,TRAIL)的敏感性与caspase-8基因启动子区5′CpG岛的甲基化状态和mRNA表达的关系及5′-氮-2′-杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对TRAIL抗癌活性的影响。方法采用甲基化特异性PCR(m ethylation-spec ific PCR m eth-od,MSP)方法检测caspase-8基因5′CpG岛甲基化状态;采用RT-PCR方法检测caspase-8 mRNA表达;采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色方法检测细胞凋亡。结果2株肝癌细胞均属TRAIL耐药细胞,caspase-8基因5′CpG岛均为非甲基化状态;5-Aza-CdR即不能增加caspase-8 mRNA表达,亦不能提高肝癌细胞对TRAIL的敏感性。结论肝癌细胞对TRAIL的敏感性与caspase-8基因的甲基化状态及mRNA表达无关,5-Aza-CdR不能提高肝癌细胞对TRAIL的敏感性。

以活检后溃疡不愈合为特征的皮革胃1例报道

皮革胃发病率低,临床表现不典型。现将我院收治的1例皮革胃患者报道如下。

经皮无水乙醇硬化治疗巴马小型猪化脓性肝脓肿的疗效和并发症

目的观察经皮无水乙醇滴注治疗化脓性肝脓肿(pyogenic hepatic abscess,PHA)的效果和并发症。方法经皮无水乙醇滴注治疗巴马小型猪PHA,观察治疗效果和并发症。结果经皮无水乙醇滴注治疗巴马小型猪PHA 2次14 d后,3头巴马小型猪均达到了成功治疗的标准,耐受性好,未出现并发症。结论经皮无水乙醇滴注治疗PHA安全有效,无并发症发生。该方法可能解决了稠厚脓液的抽吸和抗生素选择的双重难题,也许能够成为治疗PHA的新模式。