UPLC-MS/MS同时测定Beagle犬血浆中原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷

目的建立Beagle犬血浆中同时测定原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法 Beagle犬单次股静脉注射88 mg.kg-1的注射用复方荭草(冻干粉针),分时取血处理。色谱采用Waters BEH C18反相柱,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸)梯度洗脱,质谱采用多反应离子监测(MRM)方式进行检测,用于定量分析的离子对分别为原儿茶酸m/z109.0→m/z152.8、异荭草素m/z449.2→m/z299.1、野黄芩苷m/z463.1→m/z287.1。结果原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的线性范围分别为0.002～0.569、0.022～5.450和0.024～5.860 mg·L-1,方法的准确度,日内、日间精密度和稳定性均符合要求。结论该方法快速、灵敏、专属性强,可用于原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的药代动力学研究。

UPLC-MS／MS法同时检测血浆中氧化芍药苷、芍药内酯苷和苯甲酰芍药苷

目的建立UPLC-MS／MS同时测定大鼠静脉注射赤芍水提取物后血浆中氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷的分析方法，研究3种指标成分在大鼠体内的药动特征。方法色谱采用WatersBEHC18（2．1mm×50mm，1．7μm）柱，体积流量0．35mlMmin，流动相0．1％甲酸乙腈一0．1％甲酸水梯度洗脱，质谱采用电喷雾电离源，扫描方式为多反应离子监测。结果氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷峰面积和质量浓度之间呈良好线性关系（R〉0．99），提取回收率在92，2％～104．4％之间，精密度、准确度、基质效应和稳定性均良好。分布半衰期为5．5—23．6min，消除半衰期为20．2～44．3min。结论表明3个指标成分在大鼠体内具有分布消除迅速的特点。

多指标综合评分法优选脑通颗粒提取工艺

目的优选脑通颗粒剂的最佳提取工艺。方法采用正交试验法,考察乙醇体积分数、溶剂用量、提取时间、提取次数对提取效果的影响,以多指标综合评分法进行数据处理。结果方中药材除水蛭外以8倍量75%乙醇回流提取2次,每次1 h,药渣与水蛭加10倍量水煎煮2次,每次1 h,为最佳工艺。结论 该提取工艺设计合理,稳定可行。

UPLC-ESI-MS/MS法研究注射用复方荭草在大鼠体内的排泄

目的建立UPLC-ESI-MS/MS法同时测定大鼠尿液、粪便和胆汁中原儿茶酸、异荭草素、野黄芩苷、荭草素、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷7种物质的分析方法,并对注射用复方荭草(荭蓼、灯盏细辛等)在大鼠体内的排泄规律进行研究。方法生物样本经甲醇处理,采用Waters Acquity BEH C18色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水为流动相,电喷雾离子化,多反应离子监测,分别测定大鼠静脉注射注射用复方荭草后排泄物中7种原形成分。结果 7种成分在大鼠尿液中呈良好线性关系,日内、日间精密度和准确度良好。大鼠静注40 mg/kg注射用复方荭草后,分别有4.98%～22.58%的原形成分在尿液中排出,在粪便及胆汁中各原形药物的浓度均低于最低定量限,同时在各排泄物中可检测出相关的代谢产物。结论该方法特异、快速、灵敏,可用于注射用复方荭草在大鼠体内的排泄研究,该药物在大鼠体内有较广泛的代谢途径,原形药物排出量较少。

莲菊感冒胶囊的质量控制及稳定性考察

目的:建立莲菊感冒胶囊的质量控制方法并考察其在加速和室温条件下的稳定性。方法:采用薄层色谱法鉴别莲菊感冒胶囊中的主要药味羊耳菊和穿心莲;采用高效液相色谱法测定制剂中3,5-二咖啡酰基奎宁酸、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。结果:3批莲菊感冒胶囊中试样品经加速试验6个月和长期试验18个月考察,各项指标均符合质量标准要求。结论:莲菊感冒胶囊稳定性良好。

正交试验优选荭叶软胶囊中荭草和山楂叶的提取工艺

目的:优选荭叶软胶囊中荭草、山楂叶的提取工艺。方法:分为水提取和醇沉淀2个步骤,均采用正交试验,以异荭草素+荭草素、金丝桃苷的转移率,总固体物得率的综合评分作为评价指标,以加水量、提取时间、煎煮次数为考察因素,优选水提取工艺;以异荭草素+荭草素、金丝桃苷转移率的综合评分为评价指标,以相对密度、醇沉浓度、放置时间为考察因素,优选醇沉工艺。结果:最佳水提工艺为8倍药材量的水煎煮3次,每次1h;最佳醇沉工艺为药液浓缩至相对密度为1.07,醇沉浓度为65%,放置12h。结论:该提取工艺合理、可行,可用于荭叶软胶囊中荭草、山楂叶的提取。

UPLC-MS/MS法同时测定家兔血浆中6个黄酮类成分及其药代动力学研究

目的:建立UPLC-MS/MS同时测定家兔血浆中注射用复方荭草冻干粉针的6个黄酮类化合物(异荭草素,荭草素,牡荆素,灯盏乙素,木犀草苷,槲皮苷)的分析方法,并计算其在家兔体内的药动学参数。方法:血浆样品酸化后以甲醇沉淀蛋白;色谱采用Waters BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)进行正离子检测,样品分析时间为3.5 min。结果:6个黄酮类成分在家兔血浆中呈良好线性关系,提取回收率在79.4%～105.9%之间,日内、日间精密度和准确度良好,各检测成分的方法回收率分别为异荭草素96.8%～110.1%,荭草素85.8%～98.8%,牡荆素86.0%～110.6%,灯盏乙素86.7%～102.5%,木犀草苷84.1%～93.8%,槲皮苷96.5%～112.2%。6个黄酮类成分在家兔体内的平均滞留时间均较短,在16 min以内。结论:该方法特异、快速、灵敏,可用于注射用复方荭草冻干粉针的药代动力学研究。

液质联用超滤法测定注射用复方荭草中原儿茶酸、异荭草素及野黄芩苷的血浆蛋白结合率

目的测定注射用复方荭草中原儿茶酸、异荭草素及野黄芩苷的血浆蛋白结合率,为临床安全用药提供参考。方法以超高效液相色谱-质谱联用为检测手段,结合超滤离心法,由于基质背景的差异分别建立血浆样本及超滤液中的含量测定方法考察原儿茶酸、异荭草素及野黄芩苷与血浆蛋白的结合情况。结果注射用复方荭草在人血浆中浓度为5～100μg.mL-1时,原儿茶酸、异荭草素及野黄芩苷与血浆蛋白的平均结合率分别为(65.33±0.61)%,(85.97±0.43)%,(90.09±0.28)%。结论原儿茶酸与血浆具有中等强度的结合,异荭草素及野黄芩苷与血浆结合力较强,它们与血浆蛋白结合能力在考察的浓度范围内无浓度依赖性。建立的方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能够满足定量分析测试要求。

平衡透析法研究荭草及其制剂的人血浆蛋白结合率

目的:比较荭草提取物及其复方制剂中两类成分的人血浆蛋白结合率。方法:以超高效液相色谱—质谱联用为检测手段,结合平衡透析法考察单味荭草提取物及注射用复方荭草在人血浆中的蛋白结合率并计算相关参数。结果:在所研究浓度范围内,原儿茶酸与血浆蛋白具有中等强度结合,异荭草素与血浆蛋白结合力较强。经统计分析,两者与血浆蛋白的结合能力在考察浓度范围无显著差异;其中异荭草素指标在复方中的血浆蛋白结合率有所升高,复方中其他的血浆蛋白结合动力学参数相对单味荭草也有一定变化。结论:荭草中化学成分的血浆蛋白结合无浓度依赖性,而在组成复方后某些成分的结合率可能发生改变。

平衡透析法、超滤法结合液质联用技术比较测定注射用复方荭草中黄酮类成分的血浆蛋白结合率

目的:测定注射用复方荭草中黄酮类成分的人血浆蛋白结合率,为临床安全用药及血浆蛋白测试方法研究提供依据。方法:以超高效液相色谱-质谱联用为检测手段,采用平衡透析法、超滤法考察荭草素、牡荆素、木犀草苷、槲皮苷等黄酮类成分与血浆蛋白的结合情况,并比较二者的差异。结果:注射用复方荭草在人血浆中质量浓度为5～100 mg.L-1时,荭草素、牡荆素、木犀草苷、槲皮苷等黄酮的结合率较强且无浓度依赖性,两种测定方法牡荆素和木犀草苷存在统计学差异(P<0.01)。结论:建立的平衡透析法、超滤法均能够满足血浆蛋白结合率测定的要求,两种方法所测定的部分指标存在差异。

UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中异荭草素,野黄芩苷和木犀草苷及其药代动力学研究

目的:建立利用UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中异荭草素、野黄芩苷和木犀草苷等3种黄酮的分析方法,并研究大鼠静脉注射3个剂量的注射用复方荭草后的药代动力学特征。方法:血浆样品采用酸化后甲醇沉淀蛋白,采用WatersAcquity BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM)。结果:3种黄酮成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率78.56%～101.91%,日内、日间精密度和准确度良好,各物质在大鼠体内的平均滞留时间均较短(<22 min)。结论:该方法特异、快速、准确和灵敏,可用于注射用复方荭草在大鼠体内的药动学研究。

HPLC-MS-MS同时检测大鼠血浆中荭草素、牡荆素和槲皮苷

目的:建立一种用于同时检测大鼠血浆中荭草素、牡荆素和槲皮苷3种黄酮成分的准确、灵敏的超高液相色谱-串联质谱分析方法,并研究其在大鼠体内的药代动力学。方法:大鼠静脉注射注射用复方荭草后,采用甲醇沉淀血浆蛋白,通过BEH C18柱分离,乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,采用电喷雾离子化三重四极杆串联质谱,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的二级碎片离子分别为449.2～329.2(荭草素)、433.2～313.0(牡荆素)和449.2～303.4(槲皮苷)。结果:3种黄酮成分在大鼠血浆中线性关系良好,日内、日间精密度(RSD)均<15.71%,准确度在86.25%～112.44%之间。3种黄酮成分在大鼠体内的平均滞留时间均较短在21min以内。结论:本方法快速、专属性强、灵敏度高,适用于注射用复方荭草临床前药代动力学研究。

超高效液相色谱-串联质谱法研究荭草提取物中4个黄酮类成分的大鼠组织分布

目的:建立同时测定大鼠静脉注射荭草提取物后组织器官中荭草素、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷含量的UPLC-MS/MS方法,研究荭草提取物在大鼠体内心、肝、脾、肺、肾等9个组织器官的分布特征。方法:色谱柱为BEH C18柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),流动相:0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速0.35 mL.min-1。组织样品机械匀浆后甲醇沉淀供测定。结果:在线性范围内4个成分的线性关系良好,准确度、日内和日间精密度、提取回收率均符合生物样品的分析要求。大鼠静脉注射荭草提取物后的组织分布试验结果表明:4个成分在肾脏等9种组织器官中均能检测到。4个成分主要分布在肾、肺等组织中,在脑中分布最少。结论:本文方法可用于荭草花提取物在大鼠体内的组织分布研究。

UPLC-MS/MS研究注射用复方荭草中原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的大鼠组织分布

目的:建立同时测定大鼠静脉注射复方荭草后组织器官中原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷含量的UPLC-MS/MS分析方法,研究3种指标成分在大鼠体内的分布特征。方法:采用Acquity UPLC系统,BEH C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm,美国Waters公司),流动相为乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速为0.35 mL.min-1。采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM);组织样本采用机械匀浆、甲醇沉淀处理供测定。结果:3种成分的线性关系良好(r>0.99),准确度、日内和日间精密度、提取回收率均符合生物样品的分析要求。大鼠注射复方荭草后原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷主要分布在肾、肺、心等器官中,在脑中分布最少。结论:指标成分分布研究表明,大鼠静脉给予注射用复方荭草后,体内分布具有不均衡的特征,血流充沛组织的分布相对较多;药物在体内各组织器官消除迅速,无蓄积情况;建立的方法可特异、灵敏、快速地同时测定大鼠组织中的原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷。

野黄芩素在体肠吸收动力学研究

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定野黄芩素的分析方法,研究野黄芩素在大鼠肠道的吸收动力学。方法:采用在体循环灌流模型,考察药物浓度、pH、P-糖蛋白抑制剂、吸收部位对野黄芩素吸收的影响。结果:实验结果表明,野黄芩素的吸收不受pH的影响;野黄芩素在低浓度时吸收转化率(A%)、吸收速率常数(Ka)明显低于中、高浓度;P-糖蛋白抑制剂不影响野黄芩素的肠吸收;在小肠段的吸收优于结肠。结论:野黄芩素在肠内无明显特定吸收部位、非P-糖蛋白的底物,吸收利用较低的原因可能与肠道广泛的代谢和外排分泌作用有关。