自由基与软骨基质胶原蛋白类型改变

本文利用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，定量研究了体外培养的软骨细胞和软骨组织基质中Ⅱ型胶原蛋白的含量。结果表明氧自由基（·Ｏ－２和·ＯＨ）和具有自由基性质的物质（黄腐酸，镰刀菌毒素）可使软骨细胞合成，分泌异常的非Ⅱ型的胶原蛋白，同时，硒化合物可明显地抑制此种效应。

自由基在大骨节病病理过程中的作用——Ⅳ.在自由基及黄腐酸作用下软骨细胞合成的异常胶原蛋白

本文利用CMC柱层析和氨基酸分析的方法,研究了体外培养的软骨细胞合成分泌的胶原蛋白的特征。结果表明,自由基和黄腐酸损伤的软骨细胞趋于合成Ⅰ型胶原蛋白,以代替软骨正常基质中的Ⅱ型胶原蛋白,并且由损伤的软骨细胞合成的胶原蛋白其氨基酸组成也不同于正常的胶原蛋白。

自由基在大骨节病病理过程中的作用——Ⅴ.在异常胶原蛋白中的磷灰石矿化过程

本文研究了在异常胶原蛋白存在下,羟基磷灰石晶种成长过程和固相结晶学性质的特殊表现。结果表明,这种异常的含Ⅰ型胶原蛋白的基质由原来Ⅱ型胶原蛋白的抑制矿化作用,转变为促进矿化,并使固相结晶状态趋于无序,迅速形成大量不规则的晶体,可能是关节变大而且晶体组装变成无序的原因。

自由基引发的软骨细胞异常基质异常矿化异常——大骨节病病理化学过程初探

本文研究了自由基和黄腐酸对软骨细胞的损伤效应。结果表明自由基和黄腐酸可引起软骨细胞损伤。这种损伤的软骨细胞分泌异常基质,在异常基质中,羟基磷灰石的矿化异常,并在此基础上,提出了一个大骨节病的病理化学过程。

胶原蛋白凝胶体系中磷酸钙生成研究

目的：了解和认识生物矿化过程基质的作用。方法：在含磷酸钠并且ｐＨ为７．４的胶原蛋白凝胶上面复盖ＣａＣｌ＿２溶液，研究在界面附近凝胶中晶体生长。结果：在Ⅱ型胶原蛋白凝胶中磷酸钙成核受到抑制，并且生成以磷酸八钙为主的矿物相；Ｉ型胶原蛋白在矿化起始阶段具有富集Ｃａ￣（２＋）的能力，并可将磷酸八钙转化为羟基磷灰石。结论：Ｉ型胶原蛋白可调节磷酸钙矿化过程中的晶体生长。

自由基在大骨节病病理过程中的作用 Ⅲ.自由基及黄腐酸对软骨细胞的损伤

本文利用软骨细胞的体外培养技术研究了活性氧自由基及黄腐酸对软骨细胞的损伤效应。结果表明:在一定浓度的自由基和黄腐酸作用下,软骨细胞的生长受到了抑制,细胞形态及其合成分泌基质的能力也发生了明显的变化。本文对黄腐酸的自由基性质及大骨节病与软骨细胞损伤的关系进行了探讨。

单峰过载对裂尖塑性区晶内损伤分布的影响

为探究金属材料受到变幅疲劳载荷时的晶内损伤状况,采用宏观Chaboche与细观晶体塑性有限元相结合的方法,建立了裂尖多晶模型,模拟的应力-应变曲线与实验基本一致。以修正的Fatemi-Socie准则为疲劳指示因子,筛出裂尖损伤最大的晶粒,统计了晶内总滑移变形量分布,并结合晶内纵向应力分布和广义施密特因子GSF分布情况来对其形成原因进行分析。结果表明,相较于恒幅循环,过载瞬间晶内的纵向应力及GSF最大值与均值的增大导致晶内易滑移的区域扩大和已滑移区域的滑动趋势增加,进而导致晶内总滑移变形量瞬间增大且滑移不均匀性增加。过载会导致后续循环拉伸峰值时刻纵向应力减小及GSF区间的扩大,提高滑移分布不均匀性,且卸载峰值时刻纵向拉应力的减小和压应力的增大会抑制晶内原有滑移增长速率。

铁离子对肌动蛋白聚合的影响

肌动蛋白(Actin)是细胞骨架蛋白之一.在一定的条件下其球状单体(G-actin)可以聚合为丝状聚合体(F-actin).细胞的形态学变化及游动性与此特性有关.已经证明一些金属离子(如K^+,Mg^(2+),Ca^(2+))在ATP存在下可引发肌动蛋白的聚合.我们曾报告Fe(Ⅱ)离子可引起体外培养的软骨细胞形态发生明显变化,并伴有细胞功能的变化.用鬼笔环肽标记方法观察到Fe(Ⅱ)作用于细胞骨架,使细胞骨架微丝系统发生了解组与重组.为了进一步研究Fe(Ⅱ)离子与细胞微丝的相互作用,探讨软骨细胞形态与功能之间的关系.本文利用从兔腿肌肉分离纯化的肌动蛋白,研究了Fe(Ⅱ)离子对肌动蛋白聚合过程的影响.1材料和方法1.1试剂三磷酸腺苷(ATP)购自Sigma公司,叠氨化钠(N_aN_3)和三羟甲基氨基甲烷(Tris)为进口分装试剂;其余均为国产分析纯试剂.1.2肌动蛋白的分离与纯化参照文献[4]方法由兔腿肌肉分离提取丙酮干粉(-15℃可保存数月).取一定量丙酮干粉经离心、盐析及透析等步骤分离并纯化得G-actin.G-actin溶解在缓冲溶液G(2mmol/LTris-HCI,0.2mmol/L ATP,0.5mmol/L二巯基乙醇,1.5mmol/L NaN_3,pH=8.0)中在4℃下放置两周无明显聚合.由紫外分光光度法(A_(290))确定G-actin含量.

乌贼骨中矿物相转化研究

乌贼骨(Cuttle-bone)是一种多孔度达90％,但刚性的天然矿物材料。由甲壳素(Chitin)及蛋白质等有机分子预制的多层房架式结构的基质中沉积有片状的碳酸钙文石。能否利用乌贼骨所具有的高度有序基质而将其无机矿物转化为骨骼、牙齿中所含的磷酸钙矿物,从而获得具有较好生物相容性和理化性能的生物活性材料是一个很有意义的课题。本文利用红外吸收光谱、X-射线衍射及扫描电镜等技术方法研究了乌贼骨在磷酸盐溶液体系中的无机矿物相的转化。结果表明乌贼骨中碳酸钙可与磷酸钙进行同晶置换,在有序的基质中生成了堆积更紧密的磷酸钙矿物。

黄腐酸引发大鼠肝细胞氧自由基产生的研究

黄腐酸(Fulvic acid)可引起细胞的氧化性损伤,导致大鼠血液、肝脏、肌肉及软骨等组织中的 GSH-Px 活力降低和 SOD 活力升高.这些结果提示黄腐酸可能引起机体组织的氧化-抗氧化平衡失调.已知黄腐酸可促进体外黄嘌呤氧化酶-黄嘌呤体系产生超氧自由基(·o_2^-),它所含的醌式结构部分可能参与生物体中单电子氧化还原过程.但黄腐酸是否可以诱导细胞产生活性氧还未见报道.

黄腐酸与大鼠肝细胞微粒体的相互作用

我们已报道过黄腐酸(Fulvic acid,FA)可引发大鼠肝细胞产生活性氧自由基,并导致生物体的氧化性损伤.但是,作为一种外源性物质,黄腐酸在细胞内怎样转化,通过何种机制引发肝细胞产生内源性活性氧物质,尚不清楚.一般认为,外源性物质多是通过肝细胞内氧化-还原酶体系进行生物转化,进而产生活性氧物质.而此类酶体系多存在于线粒体或微粒体中,本文以大鼠肝细胞线粒体和微粒体为研究对象,研究了黄腐酸与微粒体、线粒体的相互作用过程,并探讨了产生活性氧的可能机制.

Study on Generation of Oxygen Free Radicals in Hepatocytes Induced by Fulvic Acid

Fulvic acid (FA), a soluble fraction of the humic adds, is a group of polymers with a number of quinone moieties. It induces oxidative damage to cell, resulting in reduction of GSH-Px activity and increase of SOD activity in rat blood and liver or muscle tissues. This is possibly due to an interruption of the oxidation-antioxidation mechanism in cells.