枯草芽孢杆菌与铜协同作用对5～16周龄五龙鹅生长性能、屠宰性能、营养物质利用率及肉品质的影响

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌与铜协同作用对5-16周龄五龙鹅生长性能、屠宰性能、营养物质利用率及肉品质的影响,旨在探索一种低饲粮铜添加水平的方法。试验选用5周龄五龙鹅360只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复10只（公母各占1/2）。Ⅰ组为对照组（铜添加水平为16 mg/kg,未添加枯草芽孢杆菌）;Ⅱ-Ⅵ组为枯草芽孢杆菌添加组（枯草芽孢杆菌添加水平为250 g/t）,铜添加水平分别为0、4、8、12、16 mg/kg。试验期12周。结果表明：1）枯草芽孢杆菌添加组中铜添加水平为8 mg/kg时平均日增重与料重比最佳。2）Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组屠宰率、半净膛率显著或极显著高于Ⅰ组（P〈0.05或P〈0.01）。3）Ⅳ组的粗蛋白质利用率显著高于Ⅰ组（P〈0.05）,Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组粗纤维利用率、酸性洗涤纤维利用率、铜表观消化率显著或极显著高于Ⅰ组（P〈0.05或P〈0.01）。4）Ⅳ组的沉积氮和氮利用率显著或极显著高于Ⅰ组（P〈0.05或P〈0.01）,粪氮显著低于Ⅰ组（P〈0.05）。由此可见,饲粮中添加枯草芽孢杆菌可以提高铜利用率,从而降低饲粮中铜添加水平,提高生长性能、屠宰性能和营养物质利用率;建议5-16周龄肉鹅在饲粮中添加250 g/t枯草芽孢杆菌条件下,铜适宜添加水平为8 mg/kg。

固相萃取-色谱质谱技术在毒物筛查中的应用进展

固相萃取是近年发展起来的一种样品前处理技术,主要用于样品的分离和富集,能够将生物检材中的目标待测物有效的与杂质组分分离,具有较高的回收率,其样品预处理过程简单,操作便捷。在法庭科学领域,可根据生物检材,如生物体液、组织、毛发等基质的性质,选择相应的固相萃取方法;同时亦可根据目标待测物,如目标待测物的酸碱性,选用不同的固相萃取方法。色谱法是一种分离和分析方法,它利用不同物质在不同相态的选择性分配,使混合物中的不同组分根据其性质不同而分离。质谱法在分析中可提供丰富的结构信息。固相萃取-色谱质谱联用技术集固相萃取与色谱质谱检测技术优点于一体,可实现对复杂基质中的特定毒物与非特定毒物进行高效萃取、净化与检测,具有检材消耗少、检测速度快、灵敏度高等特点,已被广泛应用于环境监测、药物分析、法庭科学领域等,成为当前毒物筛查的重要手段,具有选择性好、灵敏度高、基质效应低等特点,且易实现在线分析,特别适用于法庭毒物分析中单一毒物或多种毒物的筛查。本文综述了固相萃取-色谱质谱联用技术在法庭科学毒物毒品分析中的应用进展,以供同行参考。

马属动物轮状病毒检测方法研究进展

马轮状病毒(Equine rotavirus,ERV)是引起马属动物腹泻的最重要病原体之一。主要传播途径为粪、口传播,临床表现为腹泻、发热、嗜睡、厌食。随着畜牧业集约化的发展,该病呈现暴发流行,给马属动物相关产业造成了严重的经济损失。因此,采取快速有效的检测方法,及时的诊断有利于该疫病的防控。论文就轮状病毒病检测方法的研究进展作一综述,参照了多种动物的轮状病毒检测方法,总结了马属动物轮状病毒检测技术的发展概况,综述了传统检测方法、分子生物学检测方法、免疫学检测方法等研究进展,并探讨了各技术在检测中的优缺点及发展趋势。

低铜饲粮添加枯草芽孢杆菌对5-16周龄五龙鹅肠道发育、微生物菌群结构及血清酶活性的影响

本试验旨在研究低铜饲粮添加枯草芽孢杆菌对5~16周龄五龙鹅肠道发育、微生物菌群结构及血清酶活性的影响。试验选用29日龄五龙鹅360只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复10只(公母各占1/2)。Ⅰ组为最适铜添加组(铜添加水平为16 mg/kg,未添加枯草芽孢杆菌);Ⅱ~Ⅵ组为枯草芽孢杆菌添加组,铜添加水平分别为0、4、8、12、16 mg/kg,枯草芽孢杆菌添加水平均为250mg/kg。试验期12周。结果表明:1)Ⅱ~Ⅵ组的空肠绒毛高度和绒腺比极显著高于Ⅰ组(P<0.01),空肠隐窝深度显著或极显著低于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01);Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ组的空肠肠壁厚度显著高于Ⅰ组(P<0.05)。Ⅱ~Ⅵ组之间的空肠绒毛高度、肠壁厚度和绒腺比无显著差异(P>0.05);Ⅱ组的空肠隐窝深度显著低于Ⅴ和Ⅵ组(P<0.05)。2)Ⅱ~Ⅵ组的盲肠大肠杆菌数量极显著低于Ⅰ组(P<0.01),盲肠双歧杆菌和乳酸杆菌数量显著或极显著高于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01)。Ⅱ~Ⅵ组之间的盲肠大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌数量差异不显著(P>0.05)。3)Ⅳ组的血清谷丙转氨酶(ALT)活性显著低于Ⅰ组(P<0.05),Ⅴ组血清谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)活性显著低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组血清ALT、AST、LDH活性与Ⅰ组差异不显著(P>0.05)。Ⅳ组血清碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组血清AKP活性显著低于Ⅰ组(P<0.05)。由此可见,低铜饲粮添加枯草芽孢杆菌能够促进五龙鹅肠道发育,优化微生物菌群结构;铜对鹅肠道发育及微生物菌群结构影响较小。适宜的枯草芽孢杆菌和铜添加水平能够维护机体健康,相互间具有协同作用。

不同锰水平饲粮添加枯草芽孢杆菌对12～16周龄五龙鹅生长性能、屠宰性能、抗氧化能力及血清生化指标的影响

本试验旨在研究不同锰水平饲粮添加枯草芽孢杆菌对12-16周龄五龙鹅生长性能、屠宰性能、抗氧化能力及血清生化指标的影响,旨在探索一种低锰饲粮配制的方法。试验选用12周龄五龙鹅360只,随机分为6个组,每组6个重复,每个重复10只鹅（公母各占1/2）。Ⅰ组为适宜锰添加组（锰添加水平为105 mg/kg,未添加枯草芽孢杆菌）,Ⅱ-Ⅵ组为枯草芽孢杆菌添加组（枯草芽孢杆菌添加水平均为250 g/t）,锰添加水平分别为0、35、70、105、170 mg/kg。试验期5周。结果表明：1）Ⅳ、Ⅴ组体重、平均日增重显著高于Ⅰ组（P〈0.05）,Ⅳ组料重比显著低于Ⅰ组（P〈0.05）。2）Ⅳ组屠宰率、半净膛率、全净膛率和腿肌率均显著高于Ⅰ组（P〈0.05）,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组腹脂率显著低于Ⅰ组（P〈0.05）。3）Ⅳ组血清总抗氧化能力显著高于Ⅰ组（P〈0.05）,Ⅳ组血清丙二醛含量显著低于Ⅰ组（P〈0.05）,Ⅳ、Ⅴ组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于Ⅰ组（P〈0.05）。4）各组血清碱性磷酸酶活性及甘油三酯、总胆固醇含量差异不显著（P〉0.05）。由此可见,饲粮中添加枯草芽孢杆菌能够显著提高12-16周龄五龙鹅的生长性能、屠宰性能及抗氧化能力,显著提高锰利用率,从而降低饲粮中锰添加水平。在饲粮中添加250 g/t枯草芽孢杆菌条件下,锰适宜添加水平为70 mg/kg。

致马属动物流产沙门氏菌通用型间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

【目的】通过筛选引起马流产的4种沙门氏菌(Salmonella)共同的优势抗原,建立一种敏感高、特异强的通用型间接ELISA(iELISA)抗体检测方法,实现对马群中沙门氏菌抗体的快速高通量检测。【方法】首先利用马流产沙门氏菌阳性血清、阴性血清分别与马流产沙门氏菌全菌抗原进行免疫共沉淀(pull down)试验,筛选出马流产沙门氏菌优势抗原;根据质谱分析结果找到优势抗原基因,将优势抗原基因与其他3种致马流产沙门氏菌病的鼠伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、肠炎沙门氏菌进行序列比对验证其保守性;其次根据抗原性分析对优势抗原编码基因进行分段表达,设计3对引物,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增沙门氏菌优势抗原基因并将其分别克隆至原核表达载体pET28a;测序分析后将构建正确的重组质粒分别转化入大肠杆菌(Escherichia coli E.coli)Rosetta(DE3)中并加入0.6 mmol·L^(-1)异丙基-β-D-硫代半乳糖甘(Isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,观察蛋白的表达形式;蛋白纯化后通过Western blot验证蛋白的反应原性和广谱性;然后利用纯化后蛋白作为包被抗原,通过对包被抗原量、血清和第二抗体浓度等条件进行优化建立马流产沙门氏菌病间接ELISA抗体诊断方法,并对该方法的特异性、敏感性进行评估。最后将该方法应用于试验感染马血清及临床样本的检测,并将检测结果同凝集试验结果比较。【结果】筛选出的马流产沙门氏菌优势抗原是ompA(Outer Membrane Protein,OMP),通过序列比对,该蛋白氨基酸序列与同属鼠伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、肠炎沙门氏菌同源性99.4%—100%,具有很好的保守性;PCR扩增后成功获得3条与预期符合的目的基因;成功构建了pET28a-ompA1、pET28a-ompA2、pET28a-ompA33个重组质粒。SDS-PAGE结果表明,在24℃、0.6 mmol·L^(-1) IPTG诱导5 h下,含有pET28a-ompA1、pET28a-ompA2、pET28a-ompA3的重组菌均表达了相应蛋白,其中重组ompA1和ompA2蛋白以包涵体形式表达,重组ompA3蛋白以可溶性形式表达;Western blot显示,重组蛋白ompA3可与马流产沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、肠炎沙门氏菌阳性血清发生特异性反应,证明重组ompA3蛋白具有良好的反应原性,可以作为沙门氏菌属抗血清检测用抗原;以ompA3蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA方法,在最大P/N比确定的最佳反应条件如下:最佳包被抗原浓度为1μg·mL^(-1),待检血清(1﹕200)37℃作用1 h,酶标抗马二抗(1﹕10000稀释),TMB在37℃孵育10 min,待检血清OD450>0.143判定为阳性,特异性试验结果显示,该包被抗原与常见马传染病阳性血清无交叉反应。通过对沙门氏菌静脉注射感染马的血清样品进行抗体检测,iELISA可以持续监测抗体阳性到116 d,相比微量凝集(69 d)多监测了47 d,因此iELISA具有更好的敏感性。利用建立的iELISA方法对8个不同牧场180份血清进行抗体检测,其抗体平均阳性检出率为63.3%,比微量凝集阳性检出率高53.9%。【结论】成功筛选到了马流产沙门氏菌病4种病原的共同优势抗原ompA,实现了对该蛋白的可溶性表达,建立了马流产沙门氏菌病通用型iELISA抗体诊断方法,该方法可以实现对临床样本马流产沙门氏菌抗体的检测,该方法具有特异性强、敏感性高,可以作为马流产沙门菌病抗体检测的一种有效工具。

亚油酸对5～16周龄肉鹅生长性能、屠宰性能、肌肉品质和营养物质利用率的影响

本试验旨在研究亚油酸对5-16周龄肉鹅生长性能、屠宰性能、肌肉品质和营养物质利用率的影响,以确定饲粮亚油酸的适宜水平。试验选用5周龄五龙鹅360只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复10只（公母各占1/2）。6组（Ⅰ-Ⅵ组,Ⅰ组为对照组）饲粮中亚油酸水平分别为0.52%、0.72%、0.92%、1.12%、1.32%、1.52%。试验期12周。结果表明：1）Ⅲ、Ⅳ组体重、平均日增重显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,料重比（F/G）显著低于对照组（P〈0.05）。2）采用不相关比较法进行分析,饲粮中亚油酸水平为1.09%时屠宰率最高。Ⅳ、Ⅴ组胸肌率显著高于对照组（P〈0.05）,Ⅲ、Ⅳ组腹脂率显著或极显著低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）。3）Ⅲ-Ⅵ组肌肉亮度（L＊）值显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;Ⅳ组肌肉红度（a＊）值极显著高于对照组（P〈0.01）,失水率和剪切力显著或极显著低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;Ⅳ-Ⅵ组pH显著高于对照组（P〈0.05）。4）Ⅳ组粗蛋白质、粗脂肪和钙的利用率极显著高于对照组（P〈0.01）。Ⅱ-Ⅵ组磷利用率显著高于对照组（P〈0.05）。Ⅲ-Ⅵ组粪便氮排泄量显著或极显著低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,沉积氮和氮的利用率显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）。由此可见,饲粮中适宜水平的亚油酸能够提高5-16周龄肉鹅的生长性能、屠宰性能、肌肉品质和营养物质利用率,并降低腹脂率。5-16周龄肉鹅饲粮中亚油酸的适宜水平为0.92%-1.12%。

基于单克隆抗体的非洲马瘟病毒间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

【目的】为有效应对非洲马瘟(African horse fever,AHS)传入我国的风险,研究建立一种基于单克隆抗体(Monoclonal antibody,Mab)的非洲马瘟病毒(African horse fever virus,AHSV)特异性的间接ELISA(indirect ELISA,iELISA)抗体检测方法,利用该方法对我国马匹进行非洲马瘟抗体监测。为有效诊断非洲马瘟提供血清学检测手段。【方法】首先利用AHSV VP7抗原免疫小鼠制备针对VP7抗原的单克隆抗体;其次通过对包被抗体浓度、蛋白浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度等反应条件的优化建立AHSV iELISA抗体检测方法。利用1000份血清确定该方法的临界值,并评估该方法的敏感性和特异性。由3位试验操作者分别对AHSV敏控阳性血清进行加速试验测定效价,评估该方法的稳定性。通过利用建立的方法对已知的10份AHSV阳性血清和400份阴性血清进行检测并与国外商品化试剂盒检测结果进行比较;最后用该方法对我国2021年18个省份或地区的947份临床样本进行检测来评估我国马匹中AHSV感染风险。【结果】获得了5株针对AHSV VP7抗原的单克隆抗体。通过对5株单克隆抗体筛选确定3G9单克隆抗体捕获抗原性能最佳。利用3G9抗体作为包被抗体,通过对不同反应条件优化建立了AHSV iELISA抗体检测方法。确定该方法的临界值为0.25;经比对试验证实本研究建立的AHSV iELISA方法的敏感性与商品化试剂盒相当。3位操作者分别对敏控血清进行检测,组内变异系数范围分别为3.19%—7.02%、0%—3.11%、0.27%—5.76%,组间变异系数为1.17%—5.03%。37℃加速试验表明AHSV阳性血清7 d内效价稳定,因此证明该方法具有良好的稳定性。该方法与商品化试剂盒进行比较两者总体符合率为100%。通过对我国18个省或地区的947份马血清进行检测,结果表明AHSV抗体阳性率为0%。【结论】成功筛选到了针对AHSV VP7的单克隆抗体,建立了一种基于单克隆抗体的AHSV iELISA抗体检测方法,该方法具有特异性强、敏感性高、稳定性好,可以实现临床样本中AHSV抗体的检测,因此可以作为AHS血清学监测的一种有效工具。

开腔He-Ne激光器谐振腔四步目测调节法

对开腔He-Ne激光器谐振腔的调节进行了分析和整理,总结了一套简便可行的四步目测调节方法,为充分利用该试验平台开展激光原理实验提供一定帮助。

基于“数字原生代”大学生的翻转课堂教学设计

信息化背景下“数字原生代”大学生的学习正逐渐从教室学习转向在线学习，传统的教学模式受到了严峻的挑战。本文在分析大学生学习特征的基础上，吸收、借鉴翻转课堂已有教学模式的优点，从教学目标、教学媒体、教学评价等方面构建出一种相对完善的“双主体”翻转课堂教学设计，以期减少“数字原生代”大学生过度依赖手机的现象，促使学生学会自主管理学习，完成学业。

马疱疹病毒2型研究进展

马疱疹病毒2型(equine herpesvirus 2,EHV-2)属于疱疹病毒科γ疱疹病毒亚科,通常导致马呼吸道症状以及免疫抑制,进而引发其他疾病,现已成为引起马流产的潜在病原体。该病毒最大特点为潜伏感染,已流行于全世界,近年来我国也有检测到病毒的报道,这给养马业造成潜在威胁。目前对EHV-2致病机理尚不清楚,且未有针对EHV-2的疫苗,这给该病的防治带来一定的挑战。本文围绕EHV-2感染的病原学、国内外流行情况、临床表现、检测方法等进行了综述,以期为进一步研究提供参考。

新入园幼儿分离性焦虑的研究综述

焦虑是指对结果不确定的事情的不安感和忧虑感。焦虑具有年龄特点，在幼儿园的最初几天，当父母第一次离开教室时，就可能会有分离焦虑。焦虑情绪一旦过度，就可能导致分离性焦虑障碍，因此新入园幼儿分离性焦虑值得我们关注。本文将从对幼儿焦虑情绪影响较大的家长、幼师、幼儿园三个角度进行文献梳理，寻找空间，帮助幼儿克服分离性焦虑情绪，为缓解幼儿入园焦虑奠定理论基础。

小儿胆总管囊肿的手术治疗及并发症处理

胆总管囊肿(choledochal cyst,CC),亦被称作胆管扩张症,可以在患儿母亲产检时发现。据相关报道,在日本每1000人就有1人患病,远远高于西方人群[1]。病患中女性占多数,男女比例为1∶3-1∶4。30%-60%的患者在10岁之前就出现临床症状[2]。CC的长时间存在会引起胆道一系列的炎症反应,由于囊肿壁反复受到炎症的刺激,有癌变的风险,所以胆总管囊肿切除、胆道重建手术成为治疗的金标准[3]。

颗粒阻尼器随机控制研究

颗粒阻尼器是一种减振性能良好的被动控制装置。由于其呈现较强的非线性特征,本文基于将多颗粒等效为单颗粒的原则,采用等效线性化的方法通过四阶龙格库塔迭代计算,获得颗粒阻尼结构体系在随机振动下的均方根响应,继而对其设计参数进行分析。研究结果表明对于给定的颗粒阻尼结构体系,存在最优的自由行程d使结构加速度均方根最小,同时质量比μ的最优取值与自由行程d紧密相关。

引信润滑与减摩技术综述

为了给引信润滑与减摩技术的研究和应用提供参考,查阅了近年来国内外公开发表的相关文献,从引信材料和润滑与减摩方式的选用两方面综述了引信润滑与减摩技术的研究进展,分析并对比了不同材料的摩擦性能,总结了不同的减摩与润滑方式在目前引信行业中的应用情况。国产润滑油和润滑脂在特定引信中已有应用,其减摩效果显著,且高低温性能、长贮性能等能够满足要求。石墨和二硫化钼等干粉润滑剂在引信中已得到较为广泛应用。

不同月龄巴杜公猪精液品质分析

为研究不同月龄巴杜种公猪的精液品质差异,本实验选择8~12、13~18、19~24、25~30、31~36月龄各6头巴杜种公猪,进行精液品质检查。结果表明:随着月龄增加,巴杜种公猪精液的各项指标呈现规律性变化,19~24月龄的采精量、精子密度和精子活率显著高于其他月龄段,且精子畸形率显著低于其他月龄段;24月龄之后采精量、精子密度和精子活率缓慢下降,而畸形率则逐渐上升。本研究结果可为合理选择配种日龄、人工授精公猪的使用年限及人工授精的输精量提供数据支撑,为巴杜种公猪精液的合理应用及提高猪场经济效益提供参考依据。

小儿腹股沟嵌顿疝合并石骨症1例并文献复习

石骨症(osteopetrosis)又称大理石骨、硬化性骨化病等,是一种由于破骨细胞数目减少或功能缺陷导致的以骨吸收障碍为主的罕见遗传性代谢性骨病,发病率约1/100000[1],最早于1904年由德国放射学家Albers Schonberg报道,故又称为Albers Schonberg病[2]。其典型临床特征为骨密度增高、骨骼畸形,因其具有骨骼硬化的特点,1926年又被命名为石骨症。由于其发病率低,临床比较罕见,目前国内文献报道较少。

马病毒性动脉炎实验室诊断技术研究进展

马病毒性动脉炎是由马动脉炎病毒引起的一种马属动物呼吸道和生殖道疾病,是危害马业的疾病之一。该病引起的发热和流产等症状易与某些马属动物疾病混淆,给临床诊断带来了一定的困难,因此,结合实验室检测进行准确的诊断是关键。实验室检测方法主要有病原学检测方法和血清学检测方法,每种检测方法都有其各自的优点和不足,要根据不同的检测目的进行选择或者联合使用,综合分析数据。论文对该病实验室诊断技术的最新研究进展进行综述,为马病毒性动脉炎的诊断与防控提供参考。

数码电子雷管应用问题的探讨

基于国内外数码电子雷管的发展概况,分析了数码电子雷管在国内应用存在的问题,指出了国内数码电子雷管需提高的关键技术,从而为其在国内的推广应用提供方向性指导建议。

论延期元件燃速的影响因素

着重论述了影响延期元件燃速的因素。通过设计对比试验,分析试验数据,在综合考虑影响因素的基础上就如何控制延期元件的生产工艺提出了自己的一些见解和建议。