RNA恒温扩增实时荧光检测技术在检测脑脊液中结核分枝杆菌的应用

目的评估用RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT-TB)快速检测脑脊液中结核分枝杆菌(MTB)的临床应用价值。方法采集来我院接受检查的高度疑似儿童结核性脑膜炎患儿96例(A组),非结核性脑膜炎儿童78例(B组),分别采用夹层杯离心集菌法、罗氏培养法、SAT-TB和MTB DNA荧光定量扩增法(TB DNA)同时检测,比较筛检指标及临床应用价值。结果 A组脑脊液检测中罗氏培养法、TB DNA和SAT-TB法检测阳性率分别为40.63%、39.58%、42.71%,三者差异无统计学意义(X^2=0.20,P>0.05);以罗氏培养法作为金标准,SAT-TB法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确指数、误诊率、漏诊率、诊断符合率分别为92.31%、91.23%、87.80%、94.55%、0.84%、8.77%、7.69%和91.67%;TB DNA法的各项指标分别为66.67%、78.95%、68.42%、77.59%、0.46%、21.05%、33.33%和73.96%。结论 SAT-TB检测脑脊液标本中的MTB,具有快速、敏感度和特异度较高等优点,可提高脑脊液标本中MTB的检出率,从而提高儿童结核性脑膜炎的诊断水平。

GeneXpert MTB/RIF系统在结核性胸膜炎快速诊断中应用价值

为提高结核性胸膜炎的诊断效率,我院于2014年4～7月对60例结核性胸膜炎患者使用美国生产Gene Xpert MTB/RIF系统检查结核分枝杆菌,取得较高检出率,报告如下。

徐州地区结核分枝杆菌基因分型及其与利福平耐药基因突变的关系

目的探究徐州地区结核分枝杆菌的基因型分布特征及其与利福平耐药基因突变形成的关系。方法选取徐州市传染病医院结核病实验室基因型毒株500株,其中含有经罗氏比例法鉴定的耐利福平临床分离株300株和利福平敏感200株,采用间隔区寡核苷酸分型(spoligotyping)分析其基因型结构及其与利福平抗性基因的突变关系。结果徐州地区的结核分枝杆菌的基因分型主要为北京家族基因群(61.2%)和非北京家族基因群(38.8%),利福平耐药和敏感组北京家族基因群的构成比差异无统计学意义(2=0.09,P>0.05);北京家族531位点、516位点以及531和526位点突变率分别为55.49%、10.99%和7.69%与非北京家族33.90%、21.19%和15.25%相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论徐州地区结核分枝杆菌基因型为北京家族基因群和非北京家族基因群,非北京家族基因群具有基因多态性,两者与利福平耐药率无明显相关,两者在单531、单516以及531和526利福平耐药位点突变率存在差异。

Mtb耐异烟肼基因变异株的体外最小抑菌浓度研究

目的研究Mtb耐INH临床分离株katG基因、inhA基因、ahpC基因突变对其体外最小抑菌浓度(MIC)的影响。方法对临床分离的耐INH的160株Mtb及对INH敏感的40株Mtb进行耐药基因芯片检测;并对所有标本进行INH MIC测定,比较不同变异株的MIC结果,其数据采用t检验进行比较,以P<0.05为差异有统计学意义。结果Mtb耐INH株katG315基因变异占68.8%(110/160),katG315基因变异株的MIC为(20.20±19.46μg/ml),高于inhA变异株(0.73±0.82μg/ml)(t′=10.9171,t′α=1.9807,P<0.05);低于katG315+inhA变异株(69.33±32.45μg/ml),(t′=7.164,t′α=2.0627,P<0.05)。结论 Mtb耐INH基因有不同的突变模式,各模式存在不同的耐药程度,此可以给临床用药进一步提供参考。

肺结核下呼吸道感染及抗菌药物合理应用研究

目的研究肺结核患者继发肺部感染时的常见病原体种类及其敏感药物,为临床抗菌药物合理应用提供依据。方法对我院住院肺结核患者下呼吸道标本分离出致病菌者752例按G+球菌、G-杆菌和真菌分组分析,并按种类进行药敏试验,分析感染菌谱和耐药状况。结果分离出的病原体中,以G-杆菌为主,占50.0%,其次是真菌和G+球菌,分别占25.0%和21.7%;白色念珠菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯杆菌占前3位;药敏结果显示,G-杆菌对亚胺培南、阿米卡星敏感性较高;G+菌对万古霉素敏感性较高;白色念珠菌对5-氟胞嘧啶最为敏感。结论明确肺结核患者下呼吸道感染的病原体种类和药物敏感试验结果,选择合理有效的抗菌药物,是及时治疗、挽救患者生命的关键。

结核分枝杆菌gyrA基因突变与氟喹诺酮类药物体外最低抑菌浓度的关系

目的探讨结核分枝杆菌gyrA基因突变与氟喹诺酮类药物体外最低抑菌浓度(MIC)的关系。方法收集640例痰结核分枝杆菌阳性临床分离株,用探针熔解曲线法筛选gyrA基因耐药决定区突变株,对其gyrA基因耐药决定区进行测序,并检测氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星及加替沙星对不同突变位点菌株的MIC,分析其差异。结果探针熔解曲线法筛选出gyrA突变株共45株(7.03%),其中90位点突变15株(33.33%)、94位点突变26株(57.78%)、91位点突变4株(8.89%)。90位点突变菌株中,氧氟沙星高水平耐药2株,左氧氟沙星无耐药,莫西沙星低水平耐药3株、高水平耐药2株,加替沙星高水平耐药3株;91位点突变菌株中,氧氟沙星、左氧氟沙星无耐药,莫西沙星高水平耐药2株,加替沙星高水平耐药1株;94位点突变菌株中,氧氟沙星低水平耐药4株、高水平耐药7株,左氧氟沙星低水平耐药7株,莫西沙星低水平耐药2株、高水平耐药13株,加替沙星低水平耐药3株、高水平耐药14株。除左氧氟沙星外,90位点突变菌株对其他3种药物易出现高水平耐药;91位点突变菌株对莫西沙星易出现高水平耐药;94位点突变菌株对莫西沙星、加替沙星多为高水平耐药,其中天冬氨酸(Asp)→天冬酰胺(Asn)和Asp→甘氨酸(Gly)突变类型的菌株更易出现。结论结核分枝杆菌gyrA基因突变类型与氟喹诺酮类药物MIC相关,可为临床用药提供重要参考。

抗结核药物致早期肾功能损害的监测

目的检测尿微量白蛋白和血清胱抑素C含量，评价抗结核药物致早期肾损伤。方法本研究测定抗结核板式组合药物服用者复治和初治组各60和120人尿液中尿微量白蛋白和血清胱抑素C含量，结合血液肾功能状况，评价患者早期肾损伤。结果初治组治疗1月后血清胱抑素和尿微量白蛋白与治疗前时相比明显升高，u=129718和11．1071，P=O0000和0．0000；复治组血清胱抑素和尿微量白蛋白在O5月后即明显升高，t’=68711和3．4119；t’α=2．001和2．001，P〈0．05。并在治疗2月后达高峰值。结论而定期监测血清胱抑素C、尿液微量白蛋白，可及时发现早期肾功能异常，可逆转早期肾损伤及防止进一步加重，有利于结核病患者不良反应早期发现及治疗。

结核分枝杆菌潜伏性感染诊断的潜在标志物蛋白研究

目的比较结核分枝杆菌标准株与休眠株蛋白质组差异表达情况,探讨结核潜伏性感染相关的诊断标志物。方法选取结核分枝杆菌标准株H37Rv和由标准株诱导的潜伏性感染菌株模型(休眠株)的样本,每个样本各培养3皿。对2组样本中的菌株进行裂解并抽提蛋白,进行同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)检测与分析,获得标准株与休眠菌株中相关蛋白质组的表达数据,并利用蛋白富集、信号通路分析等生物信息学技术将差异蛋白进行分类,进一步确定参与能量代谢通路的相关蛋白。结果所检测的187个蛋白质中,64个蛋白质具有差异性表达,其中40个蛋白质表达上调,24个蛋白质表达下调。P9WPC9蛋白在休眠菌株与标准株中表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论P9WPC9蛋白主要参与细菌的能量代谢通路,可能成为结核潜伏性感染的潜在诊断标志物。

基于财务工程视角的企业风险管理创新研究

本文首先概述了企业风险管理以及企业财务风险的基本理论,然后分析了财务工程创新在企业风险管理中的相关应用,最后提出了企业风险创新管理的政策建议,以便更好地实现企业的风险管理和财务目标。

转型企业人力资源外包的新风险及其控制

首先概述了转型企业人力资源外包的优势,然后详细分析了转型企业人力资源外包商甄选失当、过度依赖、高额转换成本以及变革冲突等方面的新风险,最后从人力资源职能外包各个流程阶段出发,提出了转型企业人力资源外包全程式风险控制策略。

复治肺结核患者采用不同化疗方案的效果评价

目的评价复治肺结核新方案与复治肺结核标准方案满疗程的疗效及停药后随访3年的复发率，探讨如何提高复治肺结核的治疗成功率，减少失败率和降低复发率。方法本研究采取前瞻性队列研究，分散随机法。国内有22家结核病防治（简称“结防”）机构共同参与，选择确诊的菌阳复治肺结核患者，排除MDR-PTB、XDR-PTB、非结核分枝杆菌肺病、对治疗有影响的并发症和复治个体化组。根据随机号分为3个组：第1组为采用高剂量的复治新标准方案组（简称“高剂量组”，86例）；第2组为采用长疗程的复治新标准方案组（简称“长疗程组”，83例）；第3组采用复治标准方案（简称“标准方案组”，82例）。评价上述三组满疗程的治疗成功率、不良反应发生率和停药后随访3年的复发率。结果高剂量、长疗程、标准方案组满疗程治疗成功率分别为84．9％（73／86）、73．5％（61／83）和62．2％（51／82），3组差异具有统计学意义（χ^2=11．152，P=0．004）；3组治疗失败率分别为4．7％（4／86）、16．9％（14／83）和19．5％（16／82），3组间差异具有统计学意义（χ^2=9．084，P=0．011）。3组胸部病变X线摄影评价的吸收好转率分别为87．5％（70／80）、86．3％（69／80）和74．0％（54／73），3组间比较差异无统计学意义（χ^2=5．912，P=0．052）；空洞闭合率分别为28．9％（11／38）、46．5％（20／43）和27．8％（10／36），3组间比较差异无统计学意义（χ^2=3.940，P=0．139）；恶化率分别为1．2％（1／80）、1．2％（1／80）和6．8％（5／73），3组间比较差异无统计学意义（确切概率法，P=0．115）。3年累计复发率占随访例数的5．6％（10／177），高剂量组与长疗程组和标准方案组复发率分别为5．6％（4／72）、1．7％（1／59）和10．9％（5／46），3组比较差异无统计学意义（确切概率法，P=0．135）。10例复发患者中有5例采用复治标准化疗方案。结论适当提高剂量和延长强化期（高剂量组）较复治标准化疗方案（标准方案组）可有效提高治愈和治疗成功率，并减少治疗的失败率。

科技创新型企业的双层股权结构研究——基于京东和阿里巴巴的案例分析

大批优秀的中国科技创新型企业赴美上市融资,使得本土优质上市资源流失,值得我国资本市场进行深刻反思。海外资本市场对于股权结构的包容性是吸引科技创新型企业的重要原因。本文基于京东和阿里巴巴这两家实行双层股权结构并在美国上市的科技创新型企业的典型案例,研究科技创新型企业主动选择双层股权结构的影响因素及其效果。本文研究发现,科技创新型企业的成长周期及融资特征、IPO前创始人团队与投资者之间力量博弈是企业选择双层股权结构的重要因素。京东和阿里巴巴通过实行双层股权结构,使得创始人团队树立的企业信条和企业文化得以延续,较好地解决了企业战略的制订和企业管理层选聘和传承的治理问题,能有效抵制对公司的恶意收购。在新股发行注册制改革及"大众创业、万众创新"的宏观背景下,探讨双层股权结构在中国的适用性具有重要的实践意义。

优化方案治疗复治药物敏感肺结核的疗效评价

目的评价优化方案治疗复治药物敏感肺结核患者的临床疗效及安全性。方法采取多中心、随机、开放、平行、对照的前瞻性队列研究,中心单位统一发放随机号随机分组,选取复治涂阳培阳或涂阴培阳肺结核患者共381例为研究对象,其中优化治疗方案组(简称"优化方案组")244例和标准化治疗方案组(简称"标准方案组")137例。采用SPSS 19.0软件进行数据统计,计数资料采用χ^(2)检验,当理论频数<1时,采用Fisher确切概率法检验,以P<0.05为差异有统计学意义。比较两组方案治疗成功率及不良反应发生等情况。结果疗程结束,优化方案组治愈175例,完成治疗30例,治疗成功率为84.0%(205/244);标准方案组治愈92例,完成治疗10例,治疗成功率为74.5%(102/137),两组比较差异有统计学意义(χ^(2)=5.128,P=0.024)。优化方案组和标准方案组不良反应发生率分别为25.8%(63/244)和21.2%(29/137),两组比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.037,P=0.309);严重不良反应发生率分别为2.5%(6/244)和4.4%(6/137),两组差异无统计学意义(χ^(2)=0.525,P=0.469)。结论优化方案可提高复治药物敏感肺结核患者治疗成功率,且不增加药物不良反应的发生率。

基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药水平和katG、inhA、oxyR-ahpC以及rpoB基因突变位置的关联性分析

结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）是一种能够引起结核病的病原菌,除了能够引起常见的肺结核外,还能够侵犯全身多个器官引起相应结核病。肺结核病是由结核分枝杆菌引起的呼吸系统传染病,人感染结核分枝杆菌后是否发病与免疫功能密切相关。目前结核病的诊断和治疗面临着巨大挑战,尤其是难治性结核病及耐药结核病的诊断及有效治疗问题。

复治肺结核耐异烟肼患者和耐利福平患者治疗效果的分析

目的分析耐异烟肼、耐利福平和敏感的复治肺结核患者的治疗结局,探讨耐异烟肼患者的预后。方法采取回顾性调查的方法,选择2009年7月至2019年7月首都医科大学附属北京胸科医院联合国内20余家结核病防治机构共同合作纳入的资料完整并有治疗转归结果的922例复治菌阳肺结核患者,排除219例耐多药及广泛耐药肺结核患者,排除非利福平和非异烟肼耐药的100例患者,共入选复治菌阳肺结核患者603例。复治肺结核敏感患者的治疗方案采用复治标准化方案,耐异烟肼或耐利福平治疗方案采用个体化方案,对其中药物敏感的485例患者(简称"敏感组")、耐异烟肼(包含异烟肼单耐药和多耐药)的73例患者(简称"耐异烟肼组")和耐利福平(包含利福平单耐药和多耐药)的45例患者(简称"耐利福平组")的治疗转归进行对比分析。结果在治疗2个月末时,耐异烟肼组痰涂片阴转率(63.6%,42/66)和痰培养阴转率(63.6%,35/55)均分别低于耐利福平组[84.6%(33/39)和70.6%(24/34)]和敏感组[84.2%(388/461)和80.0%(343/429)],差异均有统计学意义(χ^(2)=16.567,P<0.001;χ^(2)=8.500,P=0.014);在治疗6个月末时,耐异烟肼组痰涂片阴转率(79.7%,47/59)和痰培养阴转率(76.5%,39/51)均分别低于耐利福平组[89.2%(33/37)和93.5%(29/31)]和敏感组[91.5%(398/435)和90.8%(367/404)],差异均有统计学意义(χ^(2)=8.127,P=0.017;χ^(2)=10.533,P=0.005)。耐异烟肼组治愈率(53.4%,39/73)低于耐利福平组(60.0%,27/45)和敏感组(69.5%,337/485),差异有统计学意义(χ^(2)=8.407,P=0.015);耐异烟肼组治疗成功率(64.4%,47/73)低于耐利福平组(75.6%,34/45)和敏感组(82.1%,398/485),差异有统计学意义(χ^(2)=12.587,P=0.002)。结论复治肺结核患者中,耐异烟肼患者痰菌阴转率和治疗成功率均低于耐利福平患者和敏感患者;应重视每一种药品的耐药情况,特别是临床应用时间较长的药品。

2013～2017年徐州市非结核分枝杆菌菌种鉴定、三间分布和耐药性分析

目的分析徐州市非结核分枝杆菌菌种、三间分布和耐药性。方法将2013～2017年就诊患者及临床标本作为研究对象,分离出非结核分枝杆菌菌株70例,分析非结核分枝杆菌感染患者的三间分布;对标本进行抗酸染色,PCR-反向点杂交,行分枝杆菌培养,并进行菌群菌种鉴定及耐药性分析,制作耐药性分析统计表。结果非结核分枝杆菌感染率呈上升趋势,绝对增长量中累计增长量与逐年增长量均为正值;非结核分枝杆菌患者的年龄分布呈现双峰分布,即26～<66岁组、≥66岁组感染人数较多;非结核分枝杆菌患者地区之间无明显差异;胞内分枝杆菌感染人数最多,戈登分枝杆菌占比最少;胞内分枝杆菌对各种常见抗结核药物的耐药性较高,鸟分枝杆菌具有普遍耐药性,其他菌种的耐药性同样较高。结论徐州市地区的非结核分枝杆菌感染呈上升趋势,耐药性情况较为严峻,应该给予重视。

玉米精密播种机械的研究现状与发展趋势

播种是玉米种植的重要环节之一,玉米精密播种机械可以同步进行挖穴与落种,并适应各种播种环境,能够提高播种的效率,提高种子发芽率。通过玉米精密播种机械的推广应用,可以实现在高产期高质量地完成大面积玉米种植作业。课题组简要概述了国内外玉米精密播种机械的研究现状以及目前尚存的问题,如因技术水平的限制而在技术推广方面存在瓶颈,以及缺乏可靠性试验。同时,课题组针对现存问题提出了一些解决策略,并结合我国生产现状对我国未来玉米精密播种机械研究方向进行了展望:一是提高玉米精密播种机械的经济性与可操作性,二是针对不同区域的特点开展适应性研究,三是拓展智能化精密播种机械的研究领域。

商誉后续计量方法的探讨:预期导向还是经济后果导向

基于商誉本质及商誉减值方法的应用现状,探讨商誉减值乱象的经济后果与成因。现行的减值测试主要倚重管理层预期,而商誉价值的预期又缺乏可验证性和可靠性,导致当前我国资本市场上巨额商誉和商誉减值沉珂积弊,抑或成为管理层驾驭商誉减值进行财务"洗大澡"的操纵工具。商誉中隐匿的泡沫危如累卵,此时若重新将摊销方法与减值测试相结合,则更能反映商誉的资产本质,减少商誉后续计量的主观性和随意性,压缩商誉体量并切实挤出商誉泡沫,因而具有一定合理性。但是,商誉后续计量变革的实施难度不容小觑,商誉摊销的具体方法有待会计准则的规范和指引。

结核分枝杆菌耐利福平基因变异株的体外最小抑菌浓度研究

目的研究结核分枝杆菌(MTB)耐利福平临床分离株基因突变对其体外最小抑菌浓度(MIC)测定结果的影响。方法用基因芯片对临床分离的对利福平耐药的175株MTB及对利福平敏感的48株MTB进行耐药基因检测;并对所有标本进行利福平的MIC测定,比较不同变异株的MIC测定结果。结果对利福平耐药的MTB临床分离株基因突变以531、526、516、533位点单突变为主;531位点单突变的利福平耐药变异株MIC高于526位点单突变的耐药变异株,差异有统计学意义(t′=2.2237,t′α=2.0449,P<0.05);526位点单突变的利福平耐药变异株MIC高于516位点单突变的耐药变异株,差异有统计学意义(t=2.2056,P=0.0329,P<0.05)。双突变者均有较高的MIC测定值。结论合理的基因芯片设计能检出95.0%以上的对利福平耐药MTB变异株;对利福平耐药的MTB变异株有不同的基因突变模式,且不同突变模式的MTB耐药程度不同,可以为临床用药提供参考。

关联方关系及其交易披露若干问题的探讨

随着一系列针对关联方交易的法律法规的出现,证券市场关联方交易的问题仍然层出不穷。这不仅是存在于我国上市公司的一个普遍现象,也是世界性的问题。针对此现象,本文对关联方交易披露存在的问题进行了着重分析,并深入探索了关联方交易披露存在问题的原因,提出对策以期规范上市公司的关联交易和维持整个证券市场的稳定。